badane produkty
produkt badany UC-II® (Lot 1204004) pochodzi z mostka kurczaka.., Został wyprodukowany w obecnych warunkach dobrej praktyki wytwarzania (cGMP)przy użyciu opatentowanego procesu, który zachował swoją natywną strukturę (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Zarówno chlorowodorek glukozaminy (GH) i siarczan chondroityny (CS) zostały zakupione przez Wilke Resources (Lenexa, KS). Grupa Wellable (Shishi City, Fujian) produkowała GH zgodnie z cGMP i zgodnie ze specyfikacjami farmakopei USA 26. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) produkował CS pochodzenia bydlęcego w ramach cGMP., UC-II i GC były zamknięte w nieprzezroczystych kapsułkach o rozmiarze ” 00 ” z wystarczającą ilością substancji pomocniczych (celuloza mikrokrystaliczna i dwutlenek krzemu), tak aby były sensorycznie identyczne jak placebo. InterHealth Nutraceuticals dostarczyło wszystkie materiały do badań. All American Pharmaceutical (Billings, MT) zweryfikowało ilość aktywnych składników w kapsułkach badawczych. Materiały do badań były przechowywane w bezpiecznej szafce z dostępem ograniczonym do koordynatora ośrodka, farmaceuty i głównego badacza.,
projekt badania
celem tego randomizowanego, podwójnie zaślepionego, kontrolowanego placebo badania klinicznego była ocena zdolności UC-II do poprawy objawów kolanowych u pacjentów z OA, mierzonej na podstawie ogólnego wyniku WOMAC, w porównaniu z placebo i GC. Proces przeprowadzono w 13 ośrodkach w południowych Indiach. Ze względu na ograniczenie procedur pobierania próbek płynu maziowego w wielu miejscach klinicznych, badanie przeprowadzono w ramach dwóch oddzielnych protokołów badań., Protokoły badań zostały zatwierdzone przez Institutional Ethics Committee (IEC) każdego centrum i wymienione w rejestrze badań klinicznych Indii jako protokoły badań 003663 i 003348. Rejestracja, randomizacja i wizyty kontrolne były identyczne dla obu protokołów i były przeprowadzane w dniu 1 (wyjściowym), 7, 30, 60, 90, 120, 150 i 180 (Tabela 1). Wszyscy badacze uczestniczyli w tych samych spotkaniach badaczy, korzystali z identycznych formularzy przyjmowania i przekazywania danych oraz byli szkoleni i monitorowani przez tę samą grupę współpracowników ds. badań klinicznych.,
pomiary skuteczności były oceniane podczas wszystkich wizyt i obejmowały wskaźniki WOMAC, VAS i LFI. Podczas każdej wizyty wykonywano test flexion range of motion (ROM). Dzienniki uczestników i produkt badawczy były dostarczane podczas wszystkich wizyt, z wyjątkiem dnia 180, i były gromadzone podczas wszystkich wizyt kontrolnych., Uczestnicy zostali poinstruowani, aby przez cały czas trwania badania rejestrować dzienne spożycie badanego produktu, stosowanie leków doraźnych, a także jednoczesne stosowanie leków w badanym nabiale. Krew i mocz zostały pobrane podczas badań przesiewowych i dnia 180. Testy ciążowe wykonywano podczas badań przesiewowych i wizyt kontrolnych. Zdarzenia niepożądane (AEs) były rejestrowane przy użyciu danych wejściowych każdego pacjenta oraz kwestionariuszy wizyt w miejscu, podawanych przez personel przyjmujący podczas wszystkich wizyt studyjnych.,
kliniczne punkty końcowe
pierwszorzędowy punkt końcowy zdefiniowano jako zmianę całkowitej punktacji WOMAC od wartości początkowej do 180 dnia w grupie UC-II w porównaniu z placebo i GC. Drugorzędowe kliniczne punkty końcowe dla obu protokołów były podobne i obejmowały zmianę od wartości wyjściowej do dnia 180 w porównaniu z placebo i GC dla wszystkich punktów końcowych, w tym następujących punktów: (1) średnie wartości VAS; (2) średnie wartości PODSKALOWE WOMAC; (3) LFI; i (4) zgięcie kolana. Innym punktem końcowym była zmiana z punktu początkowego do dnia 180 dla biomarkera chrząstki oligomeric matrix protein (COMP) w surowicy., W protokole 003348 dodatkowe drugorzędowe punkty końcowe obejmowały zmianę biomarkera w surowicy, białka C-reaktywnego (CRP) oraz biomarkerów płynu maziowego interleukiny (IL)-6 i metaloproteinazy matrycowej (MMP)-3 od punktu początkowego do dnia 180.
