Experimentais produtos
O produto em estudo UC-II® (Muito 1204004) foi derivada de frango esterno., Foi fabricado sob as atuais condições de boas práticas de fabricação (cGMP) usando um processo patenteado que preservou sua estrutura nativa (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Tanto o cloridrato de glucosamina (GH) quanto o sulfato de condroitina (CS) foram comprados através da Wilke Resources (Lenexa, KS). The Wellable group (Shishi City, Fujian) manufactured GH under cGMP and according to United States Pharmacopeia 26 specifications. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) fabricou CS derivado de bovinos sob GMPC., A UC-II e a GC foram encapsuladas em cápsulas opacas de tamanho “00” com quantidades suficientes de Excipientes (Celulose microcristalina e dióxido de silício) de modo a serem sensoriais idênticas às do placebo. Os nutracêuticos inter-sanitários forneceram todos os materiais de estudo. Todos os medicamentos americanos (Billings, MT) verificaram a quantidade de ingredientes ativos nas cápsulas do estudo. Os materiais do estudo foram mantidos em um armário seguro com acesso restrito ao coordenador do local, o farmacêutico dispensador, e o investigador principal.,
concepção do estudo
o objectivo deste estudo clínico aleatorizado, em dupla ocultação, controlado com placebo foi avaliar a capacidade da UC-II para melhorar os sintomas do joelho em indivíduos OA, tal como medido pela pontuação global do WOMAC, comparativamente ao placebo e à CG. O julgamento foi realizado em 13 centros no sul da Índia. Devido a uma limitação nos procedimentos de amostragem de fluidos sinoviais em múltiplos locais clínicos, o estudo foi realizado sob dois protocolos de estudo separados., Protocolos de estudo foram aprovados pelo Comitê de Ética Institucional de cada centro (IEC), e listados no registro de ensaios clínicos da Índia como protocolos de estudo 003663 e 003348. As visitas de inscrição, aleatorização e acompanhamento foram idênticas para ambos os protocolos, e foram realizadas no dia 1 (linha de base), 7, 30, 60, 90, 120, 150 e 180 (Quadro 1). Todos os investigadores participaram nas mesmas reuniões de investigadores, utilizaram formulários idênticos de admissão e notificação de dados, e foram treinados e monitorizados pelo mesmo grupo de Associados de investigação clínica.,
a Eficácia medições foram avaliados em todas as visitas e incluído WOMAC, VAS, e LFI índices. O teste de flexão do joelho (ROM) foi realizado em cada visita. Foram fornecidos diários das disciplinas e produto do estudo em todas as visitas, excepto no dia 180 e foram recolhidos em todas as visitas de acompanhamento., Os indivíduos foram instruídos a registar diariamente o consumo do produto do estudo, o uso de medicação de emergência, bem como medicamentos concomitantes no produto lácteo sujeito durante toda a duração do estudo. O sangue e a urina foram colhidos no rastreio e no dia 180. Os testes de gravidez foram feitos nas visitas de rastreio e acompanhamento. Os acontecimentos adversos (AEs) foram registados utilizando os dados diários de cada indivíduo e os questionários de visita ao local administrados pelo pessoal de admissão em todas as visitas de estudo.,
objectivos clínicos
o objectivo primário foi definido como a alteração na pontuação total do WOMAC desde a linha de base até ao dia 180 para o grupo UC-II versus placebo e GC. Os objectivos clínicos secundários para ambos os protocolos foram semelhantes e incluíram a alteração desde o início até ao dia 180 versus placebo e GC para todos os objectivos, incluindo as seguintes pontuações: (1) VAS média; (2) subescalas médias do WOMAC; (3) LFI; e (4) flexão do joelho. Outro parâmetro de avaliação final incluiu a alteração entre a linha de base e o dia 180 para a proteína de matriz oligomérica da cartilagem do biomarcador sérico (COMP)., No protocolo 003348, os objectivos secundários adicionais incluíram a alteração do biomarcador sérico, da proteína C-reactiva (CRP) mais dos biomarcadores de fluidos sinoviais interleucina (IL)-6 e da metaloproteinase de matriz (MMP)-3, desde o início até ao dia 180.
