Onderzoek producten
De studie product UC-II® (Veel 1204004) is afgeleid van kip borstbeen., Het werd vervaardigd onder de huidige good manufacturing practice (cGMP) omstandigheden met behulp van een gepatenteerd proces dat zijn inheemse structuur (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Zowel glucosamine hydrochloride (GH) als chondroitinesulfaat (CS) werden gekocht via Wilke middelen (Lenexa, KS). De Wellable group (Shishi City, Fujian) vervaardigde GH onder cGMP en volgens de United States Pharmacopeia 26-SPECIFICATIES. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) vervaardigd van van runderen afkomstige CS onder cGMP., UC-II en GC werden ingekapseld in ondoorzichtige, maat “00” capsules met voldoende hoeveelheden hulpstoffen (microkristallijne cellulose en siliciumdioxide) zodat ze sensorisch identiek waren aan placebo. InterHealth Nutraceuticals verstrekt alle studiemateriaal. All American Pharmaceutical (Billings, MT) geverifieerd de hoeveelheid actieve ingrediënten in de studie capsules. Studiemateriaal werd bewaard in een beveiligde kast met toegang beperkt tot de site coördinator, de apotheker en de hoofdonderzoeker.,
onderzoeksopzet
Het doel van dit gerandomiseerde, dubbelblinde, placebogecontroleerde klinische onderzoek was het evalueren van het vermogen van UC-II om kniesymptomen bij patiënten met artrose te verbeteren, gemeten aan de hand van de totale Womac-score, vergeleken met placebo en met GC. Het proces werd uitgevoerd in 13 centra in Zuid-India. Vanwege een beperking in synoviale vloeistofbemonsteringsprocedures op meerdere klinische plaatsen, werd het onderzoek uitgevoerd volgens twee afzonderlijke onderzoeksprotocollen., De studieprotocollen werden goedgekeurd door de Institutional Ethics Committee (IEC) van elk centrum, en vermeld op de clinical trial registry of India als studieprotocollen 003663 en 003348. Registratie, Randomisatie en follow-upbezoeken waren identiek voor beide protocollen en werden uitgevoerd op dag 1 (baseline).), 7, 30, 60, 90, 120, 150 en 180 (Tabel 1). Alle onderzoekers woonden dezelfde onderzoeksvergaderingen bij, gebruikten identieke intake-en datarapporteringsformulieren en werden getraind en gemonitord door dezelfde groep van klinische onderzoekspartners.,
Werkzaamheidsmetingen werden bij alle bezoeken beoordeeld en omvatten Womac -, VAS-en LFI-indices. De knie flexie range of motion (ROM) test werd uitgevoerd bij elk bezoek. Bij alle bezoeken, met uitzondering van dag 180, werden dagboeken en studieproducten verstrekt en bij alle follow-upbezoeken verzameld., Proefpersonen werden geïnstrueerd om dagelijks de consumptie van studieproduct, het gebruik van noodmedicatie en gelijktijdige medicatie in de zuivel van de proefpersoon te registreren gedurende de gehele duur van de studie. Bloed en urine werden verzameld op screening en dag 180. Zwangerschapstesten werden uitgevoerd bij screening en follow-upbezoeken. Bijwerkingen werden geregistreerd aan de hand van de dagboekinvoer van elke proefpersoon plus vragenlijsten voor bezoeken ter plaatse die door het intakepersoneel tijdens alle studiebezoeken werden toegediend.,
klinische eindpunten
het primaire eindpunt werd gedefinieerd als de verandering in de totale Womac score vanaf baseline tot dag 180 voor de UC-II-groep versus placebo en GC. Secundaire klinische eindpunten voor beide protocollen waren vergelijkbaar en omvatten de verandering vanaf baseline tot en met dag 180 versus placebo en GC voor alle eindpunten, waaronder de volgende scores: (1) Gemiddelde VAS; (2) Gemiddelde Womac subschalen; (3) LFI; en (4) knieflexie. Een ander eindpunt was de verandering van baseline tot dag 180 voor het serumbiomarkerkraakbeenoligomeric matrix proteïne (COMP)., In protocol 003348 omvatten aanvullende secundaire eindpunten de verandering in serumbiomerker, C-reactief eiwit (CRP) plus synoviale vloeibare biomarkers interleukine (IL)-6 en matrixmetalloproteïnase (MMP)-3 vanaf baseline tot dag 180.
