Abstract
există Puține informații despre asociația anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 cu lupus erytematosus (LES) caracteristici. În această lucrare am analizat asocierea reactivităților anti-Ro cu manifestări clinice și imunologice la 141 pacienți cu LES. Fotosensibilitatea și xeroftalmia / xerostomia s-au dovedit a fi asociate pozitiv atât cu anti-SSA/Ro60 ( și , resp.) și anti-Ro52 / TRIM21 ( și, resp.)., În contrast, o asociere negativă a fost detectat cu privire la anti-fosfolipide anticorpi anti-SSA/Ro60 având un efect mai puternic () decât anti-Ro52/TRIM21. Anti-SSA/Ro60 arătat o anumită asociere pozitivă cu hypocomplementemia (), în principal cu low C4 niveluri (a), întrucât anti-Ro52/TRIM21 a fost dovedit a fi pozitiv asociat cu fenomenul Raynaud () și citopenie () și negativ asociat cu anti-adndc (). Limfocitele sunt implicate în relația dintre anti-Ro52/TRIM21 și citopenie, deoarece pacienții pozitivi au prezentat niveluri celulare mai scăzute decât pacienții negativi ()., În concluzie, anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21-a arătat atât de comune și asociații specifice în LES. Aceste date cresc astfel dovezile diferitelor asociații ale celor două specificități anti-Ro chiar și într-o anumită boală.
1. Introducere
Anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 sunt printre cele mai frecvent detectat autoanticorpi în screening-ul de rutină pentru sistemice, boli autoimune., Deși ambele reactivități de anticorpi au fost considerate a face parte din sistemul anti-Ro pentru o lungă perioadă de timp, acum se stabilește clar că antigenele lor sunt diferite, nu fac parte dintr-un complex macromolecular stabil și sunt localizate în diferite compartimente celulare (revizuite în ). Mai mult, anticorpii anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 au fost, de asemenea, asociați cu un model diferit de manifestări clinice., Astfel, prezența anti-SSA/Ro60 este legat de procesele autoimune, în special lupus eritematos sistemic (LES) și sindromul Sjögren (SS), în timp ce anti-Ro52/TRIM21 prezinta un spectru mai larg de boli asociații . Principalele entități autoimune clinice asociate cu anti-Ro52 / TRIM21 sunt SS, scleroza sistemică (SSc), bolile autoimune hepatice și, în special, miozita unde a fost considerată ca un marker independent . De asemenea, anti-Ro52/TRIM21 a fost detectat în condiții neautoimune, cum ar fi infecțiile și bolile neoplazice ., În plus, diferite asocieri cu manifestări clinice specifice au fost, de asemenea, raportate în special pentru anti-Ro52/TRIM21. Într-adevăr, această reactivitate anti-Ro este puternic asociată cu blocul cardiac congenital în lupusul neonatal și cu boala pulmonară interstițială . Anti-Ro52 / TRIM21 a fost, de asemenea, legat de o boală mai severă în SS, miozită, ciroză biliară primară și hepatită autoimună .printre bolile autoimune sistemice, les prezintă un model specific de anticorpi anti-Ro., Astfel, deși reactivitatea simultană este modelul de anticorpi mai frecvent, această boală prezintă cea mai mare prevalență a anti-ssa/Ro60 izolate . În Les, anticorpii împotriva sistemului Ro au fost asociați istoric cu fotosensibilitatea, dar există puține informații despre asocierea ambelor reactivități Anti-Ro cu alte manifestări clinice ., Prin urmare, cu acest fundal în minte, scopul acestei lucrări a fost de a analiza dacă anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 anticorpi sunt diferențiat asociate cu cele clinice, criterii de clasificare și alte manifestări frecvente de LES.
