Leukocyty

leukocyty białokrwinkowewierają 1% całkowitej objętości krwi i odgrywają ważną rolę w ochronie organizmu przed czynnikami zakaźnymi (wirusami, bakteriami itp.), obcymi wirusami i zakażonymi lub nowotworowymi komórkami.,

białe krwinki dzielą się na dwie główne grupy, do których należą granulocyty (neutrofile, eozynofile, bazofile i komórki tuczne) i leukocyty jednojądrzaste (limfocyty, monocyty, makrofagi i komórki dendrytyczne). Różne typy są wyspecjalizowane w reagowaniu na czynniki zakaźne lub obcych najeźdźców w określony sposób, dzięki czemu zapobiegają dalszemu rozprzestrzenianiu się i infekcji.,

mikroskopia

biorąc pod uwagę, że wszystkie białe krwinki mają średnicę powyżej 5 mikrometrów, są wystarczająco duże, aby można je było zobaczyć przy użyciu typowego mikroskopu optycznego (mikroskopu złożonego).

zabarwienie plamą Leiszmana pozwala nie tylko łatwo zidentyfikować różne typy leukocytów, ale także policzyć je. To sprawia, że jest to jedna z najbardziej idealnych plam dla zróżnicowanej liczby białych krwinek.,

* plama Leishmana jest plamą Romanowską, która zawiera eozynę i błękit metylenowy rozpuszczone w metanolu.,w celu rozcieńczenia plamy należy odstawić na około 10 minut

przemyć prowadnicę wodą destylowaną lub z kranu przez około 1 minutę (aż rozmaz zmieni kolor na różowy)

umieścić prowadnicę w odpowiedniej pozycji na suchym stojaku i pozostawić do wyschnięcia (użyć bibułki aby wyczyścić tył i boki suwaka)

wyświetl suwak pod themicroscope zaczynając od małej mocy

* użyj Immersion oleju dla dużych powiększeń.,

granulocyty

rozmaz pod mikroskopem pokaże różne typy leukocytów, a także krwinek czerwonych. Uczniowie będą mogli różnicować białe krwinki na podstawie ich kształtu i jądra.

neutrofile – patrząc pod mikroskopem, neutrofile mają kulisty kształt z ciemnym zabarwionym jądrem, które jest segmentowane (płaty 2-5)., Bliższe spojrzenie ujawni również drobne granulki (granulki neutrofilowe) i cienkie nici łączące płaty jądra (nici chromatynowe)

* neutrofile często reagują na infekcję. Śmierć wielu neutrofili tworzą ropę.

eozynofile – w porównaniu z neutrofilami, które mogą mieć od 2 do 5 jąder, eozynofile mają tylko bi-lobed (dwa płaty) jądro, które jesthaped jak but konia. Pojawiają się również kuliste kształty z drobnymi granulkami określanymi jako acydofilne granulki refrakcyjne.,

bazofile – w porównaniu do innych granulocytów, bazofile mają duże i nieregularne jądro, które znajduje się wewnątrz komórki o kulistym kształcie. Podczas gdy jądro innych granulocytów jest dobrze zdefiniowane i może być jasno opisane, jądro bazofila (niebieskawe pod mikroskopem) jest duże i nieregularne wewnątrz komórki i może okazać się trudne do opisania przez uczniów.

* bazofile są odpowiedzialne za rozszerzenie naczyń w przebiegu stanów zapalnych.,

komórki tuczne – jeśli są obecne, komórki tuczne są kuliste z dużym jądrem centralnym i większą ilością granulek w porównaniu z bazofilami.

neutrofile, eozynofile,bazofile i komórki tuczne to granulocyty. Obecność granulek w tych komórkach odróżnia je od agranulocytów, które nie mają granulek.,

agranulocyty

limfocyty – chociaż są mniejsze w porównaniu do innych leukocytów, limfocyty mają duże okrągłe jądro, które zajmuje znaczną część objętości komórki. W rezultacie limfocyty mają bardzo mało lub nie mają cytoplazmy.,

