Undersökningsprodukter
studieprodukten UC-II® (Lot 1204004) härleddes från kycklingben., Den tillverkades under nuvarande good manufacturing practice (cGMP) förhållanden med hjälp av en patenterad process som bevarade sin ursprungliga struktur (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Både glukosaminhydroklorid (GH) och kondroitinsulfat (CS) köptes via Wilke Resources (Lenexa, KS). Den välbärgade gruppen (Shishi City, Fujian) tillverkade GH under cGMP och enligt United States Pharmacopeia 26 SPECIFIKATIONER. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) som tillverkas av nötkreatur som härrör CS under cGMP., UC-II och GC var inkapslade i ogenomskinliga, storlek ”00” kapslar med tillräckliga mängder Hjälpämnen (Mikrokristallin cellulosa och kiseldioxid) så att de var sensoriska identiska med placebo. Interhealth Nutraceuticals gav alla studiematerial. All American Pharmaceutical (Billings, MT) verifierade mängden aktiva ingredienser i studiekapslarna. Studiematerial hölls i ett säkert skåp med tillgång begränsad till webbplatsens koordinator, apotekare och huvudutredaren.,
studiedesign
syftet med denna randomiserade, dubbelblinda, placebokontrollerade kliniska studie var att utvärdera förmågan hos UC-II att förbättra knäsymtom hos OA-patienter, mätt som total WOMAC-poäng, jämfört med placebo och GC. Rättegången genomfördes vid 13 centra i södra Indien. På grund av en begränsning i synovialvätskeprovtagningsförfaranden vid flera kliniska platser genomfördes studien under två separata studieprotokoll., Studieprotokoll godkändes av varje centrums institutionella etikkommitté (IEC) och listades på Indiens kliniska prövningsregister som studieprotokoll 003663 och 003348. Inskrivning, randomisering och uppföljningsbesök var identiska för båda protokollen och utfördes vid Dag 1 (baslinje), 7, 30, 60, 90, 120, 150 och 180 (Tabell 1). Alla utredare deltog i samma prövarmöten, använde identiska intags-och datarapporteringsformulär och utbildades och övervakades av samma grupp av kliniska forskare.,
Effektmätningar utvärderades vid alla besök och inkluderade WOMAC, VAS och LFI index. Knäböjningsområdet för rörelse (ROM) testet utfördes vid varje besök. Ämnesdiaries och studieprodukt tillhandahölls vid alla besök, utom dag 180 och samlades in vid alla uppföljningsbesök., Ämnen instruerades att dagligen registrera konsumtionen av studieprodukt, användning av räddningsmedicin, samt samtidiga mediciner i ämnet mejeri under hela studiens varaktighet. Blod och urin samlades vid screening och dag 180. Graviditetstest gjordes vid screening och uppföljningsbesök. Biverkningar (AEs) registrerades med hjälp av varje ämnes dagboksinsatser plus platsbesök frågeformulär som administrerades av intagspersonal vid alla studiebesök.,
kliniska endpoints
den primära endpointen definierades som förändringen i Total WOMAC-poäng från baseline till dag 180 för UC-II-gruppen jämfört med placebo och GC. Sekundära kliniska endpoints för båda protokollen var likartade och inkluderade förändringen från baslinjen till dag 180 jämfört med placebo och GC för alla endpoints inklusive följande poäng: (1) medelvärde för VAS; (2) medelvärde för WOMAC-subscales; (3) LFI; och (4) knäböjning. En annan endpoint inkluderade förändringen från baseline till dag 180 för serumbiomarkörbrosk oligomeriskt matrisprotein (COMP)., I protokoll 003348 inkluderade ytterligare sekundära endpoints förändringen i serumbiomarkör, C-reaktivt protein (CRP) plus synovialvätska biomarkörer interleukin (IL)-6 och matrismetalloproteinas (MMP)-3 från baseline till dag 180.