2. Pacienți și metode
2.1. Pacienții, selecția serurilor și caracteristicile analizate
serurile de la 141 de pacienți cu LES (131 de femei, vârsta medie la diagnostic 36, 7 ± 14, 5 ani) care au îndeplinit criteriile Colegiului American de Reumatologie (ACR) au fost selectați pentru acest studiu ., Acești pacienți au fost urmăriți la unitatea de boli autoimune de Medicină internă, Spitalul Universitario Central de Asturias, iar caracteristicile lor clinice și imunologice au fost înregistrate într-o bază de date a pacienților SLE înființată în regiunea noastră din 2004, care este actualizată periodic . Caracteristicile înregistrate în această bază de date au inclus criteriile de clasificare ACR și alte manifestări SLE conexe sau parametrii imunologici. În această lucrare, toate caracteristicile, cu excepția citopeniei, au fost înregistrate cumulativ., Citopenia a fost luată în considerare la diagnostic pentru a evita influența tratamentului asupra parametrilor hematologici. Numai acele caracteristici a căror prevalență a fost mai mare de 10% au fost analizate statistic. În special, caracteristicile incluse în analiză au fost criteriile de clasificare ACR, nonscarring alopecie, xeroftalmie/xerostomie, fenomenul Raynaud, și hypocomplementemia. Toate criteriile de clasificare au fost definite după cum este indicat în criteriile ACR din 1996, cu excepția tulburărilor neurologice., În această manifestare a les, sindromul cerebral organic, tulburările vizuale și boala nervilor periferici și cranieni au fost, de asemenea, luate în considerare alături de convulsii și psihoze. Hypocomplementemia a fost definit ca având scăzut C3 și/sau C4 niveluri (<0.8 mg/dL și <0,15 mg/dL, resp.).
serurile corespunzătoare diferitelor revizuiri ale pacientului au fost colectate și păstrate la -20°C. ultimul ser de la fiecare pacient a fost selectat pentru studiu (perioada de colectare din februarie 2007 până în martie 2011). Vârsta medie la momentul analizei a fost de ani.
2. 2., Determinarea Anticorpilor, Complementului, și a Parametrilor Hematologici
Determinarea anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 anticorpi în 141 selectate LES pacienți a fost efectuată de către fluoro imunoenzimatică (Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH, Freiburg, Germania). Testul a fost efectuat pe un analizor automat ImmunoCAP 250. La toți pacienții, alte specificități SLE ANA (anti-dsDNA, SS-B/la, U1RNP și Sm) și anticorpi anti-cardiolipin (CL) IgG și IgM au fost, de asemenea, determinate simultan cu aceeași metodologie., Nivelurile C3 și C4 au fost măsurate prin nefelometrie (Beckman Coulter Inc., California, SUA).
nivelurile parametrilor hematologici, cuantificate folosind un analizor Advia 2120 (Siemens Healthcare, Erlangen, Germania), erau disponibile la momentul determinării autoanticorpilor la 128 pacienți (119 femei; vârsta medie la diagnostic și la analiză și ani, resp.). Leucopenie, limfopenie, și trombocitopenie au fost considerate în conformitate cu criteriile ACR (<4.00 × 103/µL, <1.50 × 103/µL, iar <100.00 × 103/µL, resp.,) și anemia a fost definită de o concentrație de hemoglobină de <11.0 mg/dL la femei și <12.0 mg/dL la bărbați.
2. 3. Analiza statistică
asociației de prezența de anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 cu LES manifestări a fost analizat de către binar de regresie logistică ajustate pentru sex și de vârsta la diagnostic și la momentul analizei., Anterior, prezența atât a specificităților Anti-Ro, cât și a anticorpilor anti-dsDNA, SSB/La, RNP, Sm și CL a fost analizată simultan prin procedura de regresie logistică în trepte înainte pentru a arăta influența sa asupra fiecărei manifestări clinice și parametru imunologic. Atunci când este cazul, alți autoanticorpi dovedit a fi statistic influente au fost incluse în analiză de regresie logistică binară de anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 asociații. În această analiză, ambele reactivități anti-Ro au fost mai întâi incluse împreună ca variabile independente., Pentru a evita efectele multicolinearității cauzate de relația strânsă existentă între cele două specificități, s-a efectuat o analiză separată a anticorpilor atunci când s-a constatat o asociere nesemnificativă statistic. Au fost calculate ratele de cote (OR) și intervalul de încredere (IÎ) de 95%. Nivelurile de complement și parametrii hematologici au fost comparați prin testele studențești sau Mann-Whitney în funcție de distribuția datelor. Rezultatele au fost considerate semnificative statistic când valoarea a fost <0, 05. Analiza statistică a fost efectuată utilizând SPSS 15.,0 pachet software statistic (SPSS Inc., Chicago, IL, SUA).