proefpersonen
in totaal werden 234 proefpersonen gescreend en 191 gerandomiseerd (Fig. 1). De inclusiecriteria voor de studie waren 40-75 jaar oude mannelijke en vrouwelijke proefpersonen, een body-mass index (BMI) van 18-30 kg/m2, matige tot ernstige OA door lichamelijk onderzoek (crepitus, benige vergrotingen, gewrichtszwelling, enz.,) in één of beide knieën, kniepijn gedurende ten minste 3 maanden voorafgaand aan de start van het onderzoek, een LFI-score tussen 6 en 10 en een VAS-score van 40-70 mm 7 dagen na het stoppen met uitgesloten medicijnen, plus een knieradiografie die werd geclassificeerd als Kellgren en Lawrence (K-L) radiograph score van 2 of 3 . Alle diagnoses van OA werden bevestigd door elke onderzoeker op de studieplaats en genoteerd in het case report form (CRF) van de proefpersoon. In het geval van bilaterale kniebetrokkenheid was de voor het onderzoek gebruikte indexknie degene met de ernstigste symptomen van artrose bij aanvang., Gedetailleerde inclusie-uitsluitingscriteria zijn samengevat in Tabel 2.
Inschrijving en randomisatie flow chart
Ethiek, toestemming en rechten
Onderwerpen die werden aangeworven na ze bekeken, begrepen de details van het onderzoek, en vervolgens ondertekend de IEC-goedgekeurd toestemmingsformulier., De studie kwam overeen met de Verklaring van Helsinki (versie 1996).
randomisatie & blinding
blok randomisatie, bestaande uit negen individuen per blok, werd uitgevoerd in een 1:1:1 verhouding met behulp van willekeurige getallen gegenereerd door een onafhankelijke statisticus (SPSS versie 16.0). De kennis van de randomisatiecode was beperkt tot de statisticus plus één QA-monitor die geen verband hield met het onderzoek., Elke onderzoeker kreeg ondoorzichtige, verzegelde enveloppen met individuele identiteitsnummers, randomisatiecodes en suppletieschema dat in geval van nood moest worden geopend. De code werd verbroken nadat de klinische database was vergrendeld.
doseringsschema
proefpersonen namen ‘ s ochtends twee blauwe pillen in bij het ontbijt en twee witte capsules voor het slapen gaan. Voor het UC-II-cohort waren de twee ochtendcapsules placebo, terwijl de avondcapsules elk 20 mg UC-II bevatten in totaal 40 mg, wat identiek is aan eerder gebruikte klinische dosisniveaus . Deze dosis leverde 1.,2 mg niet-gedenatureerd type II-collageen, bepaald volgens een nieuw ontwikkeld en gevalideerd extractie-ELISA-protocol (Aibiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). Voor de GC-groep leverden de ochtend-en avonddoses 750 mg GH plus 600 mg CS, elk met een dagelijkse dosis van 1.500 mg GH plus 1.200 mg CS. De placebogroep nam identieke aantallen blauwe en witte capsules in die alleen hulpstoffen bevatten. Studieflessen werden geëtiketteerd volgens ICH-GCP en toepasselijke lokale regelgeving richtlijnen.,
eerdere en gelijktijdige behandelingen
eerdere geneesmiddelen werden gedocumenteerd tijdens het screeningsbezoek door de onderzoeker van de studie. Bij elk bezoek beoordeelde het onderzoekspersoneel de dagboeken van de proefpersonen en ondervroeg elke deelnemer over het gebruik van eventuele gelijktijdig toegediende geneesmiddelen, inclusief die op de verboden lijst. Verboden medicijnen opgenomen ibuprofen, aspirine, andere NSAID ‘ s, of andere pijnstillers (OTC of recept), plus alle voedingssupplementen (met uitzondering van vitaminen) die de gezamenlijke gezondheid kunnen ondersteunen., Alle gelijktijdig gebruikte geneesmiddelen tijdens de studie werden gedocumenteerd in het medisch dossier van de proefpersoon door de onderzoeker vervolgens getranscribeerd in hun CRF door het onderzoekspersoneel.
Rescue medicatie
Paracetamol werd toegestaan bij een dosis van 500 mg tweemaal daags. Deelnemers werden geïnstrueerd om dit medicijn niet te nemen binnen 48 uur na een evaluatiebezoek. Het gebruiksniveau en de timing werden bij elk bezoek door de onderzoeker in het medisch dossier van de proefpersoon ingevoerd. Het onderzoekspersoneel heeft deze informatie getranscribeerd naar het CRF van de proefpersoon.,
Compliance en veiligheid
proefpersonen kregen de instructie hun flessen bij elk bezoek mee te nemen. De resterende capsules werden geteld en geregistreerd in het CRF-en accountability-logboek van de proefpersoon. Als secundaire graadmeter voor de naleving voltooiden de proefpersonen een dagboek waarin de dagelijkse dosering van de onderzoeksproducten werd aangegeven. Bij alle bezoeken door de onderzoeker en het personeel ter plaatse werden veiligheidsbeoordelingen uitgevoerd (zie Tabel 9).
