KLINISCHE PHARMAKOLOGIE
Wirkmechanismus
Palivizumab ist ein rekombinanter humanisierter monoklonaler Antikörper mit Anti-RSV-Aktivität .,
Pharmakokinetik
Bei Kindern unter oder gleich 24 Monaten ohne angeborene Herzkrankheit (KHK) betrug die mittlere Halbwertszeit von Palivizumab 20 Tage und monatliche intramuskuläre Dosen von 15 mg pro kg erreichten mittlere ± SD 30tag Trog Serum Arzneimittelkonzentrationen von 37 ± 21 mcg pro ml nach der Erstinjektion, 57 ± 41 mcg pro ml nach der zweiten Injektion, 68 ± 51 mcg pro mlnach der dritten Injektion und 72 ± 50 mcg pro ml nach der vierten Injektion.Die Trogkonzentrationen nach der ersten und vierten Synagis-Dosis waren bei Kindern mit KHK und bei nicht-kardialen Patienten ähnlich., Bei Kindern, denen Synagis für die zweite Saison verabreicht wurde, betrug die mittlere ± SD-Serumkonzentration nach der ersten und der vierten Injektion 61 ± 17 mcg pro ml bzw. 86 ± 31 mcg pro ml.
Bei 139 Kindern unter oder gleich 24 Monaten mit hämodynamisch signifikanter KHK, die Synagis erhielten und sich einem kardiopulmonalen Bypass für eine Operation am offenen Herzen unterziehen mussten, betrug die mittlere ± SD-Serum-Palivizumabkonzentration 98 ± 52 mcg pro ml vor dem Bypass und sank auf 41 ± 33 mcg / ml nach dem Bypass, eine Reduktion von 58% .Die klinische Bedeutung dieser Reduktion ist unbekannt.,
Es wurden keine spezifischen Studien durchgeführt, um die Auswirkungen demografischer Parameter auf die systemische Palivizumab-Exposition zu bewerten. In einer klinischen Studie mit 639 Kindern mit KHK(unter oder gleich 24 Monaten), die fünf monatliche intramuskuläre Injektionen von 15 mg pro kg Synagis erhielten, wurden jedoch keine Auswirkungen von Geschlecht, Alter, Körpergewicht oder Rasse auf Palivizumab-Serumtrogkonzentrationen beobachtet., Die Pharmakokinetik und Sicherheit vonsynagis flüssige Lösung und Synagis lyophilisierte Formulierung verabreicht viaintramuskuläre Injektion bei 15 mg pro kg wurden in einer Cross-over-Studie untersucht153 Säuglinge weniger als oder gleich 6 Monate alt mit einer Vorgeschichte Vonreife. Die Ergebnisse dieser Studie zeigten, dass die Trogserumkonzentrationen von Palivizumab zwischen der flüssigen Lösung und der lyophilisierten Formulierung, die in den klinischen Studien verwendet wurde, vergleichbar waren.,
Eine populationspharmakokinetische Analyse wurde in 22 Studien an 1800 Patienten (1684 pädiatrische und 116 erwachsene Patienten) durchgeführt, um die Pharmakokinetik von Palivizumab und die Variabilität der Inserum-Konzentrationen zwischen Probanden zu charakterisieren. Die Pharmakokinetik von Palivizumab wurde anhand eines linearen Modells mit zwei Kompartimenten mit einer Eliminationshalbwertszeit von 24,5 Tagen bei pädiatrischen Patienten beschrieben. Die Clearance von Palivizumab bei einem typischen pädiatrischen Patienten (Körpergewicht 4,5 kg) unter oder gleich 24 Monaten ohne KHK wurde auf 11 ml pro Tag mit einer Bioverfügbarkeit von 70% nach intramuskulärer Verabreichung geschätzt., Die Interpatientenvariabilität bei der Arzneimittelabgabe betrug 48,7% (55%). Die kovariate Analyse identifizierte keine Faktoren, die die Interpatientenvariabilität berücksichtigen könnten, um Serumkonzentrationen a priori bei einem einzelnen Patienten vorherzusagen.
Mikrobiologie
Wirkmechanismus
Palivizumab, ein rekombinantes humanisiertes monoklonales Antibiotikum, das passive Immunität gegen RSV bietet, bindet das RSV-Hüllprotein (RSV F) an die Oberfläche des Virus und blockiert einen kritischen Schrittin dem Membranfusionsprozess., Palivizumab verhindert auch die Zell-zu-Zell-Fusionvon RSV-infizierten Zellen.