3. Rezultate
3.1. Prevalența Anti-SSA/Ro60 și Anti-Ro52/TRIM21 în LES Pacienții
prezența de anti-SSA/Ro60 și/sau anti-Ro52/TRIM21 anticorpi a fost detectat în 62 din 141 LES pacienți analizați (44.0%). Reactivitatea simultană a fost principalul model de anticorpi observat, 37 de pacienți fiind pozitivi pentru ambii anticorpi (26, 2%). Anti-SSA/Ro60 singur a fost prezent în 23 (16.3%), iar izolat anti-Ro52/TRIM21 reactivitate fost găsite doar în două cazuri (1.4%)., Astfel, modelul anticorpilor din această serie de pacienți a fost în acord cu relația stabilită între anti-SSA/Ro60 și LES și nu a fost asociat nici cu vârsta la diagnostic, nici cu prevalența sexului (Tabelul 1).
3. 2. Asociațiile de Anti-SSA/Ro60 și Anti-Ro52/TRIM21 cu Manifestări Clinice în LES
atunci Când anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 au fost incluse simultan ca variabile independente în analiza de regresie, singura asociere semnificativă a fost găsit citopenia cu anti-Ro52/TRIM21 (Tabelul 2)., Datorită acestei constatări, am analizat suplimentar relația dintre acești autoanticorpi și diferitele tipuri de criterii hematologice ACR și s-a observat o tendință spre o asociere între anti-Ro52/TRIM21 și leucopenie/limfopenie (Tabelul 2). Trombocitopenia nu a putut fi analizată deoarece toți pacienții trombocitopenici cu anticorpi anti-Ro au fost pozitivi pentru ambele specificități (4 din 4) și nici anemia hemolitică nu a fost analizată datorită numărului mic de pacienți (doar cinci) cu această afecțiune sanguină., similar citopeniei, ulcerul oral și fenomenul Raynaud au fost, de asemenea, asociate pozitiv, deși nu semnificativ, cu anti-Ro52/TRIM21 (Tabelul 2). Atunci când anti-Ro52/TRIM21 fost analizate separat, fără a include anti-SSA/Ro60 ca alte variabilă independentă, numai asocierea cu fenomenul Raynaud devenit semnificativă statistic (SAU 2.46, IÎ 95% 1.11–5.43, ).
Nici unul dintre celelalte manifestări clinice au arătat o asociere semnificativă cu anti-SSA/Ro60 și/sau anti-Ro52/TRIM21 dacă ambele anticorpi au fost simultan sau separat analizate.,
3. 3. Asociațiile de Anti-SSA/Ro60 și Anti-Ro52/TRIM21 cu Parametrii Imunologici în LES
Anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 arătat, de asemenea, o altă asociere cu LES legate de parametrii imunologici. Într-adevăr, atunci când cele două anti-Ro adaptate reactivitatii au fost considerate împreună ca variabile independente, un opus de comportament a fost observat în ceea ce privește prezența de anticorpii anti-adndc și hypocomplementemia, anti-SSA/Ro60 fiind asociată pozitiv si anti-Ro52/TRIM21 negativ asociate (Tabel 3)., Cu toate acestea, numai asociațiile dovedit a fi statistic semnificative au fost negative relația dintre anti-Ro52/TRIM21 și anticorpii anti-adndc și pozitivă între anti-SSA/Ro60, și hypocomplementemia. Atât nivelurile scăzute de C3, cât și cele C4 s-au dovedit a fi asociate pozitiv cu anti-ssa/Ro60, dar numai asocierea cu C4 a fost semnificativă statistic. În plus, nivelurile de acest completa fracțiune, dar nu cele de C3, au fost, de asemenea, semnificativ mai mici în anti-SSA/Ro60 pozitivi decât negativi pacienții la data de autoanticorpi determinare (0.16 ± 0.,06 mg/dL față de mg / dL și mg / dL față de mg / dL, pentru, resp., C4 și C3).pe de altă parte, s-a constatat că anticorpii antifosfolipidici sunt asociați negativ cu anti-SSA/Ro60 (Tabelul 3). Deși ambele anti-Ro pozitive grupuri au arătat o scădere similară în procent de pacienți cu anticorpi antifosfolipidici, SAU obținute în anti-Ro52/TRIM21 