Onderzoeksevaluaties
Womac-scores werden bepaald met behulp van de Womac VA3.,1 vragenlijst met 24 items gegroepeerd in drie categorieën: pijn, stijfheid en fysieke functie (score bereik 0-2400). Elke respectievelijke Womac subschaal gemiddelde scores werd bepaald door de subschaal score te delen door het aantal vragen (5, pijn; 2, stijfheid; 17, fysieke functie) het bevatte. De gemiddelde VAS-score werd bepaald aan de hand van een vas-vragenlijst met 7 pijngerelateerde vragen (score bereik 0-700), en vervolgens de totale score door zeven te delen., De LFI-score werd bepaald aan de hand van een LFI-vragenlijst waarin pijn, loopafstand en activiteiten van het dagelijks leven werden beoordeeld (score bereik 0-24). De flexie van de knie werd gemeten met behulp van de goniometrie waarbij de proefpersoon in de buigpositie lag en het te testen been langs de rand van de tafel werd geplaatst .
biomarkers voor synoviale vloeistof
synoviale vloeistof (~0,5 mL) werd opgezogen uit het kniegewricht met een geschikte naald (18-24 gauge, afhankelijk van de gewrichtsgrootte). De geoogste vloeistof werd bevroren opgeslagen tot ze werd getest., De IL-6-en MMP-3-niveaus werden bepaald met behulp van de overeenkomstige Elisa-kits (R&D-systemen, Minneapolis, MN).
serumbiomarkers
COMP-niveaus (Quantikine ELISA, R&D-systemen) werden bepaald in beide studieprotocollen. CRP-spiegels (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) werden beoordeeld in protocol 003348. Het Serum werd bevroren bewaard tot het werd geanalyseerd. Interassay-en intrassay-variatiecoëfficiënten voor COMP en CRP waren <5 %.,
statistieken
aan de hand van een tweeweg-variantieanalyse (ANOVA) hebben we geverifieerd dat de resultaten van de twee protocollen konden worden gecombineerd in één analyse door aan te tonen dat er geen interactie per groep was en dat de omvang van de werkzaamheid die werd waargenomen onder de twee protocollen vergelijkbaar was.
een modified intent-to-treat (mITT) – analyse werd gebruikt om de a priori gedefinieerde werkzaamheids-en veiligheidsresultaten te beoordelen. Dit omvatte alle proefpersonen die gerandomiseerd waren, het studieproduct geconsumeerd hadden en ten minste één voltooid post-baseline bezoek hadden gehad., Een analyse van covariantie (ANCOVA), met suppletie als vaste factor en de overeenkomstige uitgangswaarde van de variabele die als covariabele werd getest, werd gebruikt om de algemene statistische significantie van de primaire en secundaire eindpunten te beoordelen. Na ANCOVA werd de Tukey-Kramer multiple comparison test gebruikt voor het bepalen van de paarsgewijze statistische significantie en het berekenen van 95% betrouwbaarheidsintervallen. Ook werd een mixed model repeated measures (MMRM) analyse van het primaire eindpunt uitgevoerd om rekening te houden met de meervoudige beoordelingen die tijdens deze studie werden verkregen., Daarnaast werd de methode van trapezoïden gebruikt om de incrementele oppervlakte onder de curve (iAUC) te berekenen voor alle studiegroepen. Voor iauc schatting, ontbrekende waarden werden toegerekend met behulp van de verwachting-maximalisatie algoritme in SAS. Rescue medicatie gebruik tussen groepen werd vergeleken met behulp van logistieke regressie gevolgd door paarsgewijze vergelijkingen met behulp van de Tukey-Kramer test. Daarnaast werd een gestratificeerde analyse van het primaire eindpunt uitgevoerd volgens baseline serum COMP spiegels boven en onder de mediane waarde voor deze biomarker., Verschillen werden significant geacht als de resulterende p-waarde ≤0,05 was. Een onafhankelijke statisticus voerde de analyses en andere berekeningen uit met behulp van Sas versie 9.3 (Cary, NC).