Vita blodkroppar-typer, observationer, antal och urinanalys

leukocyter

refererade också till som leukocyter, vita blodkroppargöra upp 1% av den totala blodvolymen och spela en viktig roll avsvarar kroppen mot smittämnen (virus, bakterier, etc), utländskainvadare och infekterade eller cancerceller.,

vita blodkroppar är indelade itvå huvudgrupper som inkluderar granulocyter (neutrofiler, eosinofiler, basofileroch mastceller) och mononukleära leukocyter (lymfocyter, monocyter, makrofageroch dendritiska celler). De olika typerna är specialiseradeatt svara på smittämnen eller främmande inkräktare på specifika sätt somförhindrar ytterligare spridning och infektion.,

mikroskopi

med tanke på att alla vita blodceller är över 5 mikrometer i diameter, är de tillräckligt stora för att seanvända ett typiskt optiskt mikroskop (sammansatt mikroskop).

färgning med Leishmans fläck gör det möjligt att intebara enkelt identifiera olika typer av leukocyter, men också räkna dem. Dettagör det en av de mest idealiska fläckarna för ett differentiellt antal vita blodceller.,

* Leishmans fläck är en Romanovsky-fläck sombestår av Eosin och metylenblått upplöst i metanol.,lide usingbuffered destillerat vatten för att späda ut fläcken och låt stå i ca 10minuter

Tvätta bilden usingdistilled vatten eller kranvatten för ca 1 minut (tills utstryket visar rosa)

Placera objektglaset i anupright position på en torr rack och låt det torka (använd mjukpapper för att cleanoff ryggen och sidorna av bilden)

Visa bild under themicroscope till att börja med låg effekt

* Använd olja nedsänkning för hög förstoring.,

granulocyter

Närgranskas under mikroskopet kommer smeten att visa olika typer av leukocytesas såväl som röda celler. Eleverna kommer att kunna skilja vita blodkropparbaserat på deras form och kärna.

neutrofiler – när de ses under mikroskop, neutrofilerkommer att visas sfärisk form med en mörk färgad kärna som är segmenterad (2 till 5 lober)., En närmare titt kommer också att avslöja fina granuler (neutrofilagranuler) och tunna trådar som förbinder nucleus lobes (kromatingängor)

* neutrofiler svarar ofta först underinfektion. Död av många neutrofiler bildar pus.

eosinofiler – jämfört med neutrofiler som kan ha 2 till 5lobed kärna, eosinofiler har bara en bi-lobed (två lobes) kärna som ärformad som en hästsko. De kommer också att visas sfärisk i form med finegranuler refered till som acidofila brytningsgranuler.,

basofiler – jämfört med de andra granulocyterna har basofiler en stor andirregulär kärna som finns inuti den sfäriska formade cellen. Medan kärnorna i de andra granulocyterna är väldefinierade och kan klartbeskrivas, är kärnan i en basofil (blåaktig under mikroskopet) stor ochirregulär inuti cellen och kan visa sig vara svår för eleverna att beskriva.

* basofiler är ansvariga för vasodilationunder inflammation.,

mastceller – om det finns mastceller är sfäriska med enstor central kärna och fler granuler jämfört med basofiler.

neutrofiler, eosinofiler,basofiler och mastceller är granulocyter. Närvaron av granuler i dessasceller skiljer dem från agranulocyter som saknar granuler.,

agranulocyter

lymfocyter – medan de är mindre jämfört med andraleukocyter har lymfocyter en stor rund kärna som tar upp mycket avcellvolymen. Som ett resultat har lymfocyter väldigt lite eller ingen cytoplasma.,

* det finns två typer av lymfocyter: B-celler(celler som producerar antikroppar för att förstöra främmande inkräktare) och T-celler(ansvarig för att förstöra infekterade och cancerceller)

monocyter – jämfört med lymfocyter (agranulära leukocyter) monocyter ärstörre i storlek med en Nucleus som är böna eller njure formad. Dessa celler har ocksåmer cytoplasma jämfört med lymfocyter.,

antal vita blodkroppar

att räkna vita blodkroppar är av stor klinisk betydelse eftersom det bidrar till diagnosen av olika sjukdomar. Detta kan antingen uppnås manuellt eller automatiskt.