grup a fost de aproape 1 (0.97), întrucât corespunde grup de anti-SSA/Ro60 pozitivă a pacienților a fost de 0,33., Această constatare a reflectat probabil o implicare mai puternică a reactivității coexistente anti-SSA/Ro60 în relația negativă cu anticorpii antifosfolipidici. În fapt, un negativ asociere semnificativă statistic a fost găsit doar pentru anti-SSA/Ro60 în analiza separată a ambelor aspecte specifice (SAU 0,32, IÎ 95% 0.13–0.79, și SAU 0.42, IÎ 95% 0.15–1.20, pentru anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 resp.). Dintre anticorpii antifosfolipidici analizați, anti – Cl IgG / IgM și anticoagulantul lupus (LA) s-au dovedit a fi cei mai implicați în această relație negativă (Tabelul 3)., Consecvent cu cea observată atunci când se analizează întreaga antifosfolipidic grup, doar anti-SSA/Ro60 a fost dovedit a fi semnificativ statistic asociate cu anti-CL IgG/IgM atunci când cele două anti-Ro anticorpi au fost analizate separat (SAU 0,29, IÎ 95% 0.09–0.92, și SAU 0,28, IÎ 95% 0.06–1.27, pentru anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 resp.). Asocierea cu LA nu a fost analizat statistic datorită numărului redus de pacienți pozitivi cu anti-SS-Ro60 (2 pacienți) sau Ro52/TRIM21 anticorpi (1 pacient).,
Anti-Sm a fost analizat doar imunologice parametru găsit să nu fie asociat cu anti-SSA/Ro60 sau anti-Ro52/TRIM21 (Tabelul 3).
3. 4. Asociere diferențială de Anti-SSA/Ro60 și Anti-Ro52/TRIM21 cu Parametrii Hematologici
În scopul de a confirma observate anterior de asociere între anti-Ro52/TRIM21 și citopenia, am comparat nivelurile parametrilor hematologici la momentul analizei în 128 LES pacienți pe baza lor anti-Ro52/TRIM21 de stare (Tabelul 4). Dintre acești pacienți, 110 (86,6%) au fost tratați cu antimalarice, 48 (37.,8%) cu corticosteroizi și 30 (23,6%) cu medicamente imunosupresoare (azatioprină, metotrexat sau micofenolat de mofetil). Niciunul nu a primit terapie biologică. Valorile medii ale leucocitelor s-au dovedit a fi semnificativ mai mici în grupul de pacienți cu anticorpi anti-Ro52/TRIM21 (). Acest efect a fost exercitat în principal asupra limfocitelor, deoarece pacienții anti-Ro52 / TRIM21 pozitivi au prezentat niveluri semnificativ mai mici ale limfocitelor decât pacienții negativi ()., Mai mult decât atât, asocierea dintre anti-Ro52/TRIM21 și limfopenie a fost confirmata de regresie logistică ajustate pentru sex, vârstă, și de tratament la momentul analizei (SAU 2.72, 95% CI 1.08–6.88, ).
În schimb, atunci când se analizează anti-SSA/Ro60, nivelurile parametrilor hematologici au arătat un comportament diferit (Tabelul 5). De fapt, nu s-au constatat diferențe semnificative statistic în ceea ce privește nicio populație de leucocite, în timp ce pacienții anti-SSA/Ro60 pozitivi au avut niveluri de hemoglobină semnificativ mai mici decât pacienții negativi ()., În ciuda acestei diferențe semnificative, valoarea medie a hemoglobinei la pacienții pozitivi a fost în limitele normale. Pe de altă parte, nivelurile trombocitelor au fost aproape semnificativ mai mari la pacienții anti-SSA/Ro60 pozitivi decât la pacienții negativi (). Această constatare ar putea fi influențată de asocierea negativă găsită de noi între această specificitate anti-Ro și anticorpii anti-CL IgG/IgM care, la rândul lor, sunt cunoscuți că diminuează nivelul trombocitelor. Într-adevăr, pacienți pozitivi pentru anti-CL IgG/IgM au arătat o tendință de a fi mai mic de trombocite decât negativ pacienți (209.8 ± 69.3 × 103/µL față de 241.1 ± 69.,6 × 103 / µL,, resp.).