osoby badane
w sumie przeprowadzono badania przesiewowe 234 osób, a 191 randomizowano (rys. 1). Kryteria włączenia do badania obejmowały mężczyzn i kobiety w wieku 40-75 lat, wskaźnik masy ciała (BMI) 18-30 kg / m2, umiarkowane do ciężkiego OA w badaniu fizykalnym (krepitus, powiększenie kości, obrzęk stawów itp.,) w jednym lub obu kolanach, Ból kolana przez co najmniej 3 miesiące przed rozpoczęciem badania, wynik LFI od 6 do 10 i wynik VAS 40-70 mm 7 dni po odstawieniu od wykluczonych leków, plus zdjęcie RTG kolana, które zostało ocenione jako wynik RTG Kellgrena i Lawrence ' A (K-L) 2 lub 3 . Wszystkie diagnozy OA zostały potwierdzone przez każdego badacza i odnotowane w formularzu CRF (case report form) podmiotu. W przypadku obustronnego zajęcia stawu kolanowego, kolano indeksowe użyte w badaniu było kolanem, w którym występowały najcięższe objawy OA na początku badania., Szczegółowe kryteria włączenia i wykluczenia przedstawiono w tabeli 2.
etyka, zgoda i uprawnienia
osoby zostały rekrutowane po przejrzeniu, zrozumieniu szczegółów badania, a następnie podpisaniu zatwierdzonego przez IEC formularza zgody., Badanie było zgodne z deklaracją Helsińską (wersja z 1996 r.).
randomizacja& oślepianie
randomizacja bloków, składająca się z dziewięciu osób na blok, została wykonana w stosunku 1:1:1 przy użyciu liczb losowych wygenerowanych przez niezależnego statystyka (SPSS wersja 16.0). Znajomość kodu randomizacji była ograniczona do Statystyka plus jeden monitor QA niezwiązany z badaniem., Każdy badacz otrzymał nieprzezroczyste, zapieczętowane koperty z numerami identyfikacyjnymi pojedynczych pacjentów, kodami randomizacji i schematem suplementacji, które miały być otwarte w nagłych przypadkach. Kod został złamany po zablokowaniu bazy danych.
schemat dawkowania
pacjenci przyjmowali dwie niebieskie tabletki rano ze śniadaniem i dwie białe kapsułki przed snem. W kohorcie UC-II dwie kapsułki poranne były placebo, podczas gdy kapsułki wieczorne zawierały po 20 mg każdej z UC-II w sumie po 40 mg, co jest identyczne z wcześniej stosowanymi dawkami klinicznymi . Dawka ta została podana 1.,2 mg niedenaturowanego kolagenu typu II zgodnie z nowo opracowanym i zatwierdzonym protokołem ekstrakcji-ELISA (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). W przypadku grupy GC poranne i wieczorne dawki dawały po 750 mg GH plus 600 mg CS, co daje dawkę dobową 1500 mg GH plus 1200 mg CS. Grupa placebo przyjmowała identyczną liczbę niebieskich i białych kapsułek zawierających wyłącznie substancje pomocnicze. Butelki do badań zostały oznakowane zgodnie z ICH-GCP i obowiązującymi lokalnymi wytycznymi regulacyjnymi.,
wcześniejsze i równoczesne terapie
wcześniejsze leki zostały udokumentowane podczas wizyty kontrolnej badacza. Podczas każdej wizyty personel badawczy przeglądał dzienniki uczestników i pytał każdego uczestnika o stosowanie jakichkolwiek leków jednocześnie, w tym tych znajdujących się na zakazanej liście. Zakazane leki zawarte ibuprofen, aspiryna, inne NLPZ, lub inne leki przeciwbólowe (OTC lub recepty), plus wszelkie suplementy diety (z wyjątkiem witamin), które mogą wspierać zdrowie stawów., Wszystkie leki stosowane jednocześnie podczas badania zostały udokumentowane w dokumentacji medycznej podmiotu przez badacza, a następnie przepisane do ich CRF przez personel badawczy.
