Untersuchungsprodukte
Das Studienprodukt UC-II® (Lot 1204004) wurde vom Brustbein abgeleitet., Es wurde unter den aktuellen Bedingungen der Good Manufacturing Practice (cGMP) unter Verwendung eines patentierten Verfahrens hergestellt, das seine native Struktur bewahrte (Chick Cart Inc. Fort Smith, AR). Sowohl Glucosaminhydrochlorid (GH) als auch Chondroitinsulfat (CS) wurden über Wilke Resources (Lenexa, KS) erworben. Die Wellable Group (Shishi City, Fujian) stellte GH unter cGMP und gemäß den Spezifikationen der United States Pharmacopeia 26 her. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) stellte CS aus Rindern unter cGMP her., UC-II und GC wurden in undurchsichtige Kapseln der Größe „00“ mit ausreichenden Mengen an Hilfsstoffen (mikrokristalline Cellulose und Siliciumdioxid) eingekapselt, so dass sie sensorisch identisch mit Placebo waren. InterHealth Nutraceuticals lieferte alle Studienmaterialien. All American Pharmaceutical (Billings, MT) hat die Menge der Wirkstoffe in den Studienkapseln überprüft. Studienmaterialien wurden in einem sicheren Schrank aufbewahrt, wobei der Zugang zum Standortkoordinator, dem Apotheker und dem Hauptermittler beschränkt war.,
Studiendesign
Ziel dieser randomisierten, doppelblinden, placebokontrollierten klinischen Studie war es, die Fähigkeit von UC-II zur Verbesserung der Kniesymptome bei OA-Probanden zu bewerten, gemessen anhand des gesamten WOMAC-Scores im Vergleich zu Placebo und GC. Die Studie wurde an 13 Zentren in Südindien. Aufgrund einer Einschränkung der Synovialflüssigkeitsentnahmeverfahren an mehreren klinischen Standorten wurde die Studie unter zwei separaten Studienprotokollen durchgeführt., Die Studienprotokolle wurden von der Institutional Ethics Committee (IEC) jedes Zentrums genehmigt und im Register für klinische Studien Indiens als Studienprotokolle 003663 und 003348 aufgeführt. Einschreibung, Randomisierung und Follow-up-Besuche waren für beide Protokolle identisch und wurden an den Tagen 1 (Baseline) durchgeführt), 7, 30, 60, 90, 120, 150 und 180 (Tabelle 1). Alle Ermittler nahmen an denselben Ermittlungssitzungen teil, verwendeten identische Einlass-und Datenmeldeformulare und wurden von derselben Gruppe klinischer Forschungsmitarbeiter geschult und überwacht.,
Wirksamkeitsmessungen wurden bei allen Besuchen bewertet und beinhalteten WOMAC -, VAS-und LFI-Indizes. Der Knieflexion Range of Motion (ROM) – Test wurde bei jedem Besuch durchgeführt. Thema Tagebücher und Studie Produkt zur Verfügung gestellt wurden, überhaupt besucht, außer Tages-180 gesammelt und waren an allen follow-up-Besuche., Probanden wurden angewiesen, zu Rekord tägliche der Verbrauch der Studie Produktes, die Verwendung von rescue-Medikation, sowie als Begleitmedikation in das Thema Milchprodukte für die gesamte Dauer der Studie. Blut und Urin wurden am Screening und am Tag 180 gesammelt. Schwangerschaftstests wurden bei Screening – und Follow-up-Besuchen durchgeführt. Unerwünschte Ereignisse (AEs) wurden unter Verwendung der Tagebucheingaben jedes Probanden sowie von Fragebögen zum Besuch vor Ort aufgezeichnet, die von Aufnahmepersonal bei allen Studienbesuchen verwaltet wurden.,
Klinische Endpunkte
Der primäre Endpunkt wurde definiert als die Veränderung des gesamten WOMAC-Scores vom Ausgangswert bis zum Tag 180 für die UC-II-Gruppe im Vergleich zu Placebo und GC. Sekundäre klinische Endpunkte für beide Protokolle waren ähnlich und beinhalteten die Veränderung vom Ausgangswert bis zum Tag 180 gegenüber Placebo und GC für alle Endpunkte einschließlich der folgenden Werte: (1) mittlere VAS; (2) mittlere WOMAC-Subskalen; (3) LFI; und (4) Kniebeugung. Ein weiterer Endpunkt beinhaltete die Änderung vom Ausgangswert zum Tag 180 für den Serumbiomarker Knorpel oligomeres Matrixprotein (COMP)., In Protokoll 003348 umfassten zusätzliche sekundäre Endpunkte die Veränderung des Serumbiomarkers, des C-reaktiven Proteins (CRP) sowie der Synovialflüssigkeitsbiomarker Interleukin (IL)-6 und der Matrix-Metalloproteinase (MMP)-3 vom Ausgangswert bis zum Tag 180.