4. Discuții
În această lucrare, anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 au fost prezentate pentru a afișa un model diferit de clinice și imunologice asociații în LES. Conform relației descrise anterior între anti-SSA / Ro60 și Les , s-a constatat că această specificitate anti – Ro este asociată pozitiv cu hipocomplementemia, o caracteristică imunologică legată de SLE., Pe de altă parte, o asociere negativă a fost observată între anti-Ro52/TRIM21 și anti-adndc care este în concordanță cu cea mai mare prevalență a acestui anticorp în alte boli autoimune, cum ar fi SS, miozită, SSc, și boli de ficat . ambele reactivități Anti-Ro au prezentat, de asemenea, un comportament diferit în ceea ce privește anomaliile hematologice. Astfel, anti-Ro52/TRIM21 a fost găsit pentru a fi asociat în mod semnificativ cu limfopenie, independent de regim terapeutic, întrucât pacienții cu anti-SSA/Ro60 anticorpi-a arătat mai mare număr de trombocite și inferioare nivelului de hemoglobină decât negativ pacienți., Limfopenia a fost anterior legată de prezența anticorpilor anti-Ro în LES și SS . Constatările noastre susțin relația specifică dintre anti-Ro52 / TRIM21 și limfopenia în Les descrisă în lucrările anterioare . Dintre diferitele subseturi de limfocite, există dovezi că celulele CD4+ și NK sunt implicate în limfopenia asociată cu anti-Ro sau, în mod specific, cu anti-Ro52/TRIM21 ., Antigenul Ro52 / TRIM21 este o proteină citoplasmatică care poate fi indusă și redistribuită nucleului sau suprafeței celulare prin mai mulți stimuli de stres și proinflamatori, cum ar fi IFNs de tip I și II, în diferite tipuri de celule, inclusiv limfocite . Interesant este că expresia Ro52/TRIM21 sa dovedit a fi reglată în celulele mononucleare din sângele periferic al pacienților SLE și SS ., Este tentant să speculeze că o proinflamatorii mediu caracteristic sistemice, boli autoimune ar putea induce expresia Ro52/TRIM21 pe suprafața limfocitelor, astfel, permițând legarea de anticorpi specifici care ar provoca în cele din urmă moartea celulelor. În acest sens, s-a descris că serurile autologe care conțin Anti-Ro cresc moartea celulară prin apoptoză în culturile de limfocite SLE . s-a constatat anterior că anticorpii anti-Ro sunt asociați cu o prevalență mai mică a trombocitopeniei la pacienții cu LES ., Un posibil rol de anti-SSA/Ro60 reactivitate în această asociere negativă este susținută de tendința spre niveluri mai mari ale numărului de trombocite în anti-SSA/Ro60 pozitivi decât negativi pacienții respectate de către noi. Cu toate acestea, datele noastre sugerează că acest efect protector ar fi indirect și invers dependent de starea anticorpilor antifosfolipidici. De fapt, am constatat că anti-ssa/Ro60 a fost asociat negativ cu anticorpii antifosfolipidici și anti-CL IgG/IgM care, la rândul lor, au fost legați de niveluri scăzute de trombocite ., Datele noastre susțin, de asemenea, o implicare mai mare a specificității anti-SSA/Ro60 în asocierea negativă evidențiată anterior de anti-Ro cu anticorpi anti-CL . În cele din urmă, efectul negativ observat al anti-SSA/Ro60 asupra valorilor hemoglobinei nu este suficient pentru a fi considerat anemie. Astfel, toate aceste constatări sugerează că anti-SSA/Ro60 nu are efect patologic pe orice hematologice populației în contrast cu cea observată pentru anti-Ro52/TRIM21.,
Similar cu cel observat în legătură cu limfopenie, anti-Ro52/TRIM21 dar nu anti-SSA/Ro60 a fost dovedit a fi pozitiv asociat cu fenomenul Raynaud. Această relație a fost independentă de prezența anti-U1RNP, un anticorp cunoscut a fi legat de fenomenul Raynaud chiar și în Les . Anticorpii împotriva sistemului Ro s-au dovedit, de asemenea, asociați cu fenomenul Raynaud în SS ., Susținând rolul specific al anti-Ro52 / TRIM21 în această asociere, este interesant de observat că acest anticorp a fost detectat la aproximativ 20% dintre pacienții cu SSc, unde fenomenul Raynaud este o caracteristică cardinală . În plus, anti-Ro52/TRIM21 a fost, de asemenea, raportat a fi al doilea cel mai frecvent autoanticorp într-o cohortă SSc .