* istnieją dwa typy limfocytów: limfocyty B(komórki, które wytwarzają przeciwciała, aby zniszczyć obcych najeźdźców) i limfocyty T(odpowiedzialne za zniszczenie zakażonych i nowotworowych komórek)

monocyty-w porównaniu do limfocyty (leukocyty agranularne) monocyty są większe z jądrem o kształcie fasoli lub nerki. Komórki te mają również więcej cytoplazmy w porównaniu do limfocytów.,

liczba białych krwinek

liczenie białych krwinek ma duże znaczenie kliniczne, ponieważ przyczynia się do diagnozowania różnych chorób. Można to osiągnąć ręcznie lub automatycznie.

Ręczna liczba białych krwinek

Ręczna liczba białych krwinek została pokazana, aby mieć kilka wad, które obejmują podatność na błędy i jest czasochłonne.,

w tej metodzie uczniowie mogą policzyć komórki na rozmazie krwi (szkiełku) lub za pomocą hemocytometru zamontowanego na mikroskopie złożonym. W przypadku rozmazów whitecells są po prostu liczone przez skanowanie kilku regionów rozmazu. Tutaj uczniowie mogą policzyć liczbę różnych rodzajów białych krwinek na różnych regionach i obliczyć całkowity odsetek każdego typu leukocytów.,

przykład:

jeśli uczeń policzy w sumie 4 monocyty z dwóch regionów i łącznie 8 białych krwinek (wszystkie zliczone białe krwinki), to staje się możliwe uzyskanie procentu dostępne monocyty; (4/8)*100 = 50%

oprócz rozmazu krwi można również zastosować hemocytometr. Hemocytometr to specjalna komora licząca z kwadratowymi obszarami ułatwiającymi liczenie komórek.,

podczas gdy komora jest podzielona na 9 kwadratowych obszarów, tylko 4 (w czterech rogach komory) z nich są używane do liczenia białych krwinek. W przypadku tej metody, siatka jestprzeszukiwana dla białych krwinek, które są identyfikowane i liczone w celu obliczenia ich odpowiedzialnej wartości procentowej.

* chociaż możliwe jest bezpośrednie zliczanie białych ciałek pod mikroskopem, uczniowie mogą również przechwytywać obrazy za pomocą aparatu cyfrowego i skanować je, aby policzyć liczby białych ciałek.,

automatyczne liczenie

w przypadku ręcznego liczenia pojawiają się nieścisłości spowodowane błędami liczenia (błąd ludzki) oraz faktem, że białe krwinki mogą nie być równomiernie rozłożone w rozmazie. Problemy te są rozwiązywane za pomocą flowcytometry.

w przypadku tej techniki krwinki czerwone muszą być usuwane z krwi, ponieważ są zanieczyszczeniami. Osiąga się to za pomocą roztworów chlorku amonu do lizowania krwinek czerwonych., Aby oczyścić agranulocytestylko (komórki jednojądrzaste krwi obwodowej – PBMC) studenci mogą skorzystać z procedury densitygradient, która może obejmować stosowanie Ficoll-Paque PLUS lubhistopaque-1077. Nie jest to jednak obowiązkowe.

* izolacja i oczyszczanie PBMC obejmuje mieszanie roztworu z próbką krwi, oddzielanie komórek za pomocą centryfuge i mycie komórek za pomocą PBS.,

aby policzyć liczbę białych krwinek, przez detektory elektroniczne przepływa zawiesina komórek w celu określenia różnych właściwości wykrywanych, umożliwiając w ten sposób liczenie różnych rodzajów białych krwinek.

tutaj zawiesina jest wykonana w celu wytworzenia przepływu laminarnego, który umożliwia poszczególnym komórkom przejście przez punkt przesłuchu.

komórki są odbierane przez wiązkę światła monochromatycznego w punkcie przesłuchań, która pozwala na emitowanie światła w różnych kierunkach., Światło emituje następnie znaki, które są zbierane i analizowane, aby dać odczyty.