leki ratunkowe
Paracetamol dopuszczono w dawce 500 mg dwa razy na dobę. Uczestnicy zostali poinstruowani, aby nie przyjmować tego leku w ciągu 48 godzin od wizyty ewaluacyjnej. Podczas każdej wizyty badacz wprowadzał poziomy użycia i terminy do dokumentacji medycznej badanego. Personel badawczy przepisał te informacje do CRF podmiotu.,
zgodność i bezpieczeństwo
Pozostałe kapsułki zostały zliczone i zapisane w CRF testera i Dzienniku odpowiedzialności. Jako drugorzędną miarę zgodności, uczestnicy wypełnili dziennik wskazujący codzienne dawkowanie badanych produktów. Podczas wszystkich wizyt badacza i personelu przeprowadzano oceny bezpieczeństwa (patrz tabela 9).
oceny badania
wyniki WOMAC zostały określone za pomocą WOMAC VA3.,1 kwestionariusz zawierający 24 pozycje pogrupowane w trzy kategorie: ból, sztywność i sprawność fizyczna (zakres punktacji 0-2400). Każda średnia w skali WOMAC została określona przez podzielenie wyniku w skali przez liczbę zawartych w niej pytań (5, ból; 2, sztywność; 17, sprawność fizyczna). Średni wynik VAS określono za pomocą kwestionariusza vas zawierającego 7 pytań związanych z bólem (zakres punktacji 0-700), a następnie podzielono ogólny wynik przez siedem., Wynik LFI został określony za pomocą kwestionariusza LFI, który oceniał ból, odległość chodzenia i czynności codziennego życia (zakres punktacji 0-24). Zgięcie kolana zostało zmierzone za pomocą goniometrii, przy czym Tester leżał w pozycji leżącej, a badana noga była ustawiona wzdłuż krawędzi stołu .
biomarkery płynu maziowego
płyn maziowy (~0,5 mL) odsysano ze stawu kolanowego za pomocą odpowiedniej wielkości igły (18-24 gauge, w zależności od wielkości stawu). Zebrany płyn był przechowywany zamrożony do czasu testów., Poziomy IL-6 i MMP-3 oznaczano za pomocą odpowiednich zestawów ELISA Duoset (R&D Systems, Minneapolis, MN).
biomarkery surowicy
poziomy COMP (Quantikine ELISA, R&Systemy D) zostały określone w obu protokołach badań. Poziomy CRP (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) zostały ocenione w protokole 003348. Surowica była przechowywana zamrożona do czasu analizy. Współczynniki zmienności MIĘDZYASSAY i intrassay dla COMP i CRP wynosiły<5 %.,
statystyki
zweryfikowaliśmy, używając 2-way analysis of variance (ANOVA), że wyniki obu protokołów można połączyć w jedną analizę, wykazując, że nie ma interakcji grupowych w badaniu i że wielkość skuteczności obserwowanej w ramach obu protokołów była podobna.
w celu oceny skuteczności i bezpieczeństwa, zdefiniowanych a priori, zastosowano zmodyfikowaną analizę intent-to-treat (mITT). Obejmowały one wszystkich pacjentów, którzy byli randomizowani, spożywali badany produkt i mieli co najmniej jedną zakończoną wizytę po rozpoczęciu badania., Do oceny ogólnego istotności statystycznej pierwszorzędowych i drugorzędowych punktów końcowych wykorzystano analizę kowariancji (ANCOVA), która obejmowała suplementację jako stały czynnik oraz odpowiadającą jej wartość początkową badanej zmiennej jako kowariancji. Po ANCOVA, test wielokrotnego porównywania Tukeya-Kramera został użyty do określenia parami istotności statystycznej i obliczenia 95% przedziałów ufności. Przeprowadzono również analizę pierwszorzędowego punktu końcowego metodą mixed model repeated measures (MMRM) w celu uwzględnienia wielu ocen uzyskanych w trakcie tego badania., Ponadto do obliczenia przyrostowego pola pod krzywą (iAUC) dla wszystkich badanych grup zastosowano metodę trapezoidów. W przypadku estymacji iAUC brakujące wartości zostały przypisane za pomocą algorytmu maksymalizacji oczekiwań w SAS. Użycie leków ratunkowych pomiędzy grupami porównano z wykorzystaniem regresji logistycznej, a następnie porównano pary z użyciem testu Tukey-Kramera. Ponadto przeprowadzono warstwową analizę pierwszorzędowego punktu końcowego zgodnie z wyjściowymi poziomami COMP w surowicy powyżej i poniżej mediany wartości dla tego biomarkera., Różnice uznano za znaczące, jeśli wynikowa wartość p wynosiła ≤0,05. Niezależny statystyk przeprowadził analizy i inne obliczenia przy użyciu SAS w wersji 9.3 (Cary, NC).