niom mikrobiologiska laboratoriet är godkänt som en klass 2 laboratorium från norska hälsoministeriet och är godkänt för arbete med innesluten GMM (genetiskt modifierade mikroorganismer). Laboratoriet är utrustat med anläggningar för antibakteriell testning och tillväxt av biofilm på materialytor.
Biofilm
Biofilm odlas på biomaterial i mikrotiterbrunnar eller i en biofilmreaktor. Antibakteriella föreningar kan införlivas i eller beläggas på ytan av biomaterialet., Olika tekniker används för att studera deras effekt på bildandet och tillväxten av biofilm. Mängden biofilm kan kvantifieras efter safraninfärgning och visualiseras också genom elektronmikroskopi. Biofilmens livskraft kan bestämmas genom levande / död färgning och fluorescens/konfokalmikroskopi, resazurin-analys, XTT-analys eller genom viabilitetsräkning efter att ha lossat biofilmen följt av plätering på näringsagarplattor.
Colony Forming Unit (CFU) – metoden kan användas för identifiering av mikroorganismer och för testning av effekten av antimikrobiella ämnen och tekniker., Det är en känslig och allmänt accepterad metod inom mikrobiologi. I denna metod räknas antalet levande celler (celler som kan reproducera) närvarande i en suspension på en näringsagaryta.
bakterieceller samlas in och sprids i en icke-toxisk lösning såsom fosfatbuffrad saltlösning eller fysiologiskt vatten. Cellsuspensionen späds sedan, normalt i en serie med en 10-faldig utspädning, för att erhålla plattor med ett mottaget antal bakterier., En viss mängd från varje utspädning är pläterad, i replikat av 3 eller 4, på petriskålar med näringsagar avsedd för bakterierna i fråga. Petriskålarna inkuberas i lämpliga miljöer och under en lämplig tid innan kolonierna räknas. Varje koloni som kan räknas kallas en kolonibildande enhet (CFU), och antalet CFU är relaterat till det viabla antalet bakterier i provet. Antalet bakterier i det ursprungliga provet beräknas matematiskt, factoring i mängden pläterad och dess utspädningsfaktor., Resultaten presenteras ofta som cfu/ml (kolonibildande enheter per milliliter) för vätskor och cfu / g (kolonibildande enheter per gram) för fasta ämnen.
Spiral pläteringsteknik
den traditionella metoden med utspädning och plätering är tidskrävande, och därför kan antalet variabler i ett test begränsas. Niom mikrobiologi laboratorium använder därför en spiral plätering teknik där ett instrument, WASP spiral plater (Figur 1), deponerar en given volym prov på en roterande agarplatta.,
volymen av det prov som deponeras per plattans areal minskar över spiralen vilket resulterar i en utspädningseffekt och möjliggör räkning av isolerade kolonier (Figur 2) inom respektive sektorer med känd deponeringsvolym.
för räkning av bakterier använder NIOM en automatiserad koloniräknare, aCOLyte och resultaten överförs direkt till Excel för vidare analys.