* chociaż jest to bardziej niezawodna technika polegająca na zatrzymywaniu białych krwinek, ma ona wadę polegającą na tym, że nie można określić kształtu ani morfologii komórek. Z tego powodu nie jest możliwe ustalenie, czy komórki są uszkodzone, czy nie.,

u zdrowego człowieka dorosłego prawidłowa liczba białych krwinek waha się od około 4500 do 11 000 komórek na mikro litr krwi. Jednak liczba różnych rodzajów białych krwinek jest różna., mikro litr krwi

bazofile – stanowią mniej niż 3 procent całkowitych leukocytów i mogą wynosić do około 300 komórek na mikro litr krwi

monocyty – stanowią mniej niż 10% wszystkich leukocytów i mieszczą się w przedziale od 200 do 600 komórek na mikro litr krwi

wysokie/niskie leukocyty

liczby/liczba z tych leukocytów mogą się zmienićw coraz większym stopniu (nienormalnie) wysokie lub niskie liczby., W warunkach klinicznych, tojest wskazaniem, że coś jest nie tak i może pomóc w diagnozie.

neutrofile – wysoki poziom neutrofilów (neutrofilicleukocytoza) wskazuje na zakażenie, stan zapalny lub konkretnytyp białaczki. Rażąco mała liczba neutrofilów (Neutropenia) z drugiej strony jest związane z zaburzeniami szpiku kostnego, leczenie raka, jak również zaburzenia autoimmunologiczne.,

monocyty-nienormalnie wysoka liczba monocytów (monocytoza) jest związana z niektórymi nowotworami, autoimmunologiami, a także przewlekłymi infekcjami. Rażąco niska (monocytopenia) liczy z drugiej strony są związane z infekcjami wirusowymi,niektóre wrodzone zaburzenia i choroby autoimmunologiczne, jak również niektóreantybiotyki.,

limfocyty – nienormalnie wysoki poziom limfocytów jest znany jako leukocytoza limfocytowa i jest związana z żywymi infekcjami wirusowymi i bakteryjnymi, a także z podawanymi chłoniakami i nowotworami. Nieprawidłowa liczba krwinek lub limfocytopenia jest związana m.in. z takimi infekcjami wirusowymi jak HIV, złym odżywianiem, a także chorobami autoimmunologicznymi.,

bazofile – stwierdzono bardzo wysoki poziom bazofili we krwi wśród osób z takimi schorzeniami jak niedoczynność tarczycy wśród innych infekcji i nowotworów, podczas gdy bardzo mała liczba jest związana z przypadkami białaczki, infekcji, nadczynności tarczycy i innych reakcji nadwrażliwości w organizmie.,

eozynofile – nienormalnie wysokie eozynofile (hypereosinophila) zostały połączone z szeregiem reakcji, takich jak reakcje pasożytnicze, alergeny i astmy. Biorąc pod uwagę, że liczba eozynofilów może być zwykle bardzo niska (aż do zera), nie jest to uważane za problem.,

Analiza mikroskopowa moczu (leukocyty)

analiza moczu za pomocą mikroskopu mogą być stosowane w celu określenia obecności białych krwinek, co pomaga w diagnozowaniu różnych chorób.,

Requirements

Urine sample
A centrifuge
Glass slide

Procedure

Shake a test-tubecontaining urine and centrifuge at low speeds (2-3,000 rpm) for about 5 minutes
Decant the supernatant, butretain a small amount in the test-tube (0.,f1dff”>potrząśnij probówką, aby osadzić osad w pozostałym supernatancie
umieść kroplę zawiesiny na szklanym szkiełku i przykryj pokrywą

zbadaj ślizgać się pod temikroskopem, zaczynając od małej mocy, a na dużej mocy

zobacz więcej na temat analizy moczu tutaj

obserwacja

przy mniejszym powiększeniu uczniowie mogą zobaczyć wiele obiektów, w tym kryształy i odlewy., Jednak przy dużej mocy uczniowie mogą zobaczyć pewną liczbę leukocytów.

w moczu obecność dużej liczby leukocytów jest określana jako ropomocz, co wskazuje na zakażenie dróg moczowych lub nerek. W większości przypadków leukocyty obecne w moczu sągranulocyty, które można zidentyfikować ze względu na ich lobed jądra igranules.