Studienteilnehmer
Insgesamt wurden 234 Probanden untersucht und 191 randomisiert (Abb. 1). Studieinschlusskriterien waren 40-75 Jahre alte männliche und weibliche Probanden, ein Body-Mass-Index (BMI) von 18-30 kg/m2, mittelschwere bis schwere OA durch körperliche Untersuchung (Krepitus, Knochenvergrößerungen, Gelenkschwellungen usw.).,) in einem oder beiden Knien, Knieschmerzen für mindestens 3 Monate vor Beginn der Studie, ein LFI-Score zwischen 6 und 10 und ein VAS-Score von 40-70 mm 7 Tage nach Entzug von ausgeschlossenen Medikamenten, plus ein Knie-Röntgenbild, das als Kellgren und Lawrence (K-L) Radiograph Score von entweder 2 oder 3 eingestuft wurde . Alle OA-Diagnosen wurden von jedem Untersucher am Studienort bestätigt und im Case Report Form (CRF) des Probanden notiert. Im Falle einer bilateralen Kniebeteiligung zeigte das für die Studie verwendete Indexknie zu Studienbeginn die schwersten OA-Symptome., Detaillierte Einschluss-Ausschlusskriterien sind in Tabelle 2 zusammengefasst.
Einschreibungs-und Randomisierungsflussdiagramm
Ethik, Zustimmung und Berechtigungen
Die Probanden wurden rekrutiert, nachdem sie die Studiendetails überprüft, verstanden und dann das IEC-genehmigte Einwilligungsformular unterschrieben hatten., Die Studie entsprach der Erklärung von Helsinki (Fassung 1996).
Randomisierung & blending
Die Block Randomisierung, bestehend aus neun Individuen pro Block, wurde im Verhältnis 1:1:1 unter Verwendung von Zufallszahlen ausgeführt, die von einem unabhängigen Statistiker generiert wurden (SPSS-Version 16.0). Die Kenntnis des Randomisierungscodes beschränkte sich auf den Statistiker plus einen QS-Monitor, der nichts mit der Studie zu tun hatte., Jeder Ermittler erhielt undurchsichtige, versiegelte Umschläge mit einzelnen Patientenidentitätsnummern, Randomisierungscodes und Ergänzungsschemata, die im Notfall geöffnet werden sollten. Der Code wurde unterbrochen, nachdem die klinische Datenbank gesperrt wurde.
Dosierungsschema
Die Probanden nahmen morgens zwei blaue Pillen mit Frühstück und zwei weiße Kapseln vor dem Schlafengehen ein. Für die UC-II-Kohorte waren die beiden Morgenkapseln Placebo, während die Abendkapseln jeweils 20 mg UC-II in Höhe von 40 mg enthielten, was mit den zuvor verwendeten klinischen Dosierungen identisch ist . Diese Dosis geliefert 1.,2 mg unverdünntes Kollagen vom Typ II, bestimmt durch ein neu entwickeltes und validiertes Extraktions-ELISA-Protokoll (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). Für die GC-Gruppe lieferten die morgens und abends verabreichten Dosen 750 mg GH plus 600 mg CS jeweils eine tägliche Dosis von 1.500 mg GH plus 1.200 mg CS. Die Placebogruppe nahm eine identische Anzahl von blauen und weißen Kapseln ein, die nur Hilfsstoffe enthielten. Studienflaschen wurden gemäß ICH-GCP und den geltenden lokalen Regulierungsrichtlinien gekennzeichnet.,
Vorherige und begleitende Therapien
Frühere Medikamente wurden beim Screening-Besuch durch den Studienermittler dokumentiert. Bei jedem Besuch überprüfte das Studienpersonal die Tagebücher der Probanden und befragte jeden Teilnehmer zur Verwendung von Begleitmedikamenten, einschließlich der auf der verbotenen Liste aufgeführten. Zu den verbotenen Medikamenten gehörten Ibuprofen, Aspirin, andere NSAIDS oder andere Schmerzmittel (OTC oder verschreibungspflichtig) sowie Nahrungsergänzungsmittel (ohne Vitamine), die die Gesundheit der Gelenke unterstützen könnten., Alle Begleitmedikamente, die während der Studie verwendet wurden, wurden vom Studienermittler in der Krankenakte der Probanden dokumentiert und dann vom Studienpersonal in ihre CRF transkribiert.
Rettungsmedikamente
Paracetamol war in einer Dosis von 500 mg zweimal täglich erlaubt. Die Teilnehmer wurden angewiesen, dieses Medikament nicht innerhalb von 48 h nach einem Bewertungsbesuch einzunehmen. Nutzungsniveaus und Timing wurden bei jedem Besuch in die Krankenakte des Probanden vom Studienermittler eingegeben. Studienpersonal transkribierte diese Informationen in die CRF des Subjekts.,
Compliance und Sicherheit
Die Probanden wurden angewiesen, ihre Flaschen zu jedem Besuch mitzubringen. Die verbleibenden Kapseln wurden gezählt und im CRF-und Accountability-Protokoll des Probanden aufgezeichnet. Als sekundäres Maß für die Einhaltung haben die Probanden ein Tagebuch ausgefüllt, in dem die tägliche Dosierung der Studienprodukte angegeben ist. Die Sicherheitsbewertungen wurden bei allen Besuchen durch den Standortprüfer und das Personal durchgeführt (siehe Tabelle 9).