försökspersoner
totalt 234 försökspersoner visades och 191 randomiserade (Fig. 1). Studieinklusionskriterier var 40-75 år gamla manliga och kvinnliga försökspersoner, ett body-mass index (BMI) på 18-30 kg/m2, måttlig till svår OA genom fysisk undersökning (crepitus, benförstoringar, ledsvullnad etc.,) i ett eller båda knäna, knäsmärta i minst 3 månader före studiens början, en LFI-poäng mellan 6 och 10 och en VAS-poäng på 40-70 mm 7 dagar efter att ha återkallats från uteslutna mediciner, plus en knäradiograf som graderades som Kellgren och Lawrence (K-L) radiograph score på antingen 2 eller 3 . Alla oa-diagnoser bekräftades av varje studieplatsutredare och noterades i ämnets fallrapporteringsformulär (CRF). Vid bilateralt knä engagemang var det index knä som användes för studien den som presenterade de mest allvarliga oa-symptomen vid baslinjen., Detaljerade kriterier för inkludering–uteslutning sammanfattas i Tabell 2.
inskrivning och randomisering flödesschema
etik, samtycke och behörigheter
försökspersoner rekryterades efter att de granskat, förstått studieuppgifterna och undertecknade sedan den IEC-godkända samtyckesformuläret., Studien överensstämde med Helsingforsdeklarationen (version 1996).
randomisering& bländande
Block randomisering, bestående av nio individer per block, utfördes i ett förhållande 1:1:1 med hjälp av slumptal som genereras av en oberoende statistiker (SPSS version 16.0). Kunskap om randomiseringskoden var begränsad till statistiker plus en QA-bildskärm som inte var relaterad till studien., Varje undersökare fick ogenomskinliga, förseglade kuvert som betecknar enstaka patientsidentitetsnummer, randomiseringskoder och tilläggsregim som ska öppnas vid en nödsituation. Koden bröts efter att den kliniska databasen var låst.
doseringsregim
patienter intas två blå piller på morgonen med frukost och två vita kapslar före sänggåendet. För UC-II-kohorten var de två morgonkapslarna placebo, medan kvällskapslarna innehöll 20 mg vardera av UC-II totalt 40 mg, vilket är identiskt med tidigare använda kliniska dosnivåer . Denna dos levererade 1.,2 mg odenaturerad typ II kollagen som bestäms av en nyligen utvecklade och validerade utvinning-ELISA-protokoll (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). För GC-gruppen levererade morgon-och kvällsdoserna 750 mg GH plus 600 mg CS vardera med en daglig dos på 1,500 mg GH plus 1,200 mg CS. Placebogruppen intog identiska antal blå och vita kapslar innehållande endast hjälpämnen. Studieflaskor märktes enligt ICH-GCP och tillämpliga lokala riktlinjer.,
tidigare och samtidiga behandlingar
tidigare läkemedel dokumenterades vid screeningbesöket av studieutredaren. Vid varje besök granskade studiepersonalen ämnesdagböcker och ifrågasatte varje deltagare om användningen av eventuella samtidiga läkemedel, inklusive de som finns på den förbjudna listan. Förbjudna läkemedel inkluderade ibuprofen, aspirin, andra NSAID eller andra smärtstillande medel (OTC eller recept), plus eventuella kosttillskott (exklusive vitaminer) som kan stödja gemensam hälsa., Alla samtidiga läkemedel som användes under studien dokumenterades i ämnets medicinska register av studieutredaren och transkriberades sedan till deras CRF av studiepersonal.
räddningsmedicin
acetaminofen var tillåtet i en dos av 500 mg två gånger dagligen. Deltagarna instruerades att inte ta denna medicin inom 48 h efter ett utvärderingsbesök. Användningsnivåer och timing infördes vid varje besök i ämnets medicinska rekord av studieutredaren. Studiepersonalen transkriberade denna information till ämnets CRF.,
överensstämmelse och säkerhet
försökspersoner instruerades att ta sina flaskor till varje besök. Återstående kapslar räknades och registrerades i ämnets CRF och accountability log. Som en sekundär åtgärd av överensstämmelse slutförde försökspersonerna en dagbok som indikerar daglig dosering av studieprodukterna. Säkerhetsbedömningar utfördes vid alla besök av platsutredaren och personalen (se Tabell 9).