* z powodu braku zabarwienia leukocyty w moczu mogą wydawać się przezroczyste, co utrudnia niektórym uczniom ich identyfikację.,

ruch i funkcja

neutrofile – neutrofile są nie tylko pierwszą linią obrony,ale także najliczniejszymi leukocytami. Po uwolnieniu krążą około 10 godzin we krwi i mogą pozostać aktywne do 6 dni.

mogą identyfikować inwazyjne organizmy, takie jak bakterie, poprzez chemotaksję i poruszać się w ich kierunku szybko, używając rodzaju ruchu określanego jako amoeboidmotion., Pod mikroskopem elektronowym neutrofile wyglądają, jakby ścigały atakujący organizm, gdy pełzają wśród czerwonych krwinek. Po dotarciu do organizmu, pochłaniają i niszczą obcy organizm (bakterie) w procesie określanym jako fagocytoza.

eozynofile – w tkankach migracja eozynofili jest kontrolowana przez eotaksynę-1 (chemoattractant białkowy)., Tutaj jego migracja obejmuje takie czynności jak toczenie, przyleganie, a także astransmigracja przez śródbłonek. Procesy te umożliwiają migrację komórek do określonych miejsc, w których biorą udział w alergii.

bazofile – bazofile migrują do tkanek barierowych, gdzie uwalniają zapalne substancje chemiczne (histamina itp.), które z kolei mają takie efekty jak rozszerzenie naczyń krwionośnych i zwężenie mięśni gładkich.Efekty te skutkują takimi skutkami, jak obniżenie ciśnienia krwi.,

bazofile odgrywają również ważną rolę w zapaleniach alergicznych, uwalniając prozapalne substancje chemiczne, takie jak leukotrieny cysteinylowe.

aby dotrzeć do tkanki zapalnej, bazofiluzastosować trzy główne procesy,które obejmują przyleganie do śródbłonka naczyniowego, migrację przezbłonową, a także poruszanie się przez dodatkowe naczynia krwionośne. Cytokiny aktywujące również odgrywają ważną rolę w losowym ruchu komórek, w których przemieszczają się do miejsca poprzez chemokinezę.,

monocyty-w normalnych warunkach monocyty wykorzystują adhezję do przemieszczania się.Monocyty wykorzystują takie cząsteczki adhezyjne jak integryna α4β1 (VLA-4) i ß2integryny, aby przylegać do śródbłonka naczyniowego i docierać do miejsc docelowych.

w węzłach śródbłonka monocyty ściskają się między przylegającymi komórkami poprzez diapedezę, aby przejść pomimo ich dużych rozmiarów w porównaniu z innymi leukocytami.Monocyty niszczą inwazyjne organizmy, takie jak bakterie i inne zarazki, tworząc z nich makrofagi.,

I tak są zdolne do przekształcania komórek dendrytycznych, w których przetwarzają materiał antygenowy. Dzięki temu przeciwciała mogą identyfikować organizmy szkodliwe, jak je niszczą.

limfocyty – istnieją dwa rodzaje limfocytów; limfocyty Tlymphocyty i limfocyty B. Limfocyty T (limfocyty T) stanowią większośćlymfocyty (80 procent) i są produkowane w grasicy. Ich główną rolązwiązuje się niszczenie uszkodzonych lub zainfekowanych komórek. Ponadto, komórki B odgrywają ważną rolę produkcjiprzeciwciała, które celują i niszczą swoisty antygen.,

chociaż mechanizm jest już w pełni poznany, badania wykazały, że chemokiny odgrywają ważną rolę w adhezji i transendotelicznej migracji niektórych limfocytów.

Co to są wirusy?,

Leukocyty – rodzaje, obserwacje, liczba i analiza moczu

leukocyty