indivíduos do estudo
um total de 234 indivíduos foram analisados e 191 foram aleatorizados(Fig. 1). Os critérios de inclusão no estudo foram indivíduos do sexo masculino e feminino com 40-75 anos de idade, um índice de Massa Corporal (IMC) de 18-30 kg/m2, OA moderado a grave por exame físico (crepitos, ampliações ósseas, inchaço das articulações, etc.,) em um ou ambos os joelhos, dor no joelho, por pelo menos 3 meses antes do início do estudo, uma LFI pontuação entre 6 e 10 e um VAS pontuação de 40-70 mm 7 dias após a retirada dos medicamentos excluídos, além de uma radiografia do joelho que foi classificado como Kellgren e Lawrence (K-L) radiografia pontuação de 2 ou 3 . Todos os diagnósticos de OA foram confirmados por cada investigador do local de estudo e anotados no formulário de relatório de caso do sujeito (CRF). No caso de envolvimento bilateral do joelho, o joelho indicador utilizado para o estudo foi o que apresentou os sintomas de OA mais graves no início., Os critérios pormenorizados de inclusão–exclusão encontram-se resumidos no quadro 2.
de Inscrição e de randomização gráfico de fluxo
de Ética, consentimento e permissões
os Sujeitos foram recrutados após eles analisados, compreendidos os detalhes do estudo e, em seguida, assinou a norma IEC-aprovado formulário de consentimento., O estudo está em conformidade com a Declaração de Helsínquia (versão 1996).
Randomization & blinding
Block randomization, consisting of nine individuals per block, was executed in a 1:1 ratio using random numbers generated by an independent statistician (SPSS version 16.0). O conhecimento do código de aleatorização foi limitado ao estatístico mais um monitor QA não relacionado com o estudo., Foi dado a cada investigador envelopes opacos e selados que denotavam números de identidade de um único doente, códigos de aleatorização e regime suplementar a abrir em caso de emergência. O código foi quebrado depois da base de dados clínica estar bloqueada.
regime posológico
indivíduos ingeriram dois comprimidos azuis de manhã com pequeno-almoço e duas cápsulas brancas antes de deitar. Para a coorte UC-II, as duas cápsulas da manhã foram placebo, enquanto as cápsulas da noite continham 20 mg cada um dos 40 mg UC-II, o que é idêntico aos níveis de dose clínica previamente utilizados . Esta dose administrada 1.,2 mg de colagénio tipo II não desnaturado, determinado por um protocolo Elisa-extracção recentemente desenvolvido e validado (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). Para o grupo da GC, as doses de manhã e à noite administraram 750 mg de GH mais 600 mg de CS, totalizando uma dose diária de 1.500 mg de GH mais 1. 200 mg de CS. O grupo placebo ingeriu números idênticos de cápsulas azuis e brancas contendo apenas excipientes. Os frascos de estudo foram rotulados de acordo com ICH-GCP e diretrizes regulamentares locais aplicáveis.,na visita de rastreio efectuada pelo investigador do estudo, foram documentadas terapêuticas anteriores e Concomitantes
medicações anteriores. Em cada visita, o pessoal do estudo revisou os Diários do assunto e questionou cada participante sobre o uso de qualquer medicação concomitante, incluindo aqueles na lista proibida. Medicamentos proibidos incluíam ibuprofeno, aspirina, outros AINEs, ou quaisquer outros analgésicos (OTC ou prescrição), além de quaisquer suplementos dietéticos (excluindo vitaminas) que pudessem apoiar a saúde das articulações., Todas as medicações concomitantes utilizadas durante o estudo foram documentadas no registo médico do sujeito pelo investigador do estudo e transcritas para a sua IRC pelo pessoal do estudo.