Fotosensibilitate și xeroftalmie/xerostomie au fost singurele caracteristici dovedit a fi asociată pozitiv cu ambele anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21., Aceste asociații au fost semnificative statistic doar atunci când ambii autoanticorpi au fost analizați separat, probabil datorită relației strânse existente între ei. Deși anticorpii împotriva sistemului Ro au fost considerați istoric ca fiind asociați cu fotosensibilitatea, această relație rămâne controversată . În plus, se știe puțin despre asocierea cu cele două reactivități diferite ., Cu toate acestea, îmbunătățită expresie a SSA/Ro60 și Ro52/TRIM21 a fost observată în citoplasma celulară sau suprafața keratinocitelor după iradiere UV, sprijinind astfel relația dintre fotosensibilitate și reactivitate împotriva ambelor antigene .pe de altă parte, asocierea dintre xeroftalmie/xerostomie și anti-Ro este clar stabilită la pacienții cu LES . Similar constatărilor noastre, a fost raportată și o asociere cu anti-SSA/Ro60 sau anti-Ro52/TRIM21 ., Aceste două Ro antigene au fost raportate pentru a fi exprimată în suprafața celulei umane ductal celule epiteliale în timpul apoptozei, sugerând astfel un rol de această moarte celulară mecanism în inducerea de anticorpi anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 răspunsuri . În plus, specifice anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 celulele B cu o diferențiere model compatibil cu plasmă au fost detectate celule în glandele salivare ale SS pacienți .
5. Concluzii
Anti-SSA/Ro60 și anti-Ro52/TRIM21 a arătat un model diferit de clinice și imunologice asociații în LES., Pe lângă asocierile pozitive comune cu fotosensibilitate și xeroftalmie/xerostomie, cele două reactivități anti-Ro au prezentat atât asocieri specifice pozitive, cât și negative. Anti-SSA/Ro60 a fost dovedit a fi asociată pozitiv cu hypocomplementemia dar negativ cu anticorpi antifosfolipidici, întrucât anti-Ro52/TRIM21 arătat o asociere pozitivă cu limfopenie și fenomenul Raynaud și o relație negativă cu anticorpii anti-adndc., Astfel, datele noastre sporesc dovezile privind diferitele asocieri ale ambelor specificități anti-Ro cu manifestări clinice specifice chiar și într-o singură boală.
conflictul de interese
autorii nu raportează niciun conflict de interese.
mulțumiri
studiul nu a primit sprijin financiar din partea niciunei organizații., Autorii mulțumesc Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH pentru furnizarea cu generozitate autoanticorpi kituri pentru studiul de față, Ana Ynés Martínez Paredes pentru asistență tehnică, și Pablo Martínez Camblor de la Biroul Investigații Biomedicale (OIB-FICYT) din Principatul Asturias pentru analiza statistică. De asemenea, sunt deosebit de recunoscători Dr.Carmen Gutiérrez și Asociación Lúpicos de Asturias pentru încurajarea și sprijinul lor. Iván Cabezas-Rodríguez este susținut de programul Río Hortega, Instituto De Salud Carlos III, Spania.