manuellt antal vita blodkroppar

manuellt antal vita blodkroppar har visats ha flera nackdelar som inkluderar att vara benägna att fel och vara tidsangivelse.,

för denna metod kan eleverna räkna cellerna på ett blodutstryk (bild) eller genom att använda en hemocytometer monterad på ett sammansatt mikroskop. För smutsarna räknas whitecells helt enkelt genom att skanna flera delar av smeten. Här kan eleverna räkna antalet olika typer av vita blodkroppar påolika regioner och beräkna de totala procentsatserna för varje typ avleukocyt.,

exempel:

om en student räknar totalt 4 monocyter från två regioner och totalt 8 vita blodkroppar (alla vita blodkroppar räknas) blir detmöjligt att få en procentandel av monocyter tillgängliga; (4/8)*100 = 50 procent

förutom att använda ett blodutstryk, kan en hemocytometerkan också användas. En hemocytometer är en speciell räkningskammare med kvadratulerade områden som gör det lättare att räkna celler.,

medan kammaren är uppdelad i 9 kvadratiska områden används endast 4 (vid kammarens fyra hörn) av dessa för att räkna vita blodkroppar. För denna metod är rutnätetkonserveras för vita blodkroppar som identifieras och räknas för att beräkna derasrespektiva procentsatser.

* även om det är möjligt att räkna vita cellerunder mikroskopet direkt kan eleverna också fånga bilderna med hjälp av adigital kamera och skanna igenom bilderna för att räkna antalet vita celler.,

Automatisk räkning

med manuell räkning uppstår felaktigheter på grund avräkningsfel (mänskligt fel) och på grund av det faktum att vita celler kanske inte är enhetligt fördelade över smeten. Dessa frågor behandlas genom att använda flowcytometry.

för denna teknik måste röda blodkroppar avlägsnas från blod eftersom de är föroreningar. Detta uppnås med hjälp avammoniumkloridlösningar för Lysering av röda celler., Att rena agranulocytesendast (perifer blod mononukleära celler – PBMC) studenter kan använda densitetgradient förfarande, vilket kan innebära att använda Ficoll-PAQUE PLUS orHistopaque-1077. Detta är dock inte obligatoriskt.

* isolering och rening av PBMC involverar antingen lösning med blodprovet, separation av cellerna med hjälp av acentrifug och tvättning av cellerna med hjälp av PBS.,

för att räkna antalet vita blodkroppar strömmar en cellsuspension genom elektroniska detektorer för att kvantifiera olika egenskaperupptäckt så att olika typer av vita blodkroppar kan räknas.

här är suspensionen gjord för att skapa ett laminärt flöde som gör det möjligtför enskilda celler att passera genom en förhörspunkt.

cellerna ärintersekterade av en stråle av monokromatiskt ljus vid förhörspunkten som gör att ljus kan avges i olika riktningar., Ljuset emitterar dåsignaler som samlas in och analyseras för att ge avläsningarna.

* även om detta är en mer tillförlitlig teknik förmontering av vita celler, har den en nackdel genom att man inte kan bestämma cellernas form eller morfologi. Av denna anledning är det omöjligt att avgöra om cellerna är skadade eller inte.,

onormalt höga eller låga räkningar (WBC)

hos en frisk mänsklig vuxen varierar det normala antalet/antalet vita blodkroppar från cirka 4500 till 11 000 celler per mikro liter blod. Antalet olika typer av vita blodkroppar varierar emellertid., mikro liter blod

basofiler – utgör mindre än 3 procent av de totala leukocyterna och kan variera till cirka 300 celler per mikro liter blod

monocyter – utgör mindre än 10 procent av de totala leukocyterna och intervallet mellan 200 och 600 celler per mikro liter blod

höga/låga leukocyter

siffrorna/räkningen av dessa leukocyter kan ändraatt alltmer (onormalt) höga eller låga tal., I en klinisk miljö, dettaär vägledande att något är fel och kan hjälpa till med diagnos.

neutrofiler – höga nivåer av neutrofiler (neutrofilaleukocytos) indikerar att det finns en infektion, inflammation eller en giventyp av leukemi. Onormalt lågt antal neutrofiler (neutropeni) å andra sidan är förknippad med störningar i benmärgen, cancerbehandling samt autoimmuna störningar.,

monocyter – onormalt höga numrerav monocyter (monocytos) är associerad med vissa cancerformer, autoimmunastörningar samt kroniska infektioner bland andra. Onormalt låga (monocytopeni) räknas å andra sidan är associerade med virusinfektioner,vissa medfödda sjukdomar och autoimmuna sjukdomar samt someantibiotika.,

lymfocyter – onormalt höga nivåer av lymfocyter kallas lymfocytisk leukocytos och är associerad medgiven virus-och bakterieinfektioner samt givna lymfom och cancerformer. Onormalt antal eller lymfocytopeni är kopplat till sådana virusinfektionersom HIV, dålig näring samt autoimmuna sjukdomar bland annat.,