medicamentos de salvamento
acetaminofeno foi permitida numa dose de 500 mg duas vezes por dia. Os participantes foram instruídos a não tomar este medicamento dentro de 48 horas de uma visita de avaliação. Os níveis de utilização e o calendário foram introduzidos em cada visita no registo médico do sujeito pelo investigador do estudo. O pessoal do estudo transcreveu esta informação para a CRF do sujeito.,
conformidade e segurança
os indivíduos foram instruídos a trazer os seus frascos para cada visita. As cápsulas restantes foram contadas e registadas no registo de CRF e responsabilização do indivíduo. Como medida secundária de Conformidade, os indivíduos completaram um diário indicando a dosagem diária dos produtos do estudo. Foram realizadas avaliações de segurança em todas as visitas pelo investigador e pelo pessoal do local (Ver quadro 9).as avaliações do estudo foram determinadas utilizando a VA3 do WOMAC.,1 questionário contendo 24 itens agrupados em três categorias: dor, rigidez e função física (intervalo de pontuação 0-2400). Cada subescala média de WOMAC respectivo foi determinada dividindo a pontuação subescala pelo número de perguntas (5, dor; 2, rigidez; 17, função física) que continha. A pontuação média do SAV foi determinada utilizando um questionário do SAV contendo 7 questões relacionadas com a dor (intervalo de pontuação 0-700), dividindo então a pontuação global por sete., A Pontuação da LFI foi determinada utilizando um questionário da LFI que avaliou a dor, a distância a pé e as actividades da vida diária (intervalo de pontuação 0-24). A flexão do joelho foi medida usando goniometria, com o sujeito deitado na posição propensa e a perna a ser testada posicionada ao longo da borda da mesa .
biomarcadores com fluido sinovial
fluido sinovial (~0, 5 mL) foi aspirado da articulação do joelho usando uma agulha de tamanho apropriado (Calibre 18-24, dependendo do tamanho das articulações). O líquido colhido foi armazenado congelado até ser testado., Os níveis IL-6 e MMP-3 foram determinados utilizando os correspondentes kits ELISA Duoset (R&d Systems, Minneapolis, MN).os níveis séricos de biomarcadores
COMP (Quantikine ELISA, R&d) foram determinados em ambos os protocolos do estudo. Os níveis de CRP (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) foram avaliados no protocolo 003348. O soro foi armazenado congelado até ser analisado. Os coeficientes de variação Interassay e intrassay para COMP e CRP foram <5 %.,verificámos, utilizando a análise de 2 vias da variância (ANOVA), que os resultados dos dois protocolos podiam ser combinados numa única análise, demonstrando que não havia interacção de grupo por estudo e que a magnitude da eficácia observada nos dois protocolos era semelhante.foi utilizada uma análise modificada da intenção de tratar (mITT) para avaliar os resultados de eficácia e segurança definidos a priori. Isto incluiu todos os indivíduos que foram aleatorizados, consumiram o produto do estudo, e tiveram pelo menos uma visita completa após a linha de base., Foi utilizada uma análise da covariância (ANCOVA), que incluiu a suplementação como factor fixo e o valor de base correspondente da variável a ser testada como covariável, para avaliar a significância estatística global dos objectivos primários e secundários. Após ANCOVA, o teste de comparação múltipla Tukey-Kramer foi utilizado para determinar a significância estatística emparelhada e calcular intervalos de confiança de 95%. Além disso, foi realizada uma análise mista de medidas repetidas (MMRM) do objectivo primário para ter em conta as múltiplas avaliações obtidas durante este estudo., Além disso, o método dos trapezóides foi utilizado para calcular a área incremental sob a curva (iAUC) para todos os grupos de estudo. Para a estimativa da iAUC, os valores em falta foram imputados usando o algoritmo de maximização de expectativa no SAS. O uso de medicação de resgate entre grupos foi comparado usando regressão logística seguido de comparações emparelhadas usando o teste Tukey-Kramer. Além disso, foi realizada uma análise estratificada do parâmetro de avaliação final primário de acordo com os níveis séricos de COMP basais acima e abaixo do valor mediano para este biomarcador., As diferenças foram consideradas significativas se o valor de p resultante fosse ≤0, 05. Um estatístico independente realizou as análises e outros cálculos utilizando a versão 9.3 da SAS (Cary, NC).