Studieutvärderingar
WOMAC-poäng bestämdes med WOMAC VA3.,1 frågeformulär som innehåller 24 artiklar grupperade i tre kategorier: smärta, styvhet och fysisk funktion (poängområde 0-2400). Varje respektive WOMAC subscale Medelpoäng bestämdes genom att dividera subscale-poängen med antalet frågor (5, smärta; 2, styvhet; 17, fysisk funktion) den innehöll. Den genomsnittliga VAS-poängen bestämdes med hjälp av ett VAS-frågeformulär som innehåller 7 smärtrelaterade frågor (poängintervall 0-700) och sedan dividera den totala poängen med sju., LFI-poäng bestämdes med hjälp av ett LFI-frågeformulär som bedömde smärta, gångavstånd och aktiviteter i det dagliga livet (score range 0-24). Knäböjning mättes med goniometri med motivet liggande i liggande läge och benet som ska testas placerad längs kanten av bordet .
synovialvätska biomarkörer
synovialvätska (~0, 5 mL) aspirerades från knäleden med en lämplig storlek nål (18-24 gauge, beroende på ledstorlek). Skördad vätska förvarades fryst tills det testades., IL-6 och MMP-3 nivåer bestämdes med motsvarande Duoset ELISA kit (R&D-Systems, Minneapolis, MN).
Serumbiomarkörer
COMP-nivåer (Quantikine ELISA, R&d-system) bestämdes i båda studieprotokollen. CRP-nivåer (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH i Mannheim) utvärderades i protokollet 003348. Serum lagrades fryst tills det analyserades. Inom analys och intrassay variationskoefficienter för COMP och CRP var <5 %.,
statistik
vi verifierade, med hjälp av 2-vägsanalys av varians (ANOVA), att resultaten av de två protokollen kunde kombineras till en enda analys genom att visa att det inte fanns någon grupp genom studieinteraktion och att storleken på den effekt som observerades under de två protokollen var likartad.
en modifierad intent-to-treat (mITT) analys användes för att bedöma effekt och säkerhetsresultat som definierades a priori. Detta inkluderade alla försökspersoner som randomiserades, konsumerade studieprodukten och hade minst ett slutfört Besök efter baslinjen., En analys av covariance (ANCOVA), som inkluderade tillskott som en fast faktor och motsvarande baslinjevärde för variabeln som testas som kovariat, användes för att bedöma den övergripande statistiska betydelsen av de primära och sekundära endpoints. Efter ANCOVA användes Tukey-Kramer multiple comparison test för att bestämma parvis statistisk signifikans och beräkna 95% konfidensintervall. Dessutom utfördes en blandad modell upprepad mätning (MMRM) analys av primär endpoint för att ta hänsyn till de flera bedömningar som erhållits under denna studie., Dessutom användes metoden för trapezoider för att beräkna inkrementell yta under kurvan (iAUC) för alla studiegrupper. För iauc-uppskattning beräknades saknade värden med hjälp av förväntan-maximiseringsalgoritmen i SAS. Användning av räddningsmedicin mellan grupper jämfördes med logistisk regression följt av parvisa jämförelser med Tukey-Kramer-testet. Dessutom utfördes en stratifierad analys av primär endpoint enligt serum COMP-nivåerna vid baslinjen över och under medianvärdet för denna biomarkör., Skillnader ansågs signifikanta om det resulterande p-värdet var ≤0, 05. En oberoende statistiker utförde analyserna och andra beräkningar med hjälp av SAS version 9.3 (Cary, NC).