Basofiler – Mycket höga nivåer ofbasophils i blodet har identifierats bland dem med sådana villkor som hypotyreos hos andra infectionsand cancer samtidigt som mycket lågt antal har förknippats med fall av leukemi, infektioner, thyrotoxicosisand andra överkänsliga reaktioner i kroppen.,

eosinofiler – onormalt höga eosinofiler (hypereosinophila) har kopplats till ett antal reaktionersom parasitiska, allergen-och astmareaktioner. Med tanke på att antalet eosinofiler normalt kan vara mycket lågt (så lågt som noll) anses detta inte vara ett problem.,

mikroskopisk urinanalys (leukocyter)

analys av urin med ett mikroskop kan användasför att bestämma närvaron av vita blodkroppar, vilket hjälper till vid diagnos avolika sjukdomar.,

Requirements

Urine sample
A centrifuge
Glass slide

Procedure

Shake a test-tubecontaining urine and centrifuge at low speeds (2-3,000 rpm) for about 5 minutes
Decant the supernatant, butretain a small amount in the test-tube (0.,F1dff”>skaka provröret för attsuspendera sedimentet i den återstående supernatanten
placera en droppe avsuspensionen på en glasskiva och täck med en täckglidning

Undersök bilden under themicroscope som börjar med låg effekt slutligen med hög effekt

se mer om urinanalys här

observation

vid lägre förstoring kan eleverna kanske se ett antal objekt, inklusive kristaller och gjutningar., Men vid hög effekt kan eleverna se ett antal leukocyter.

i urinen refereras närvaron av höga nummerav leukocyter till som pyuri, vilket indikerar en infektion iurinvägarna eller njurarna. I de flesta fall är leukocyter närvarande i uringranulocyter som kan identifieras på grund av deras lobed kärna ochgranuler.

* på grund av brist på färgning, leukocyter i urinkan visas genomskinlig vilket gör det svårt för vissa studenter att identifiera dem.,

rörelse och funktion

neutrofiler – neutrofiler är inte bara den första försvarslinjen, men är också de mest rikliga leukocyterna. När de släppts cirkulerar de förca 10 timmar i blod och kan förbli aktiva i upp till 6 dagar.

De canidentify invaderande organismer som bakterier genom kemotaxi och moverelatively snabbt mot dem med hjälp av en typ av rörelse som avses som amoeboidmotion., Under ett elektronmikroskop ser neutrofiler ut som de chasingden invaderande organismen som de kryper bland röda blodkroppar. När de kommer tillinvigerande organism, de uppsluka och förstöra den främmande organismen (bakterier)genom en process som refereras till som fagocytos.

* neutrofiler har också visat sig inkorporera reaktinprotrustioner och integrin länka vidhäftning i deras rörelse.

Eosinofiler – I vävnaden, migration av eosinofiler iscontrolled av eotaxin-1 (ett protein chemoattractant)., Här innefattar dess migration sådana aktiviteter som rullande, vidhäftande ochtransmigration genom endotelet. Dessa processer gör det möjligt förcellerna att migrera till specifika platser där de är involverade i allergiskreaktioner.

basofiler – basofiler migrerar till barriärvävnader där de släpper utinflammatoriska kemikalier (histamin etc) som i sin tur har sådana effekter somdilation av blodkärl och förträngning av glatta muskler.Dessa effekterresultat i sådana utfall som minskat blodtryck.,

basofiler spelar också en viktig roll i allergisk inflammation genom att frigöra proinflammatoriskkemikalier som cysteinylleukotriener.

för att nå inflammerad vävnad, basophilsuse tre stora processer som involverar vidhäftning till vaskulär endotel,transendotelial migration samt förflyttning genom extra vaskulärvävnader. Aktivatorcytokiner spelar ocksåen viktig roll i den slumpmässiga rörelsen av cellerna där de flyttar till thesite genom chemokinesis.,

monocyter – under normala förhållanden använder monocyter vidhäftning för att flytta.Monocyter använder sig av sådana adhesionsmolekyler som α4β1 integrin (VLA-4) och ß2integriner för att hålla sig till vaskulär endotel och nå målställen.

vid endoteliala korsningar klämmer monocyter mellan adjungerade celler genomdiapedes för att passera trots sin stora storlek jämfört med andra leukocyter.Monocyter förstör invaderande organismer som bakterier och andra bakterier genom att bestraffa dem som makrofager.,

och så kan de omvandla till dendritiska celler där de bearbetar antigenmaterial. Detta gör det möjligt för antikroppar att identifiera skadegörare som förstör dem.

lymfocyter – det finns två typer av lymfocyter; Tlymfocyter och B-lymfocyter. T-lymfocyter (T-celler) utgör majoriteten avlymfocyter (80 procent) och produceras i tymus. Deras huvudsakliga rollinnebär att förstöra skadade eller infekterade celler. B-celler spelar också en viktig roll för att produceraantikroppar som riktar sig mot och förstör specifikt antigen.,

medan mekanismen är yetto förstås fullt ut, har studier visat att kemokiner spelar en viktigroll för vidhäftning och transendotelial migration av vissa lymfocyter.

av intresse:Vad är virus?,