Antivirale Aktivität
Die antivirale Aktivität von Palivizumab wurde im Amicroneutralisationstest untersucht, bei dem vor Zugabe der menschlichen Epithelzellen HEp 2 erhöhte Antikörperkonzentrationen mit RSV inkubiert wurden. Nach der Intubation für 4-5 Tage wurde RSV-Antigen in einem ELISA-Assay gemessen. Theneutralisationstiter (50% effektive Konzentration ) wird als die zur Verringerung des Nachweises von RSV-Antigen erforderliche Antikörperkonzentration im Vergleich zu unbehandelten virusinfizierten Zellen um 50% exprimiert., Palivizumab zeigte mittlere EC50-Werte von 0,65 mcg pro mL (Mittelwert 0,75 ± 0,53 mcg pro mL; n=69, Bereich 0,07-2,89 mcg pro ml) und 0,28 mcg pro ml (Mittelwert 0,35 ± 0,23 mcg pro ml; n=35, Bereich 0,03-0, 88 mcg pro mL) gegen klinische RSV A-bzw.Die Mehrzahl der getesteten klinischen RSV-Isolate (n=96) wurde aus Projekten in den Vereinigten Staaten (CA, CO, CT, IL, MA, NC, NY, PA, RI, TN, TX, VA) gesammelt,der Rest aus Japan (n=1), Australien (n=5) und Israel (n=2). Diese Isolate kodierten die häufigsten RSV – F-Sequenzpolymorphismen, die unterklinischen Isolaten weltweit gefunden wurden., Es wurde gezeigt, dass Palivizumab-Serumkonzentrationen von mehr als oder gleich 40 µg pro ml die pulmonale RSV-Replikationim Baumwollrattenmodell der RSV-Infektion um das 100-fache reduzieren.
Resistenz
Palivizumab bindet eine hochkonservierte Region an die extrazelluläre Domäne des reifen RSV F, die als antigene Stelle II oder siteA bezeichnet wird und Aminosäuren 262 bis 275 umfasst. Es wurde gezeigt, dass alle RSV-Mutanten, die eine Resistenz gegen Palivizumab aufweisen, Aminosäureveränderungen in dieser Region auf dem F-Protein enthalten.,
F Proteinsequenzvariationen innerhalb der antigenen Stelle A: Aminosäuresubstitutionen an der antigenen Stelle A, die entweder in Zellkultur, in Tiermodellen oder in menschlichen Probanden ausgewählt wurden, die zu einer Palivizumab-Resistenz führten, waren N262D, N268I, K272E/M/N/Q/T und S275F/L. RSV-Varianten, die die K272N-Substitution in F-Protein exprimierten, zeigten eine 5164 ± 1731-fache Abnahme der Anfälligkeit (d. H.,, facher Anstieg des EC50-Wertes) im Vergleich zum Wildtyp-RSV, während Varianten, die die Substitutionen N262D, S275F/L oder K272E/M/Q/T enthielten, eine mehr als 25.000-fache Abnahme der Anfälligkeit für Palivizumab zeigten. Die N268I-Substitution verlieh partielle Resistenz gegen Palivizumab; Die Änderungen der Anfälligkeit wurden jedoch für diese Mutante nicht quantifiziert. Studien, die durchgeführt wurden, um den Mechanismus der Virusflucht aus Palivizumab zu untersuchen, zeigten eine Korrelation zwischen Antikörperbindung und Virusneutralisation., RSV mit Substitutionen an der antigenen Stelle A, die gegen die Neutralisation durch Palivizumab resistent waren, banden nicht an Palivizumab.
Mindestens eine der Palivizumab-resistenzassoziierten Substitutionen, N262D,K272E / Q oder S275F / L, wurde in 8 von 126 klinischen RSV (59 RSV A und 67 RSV B) – Isolaten von Patienten mit Immunprophylaxe identifiziert, was zu einer kombinierten resistenzassoziierten Mutationsfrequenz von 6,3% führte., Eine Überprüfung der klinischen Befunde ergab keinen Zusammenhang zwischen Veränderungen der antigenen A-Site-Sequenz und dem Schweregrad der RSV-Erkrankung bei Kindern, die eine Palivizumab-Immunprophylaxe erhalten und eine RSV-Erkrankung der unteren Atemwege entwickeln.
Die Analyse von 254 klinischen RSV-Isolaten (145 RSV A und 109RSV B), die von Immunprophylaxe-naÃve-Probanden gesammelt wurden, ergab palivizumabresistenzassoziierte Substitutionen in 2 (1 mit N262D und 1 mit S275F),was zu einer resistenzassoziierten Mutationsfrequenz von 0,79% führte.,
F protein-Sequenz-Variationen außerhalb Antigen-Website Ein:neben der sequenzvariationen in Antigen-Website bekannt zu conferpalivizumab Widerstand, F protein Substitutionen T100A, G139S, N165D/V406I;T326A, V450A in RSV-A und T74I, A147V, I206L, S285G, V450I, T455I in RSV Bwere identifiziert Viren isoliert, die aus Fehlern der immunprophylaxe. Thesesubstitutions wurden nicht identifiziert RSV-F-Sequenzen abgeleitet von 254 clinicalisolates von immunprophylaxe – naÃve Themen und sind somit consideredtreatment-assoziierten und nicht-polymorphen., Rekombinante RSV B-Kodierung Die S285Gsubstitution zeigte eine Palivizumab-Empfindlichkeit (EC50-Wert = 0,39 ± 0,02 mcgper mL) ähnlich der rekombinanten Wildtyp-RSV B (EC50-Wert = 0,17 ± 0,02 mcgper mL).