Studienbewertungen
WOMAC Scores wurden mit dem WOMAC VA3 bestimmt.,1 Fragebogen mit 24 Artikeln in drei Kategorien eingeteilt: Schmerzen, Steifheit und körperliche Funktion (Score Bereich 0-2400). Jeder jeweilige WOMAC Subscale Mean Scores wurde bestimmt, indem der Subscale Score durch die Anzahl der Fragen (5, Schmerz; 2, Steifheit; 17, körperliche Funktion) geteilt wurde. Der mittlere VAS-Score wurde anhand eines VAS-Fragebogens mit 7 schmerzbezogenen Fragen (Score-Bereich 0-700) ermittelt und anschließend durch sieben dividiert., Der LFI-Score wurde anhand eines LFI-Fragebogens ermittelt, der Schmerzen, Gehdistanz und Aktivitäten des täglichen Lebens bewertete (Score-Bereich 0-24). Die Kniebeugung wurde mittels Goniometrie gemessen, wobei das Subjekt in Bauchlage lag und das zu testende Bein entlang der Tischkante positioniert wurde .
Synovialflüssigkeitsbiomarker
Synovialflüssigkeit (~0,5 ml) wurde mit einer Nadel geeigneter Größe (18-24 Gauge, abhängig von der Gelenkgröße) aus dem Kniegelenk abgesaugt. Die geerntete Flüssigkeit wurde gefroren gelagert, bis sie getestet wurde., IL-6-und MMP-3-Werte wurden mit den entsprechenden Duoset-ELISA-Kits bestimmt (R&D Systems, Minneapolis, MN).
Serum-Biomarker
COMP-Spiegel (Quantikin ELISA, R&D-Systeme) wurden in beiden Studienprotokollen bestimmt. CRP-Konzentrationen (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) wurden untersucht im Protokoll 003348. Das Serum wurde gefroren gelagert, bis es analysiert wurde. Interassay und intrassay variationskoeffizienten für COMP und CRP waren <5 %.,
Statistik
Wir haben anhand der 2-Wege-Varianzanalyse (ANOVA) überprüft, dass die Ergebnisse der beiden Protokolle zu einer einzigen Analyse kombiniert werden konnten, indem nachgewiesen wurde, dass es keine Interaktion zwischen Gruppe und Studie gab und dass das Ausmaß der unter den beiden Protokollen beobachteten Wirksamkeit ähnlich war.
Eine modifizierte intent-to-treat (mITT) – Analyse wurde verwendet, um die Beurteilung der Wirksamkeit und Sicherheit der Ergebnisse, wurde a priori. Dies umfasste alle Probanden, die randomisiert, verbraucht Studie Produkt, und hatte mindestens ein vollständiges post-baseline-visite., Eine Analyse der Kovarianz (ANCOVA), die die Supplementierung als festen Faktor und den entsprechenden Basiswert der als Kovariat getesteten Variablen beinhaltete, wurde zur Beurteilung der statistischen Gesamtbedeutung der primären und sekundären Endpunkte verwendet. Nach ANCOVA wurde der Tukey-Kramer Multiple Comparison Test zur Bestimmung der paarweisen statistischen Signifikanz und zur Berechnung von 95% Konfidenzintervallen verwendet. Außerdem wurde eine MMRM-Analyse (Mixed Model Repeated Measures) des primären Endpunkts durchgeführt, um die Mehrfachbewertungen zu berücksichtigen, die während dieser Studie erhalten wurden., Darüber hinaus wurde die Methode der Trapeze verwendet, um die inkrementelle Fläche unter der Kurve (iAUC) für alle Studiengruppen zu berechnen. Für die iAUC-Schätzung wurden fehlende Werte unter Verwendung des Erwartungsmaximierungsalgorithmus in SAS berechnet. Der Medikamentenverbrauch zwischen Gruppen wurde mit logistischer Regression verglichen, gefolgt von paarweisen Vergleichen mit dem Tukey-Kramer-Test. Zusätzlich wurde eine geschichtete Analyse des primären Endpunkts gemäß den Baseline-Serum-COMP-Spiegeln über und unter dem Medianwert für diesen Biomarker durchgeführt., Unterschiede wurden als signifikant angesehen, wenn der resultierende p-Wert ≤0.05. Ein unabhängiger Statistiker führte die Analysen und andere Berechnungen mit SAS Version 9.3 (Cary, NC) durch.