laboratorium mikrobiologiczne niom jest zatwierdzone jako laboratorium klasy 2 przez Norweskie Ministerstwo Zdrowia i jest zatwierdzone do pracy z zawartymi GMM (mikroorganizmy zmodyfikowane genetycznie). Laboratorium jest wyposażone w urządzenia do badań antybakteryjnych i wzrostu biofilmu na powierzchniach materiałów.
Biofilm jest uprawiany na biomateriale w studniach mikrotiterowych lub w reaktorze biofilmu. Związki antybakteryjne mogą być wbudowywane lub pokrywane na powierzchni biomateriału., Różne techniki są używane do badania ich wpływu na tworzenie i wzrost biofilmu. Ilość biofilmu można określić ilościowo po barwieniu safraniny, a także wizualizować za pomocą mikroskopii elektronowej. Żywotność biofilmu można określić za pomocą żywego / martwego barwienia i mikroskopii fluorescencyjnej / konfokalnej, testu resazuryny, testu XTT lub za pomocą liczenia żywotności po odłączeniu biofilmu, a następnie poszycia na płytkach agarowych składników odżywczych.
metoda Colony Forming Unit (CFU) może być stosowana do identyfikacji mikroorganizmów oraz do badania wpływu substancji i technik przeciwdrobnoustrojowych., Jest to wrażliwa i powszechnie akceptowana metoda w mikrobiologii. W metodzie tej liczba żywych komórek (komórek zdolnych do reprodukcji) obecnych w zawiesinie jest liczona na powierzchni agaru odżywczego.
komórki bakterii są zbierane i rozproszone w nietoksycznym roztworze, takim jak buforowany fosforanem roztwór soli fizjologicznej lub woda fizjologiczna. Zawiesina komórkowa jest następnie rozcieńczana, zwykle w serii o 10-krotnym rozcieńczeniu, w celu uzyskania płytek z policzalną liczbą bakterii., Pewna ilość z każdego rozcieńczenia jest platerowana, w replikatach po 3 lub 4, na płytkach Petriego agarem odżywczym przeznaczonym dla przedmiotowych bakterii. Szalki Petriego są inkubowane w odpowiednich środowiskach i przez odpowiedni czas, zanim kolonie zostaną policzone. Każda Kolonia, która może być policzona, nazywana jest jednostką formowania Kolonii (CFU), a liczba CFU jest związana z żywotną liczbą bakterii w próbce. Liczba bakterii w próbce pierwotnej jest obliczana matematycznie, biorąc pod uwagę ilość platerowaną i jej współczynnik rozcieńczenia., Wyniki są często przedstawiane jako CFU / ml (jednostki tworzące kolonię na mililitr) dla cieczy i CFU / g (jednostki tworzące kolonię na gram) dla ciał stałych.
technika powlekania spiralnego
tradycyjna metoda z rozcieńczaniem i powlekaniem jest czasochłonna, dlatego liczba zmiennych w badaniu może być ograniczona. Laboratorium mikrobiologiczne NIOM wykorzystuje zatem technikę spiralnego powlekania, w którym instrument, spirala OSA PLATER (Rysunek 1), odkłada określoną objętość próbki na obracającą się płytkę agarową.,
objętość próbki zdeponowanej na jednostkę powierzchni płytki zmniejsza się w całej spirali, powodując efekt rozcieńczenia i umożliwiając zliczanie izolowanych Kolonii (Rysunek 2) w odpowiednich sektorach o znanej objętości osadzania.
do liczenia bakterii NIOM wykorzystuje zautomatyzowany licznik Kolonii, a wyniki są przesyłane bezpośrednio do programu Excel w celu dalszej analizy.