Die Palivizumab-Anfälligkeit für RSV-codierende gemeinsame Fproteinsequenzpolymorphismen, die proximal zur antigenen Stelle A lokalisiert sind, wurde neu bewertet. Rekombinante RSV A-Codierung N276S (EC50-Wert = 0,72 ± 0,07 mcg pro mL) und rekombinante RSV B mit S276N (EC50-Wert = 0,42 ± 0,04 mcg pro mL) zeigten Empfindlichkeiten,die mit den entsprechenden rekombinanten Wild-typeRSV A vergleichbar waren (EC50-Wert = 0,63 ± 0.,22 mcg pro ml) und RSV B (EC50-Wert = 0,23 ± 0,07 mcg pro mL). Ebenso RSV B klinische Isolate, die die Polymorphvariation V278A enthielten, waren mindestens so empfindlich gegenüber der Neutralisation durch Palivizumab (EC50= 0,08-0,45 mcg pro ml) wie Laborstämme von Wildtyp RSV B (EC50-Wert = 0,54 ± 0,08 mcg pro ml). Es wurde keine bekannte polymorphe oder nichtpolymorphe Sequenzvariationen außerhalb der antigenen Stelle A auf RSV F nachgewiesen torender RSV resistent gegen Neutralisation durch Palivizumab.,
Interferenz von RSV-diagnostischen Assays durch Palivizumab
Interferenz mit immunologisch basierten RSV-diagnostischen Assays durch Palivizumab wurde in Laborstudien beobachtet. Rapidchromatographic/Enzym-Immunoassay (CIA/EIA), immunfluoreszenz-assays (IFA),und direkte immunfluoreszenz-assays (DFA) mittels monoklonaler antibodiestargeting RSV-F-protein gehemmt werden kann. Daher ist bei der Interpretation negativer immunologischer Testergebnisse Vorsicht geboten, wenn klinische Beobachtungenmit einer RSV-Infektion vereinbar sind., Ein RT-PCR-Assay (Reverse Transkriptase-Polymerase Chainreaction), der nicht durch Palivizumab gehemmt wird, kann sich als nützlich für die Laborbestätigung einer RSV-Infektion erweisen .
Klinische Studien
Die Sicherheit und Wirksamkeit von Synagis wurde in zwei randomisierten, doppelblinden, placebokontrollierten Studien zur Prophylaxe gegen RSV-Infektionen bei Kindern mit hohem Risiko für einen RSV-bedingten Krankenhausaufenthalt untersucht., Studie 1wurde während einer einzigen RSV-Saison durchgeführt und untersuchte insgesamt 1502 Kinder, die weniger als oder gleich 24 Monate alt waren mit BPD oder Säuglinge mit Frühgeburt(weniger als oder gleich 35 Wochen Schwangerschaft), die weniger als oder gleich 6 Monate alt waren beim Studieneintritt. Studie 2 wurde über vier aufeinanderfolgende Meere bei insgesamt 1287 Kindern durchgeführt, die jünger oder gleich 24 Monate alt waren mit hämodynamisch signifikanter angeborener Herzkrankheit., In beiden Studienteilnehmer erhielten 15 mg pro kg Synagis oder ein äquivalentes Volumen Placebo oder intramuskuläre Injektion monatlich für fünf Injektionen und wurden für150 Tage nach der Randomisierung verfolgt. In Studie 1, 99% der alle Fächer abgeschlossen thestudy und 93% abgeschlossen fünf Injektionen. In Versuch 2, 96% aller Subjekteabgeschlossen die Studie und 92% abgeschlossen alle fünf Injektionen. Die Inzidenz von RSVhospitalization ist in Tabelle 1 gezeigt. Die Ergebnisse wurden gezeigt, um statisticallysignificant mit Fisher ‚ s exact test.,
Tabelle 1: Inzidenz von RSV-Krankenhausaufenthalten nach Behandlungsgruppe
Die klinischen Studien belegen nicht, dass die RSV-Infektion bei Kindern, die mit RSV-Infektion ins Krankenhaus eingeliefert wurden, die Synagis zur RSV-Prophylaxe erhielten, im Vergleich zu denen, die ein Placebo erhielten, weniger schwerwiegend war.