NIOMs microbiological laboratory is approved as a class 2 laboratory from the Norwegian Health Ministry and is approved for work with contained GMM (genetically modified microorganisms). O laboratório está equipado com instalações para testes antibacterianos e crescimento de biofilm em superfícies de materiais.
Biofilm
Biofilm is grown on biomaterial in microtitter wells or in a biofilm reactor. Os compostos antibacterianos podem ser incorporados ou revestidos na superfície do biomaterial., São utilizadas técnicas diferentes para estudar o seu efeito na formação e crescimento do biofilme. A quantidade de biofilme pode ser quantificada após coloração de safranina, e também pode ser visualizada por microscopia eletrônica. A viabilidade do biofilme pode ser determinada por coloração viva/morta e microscopia de fluorescência/confocal, ensaio de resazurina, ensaio XTT ou por Contagem de viabilidade após remoção do biofilme seguida de revestimento em placas de ágar nutritivas.o método da unidade formadora de Colónias (UFC) pode ser utilizado para a identificação de microrganismos e para testar o efeito de substâncias e técnicas antimicrobianas., É um método sensível e amplamente aceito dentro da microbiologia. Neste método, o número de células vivas (células capazes de se reproduzir) presentes numa suspensão é contado numa superfície de ágar nutriente.as células bacterianas são recolhidas e dispersas numa solução não tóxica como, por exemplo, tampão fosfato salino ou água fisiológica. A suspensão celular é então diluída, normalmente numa série com uma diluição de 10 vezes, de modo a obter placas com um número contável de bactérias., Uma certa quantidade de cada diluição é banhada, em replicados de 3 ou 4, em placas de petri com ágar nutriente destinado às bactérias em questão. As placas de petri são incubadas em ambientes adequados e durante um período adequado antes de as colónias serem contadas. Cada colônia que pode ser contada é chamada de unidade formadora de Colônia (UFC), e o número de CFO está relacionado com o número viável de bactérias na amostra. Calcula-se matematicamente o número de bactérias da amostra original, tendo em conta a quantidade revestida e o seu factor de diluição., Os resultados são frequentemente apresentados como UFC/ml (unidades formadoras de colónias por mililitro) para líquidos, e ufc/g (unidades formadoras de colónias por grama) para sólidos.
técnica de Revestimento Em Espiral
o método tradicional com diluição e revestimento é demorado, pelo que o número de variáveis num ensaio pode ser limitado. O laboratório de Microbiologia do NIOM está, portanto, a utilizar uma técnica de revestimento em espiral onde um instrumento, a placa em espiral WASP (Figura 1), deposita um determinado volume de amostra numa placa de ágar rotativa.,
o volume da amostra depositada por unidade de superfície da placa diminui ao longo da espiral, resultando num efeito de diluição, permitindo a contagem de colónias isoladas (Figura 2) nos respectivos sectores do volume de deposição conhecido.
para a contagem de bactérias, NIOM usa um contador de colônias automatizado, acólito, e os resultados são transferidos diretamente para o Excel para análise posterior.