Abstrakt
det er Lite informasjon som finnes om association of anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 med systemisk lupus erytematosus (SLE) funksjoner. I dette arbeidet, har vi analysert sammenslutninger av både anti-Ro reactivities med kliniske og immunologiske manifestasjoner i 141 SLE-pasienter. Fotosensitivitet og xerophtalmia/xerostomia ble funnet å være positivt assosiert med både anti-SSA/Ro60 ( og , resp.) og anti-Ro52/TRIM21 ( og , resp.)., I motsetning til en negativ assosiasjon ble oppdaget om anti-fosfolipid antistoff, anti-SSA/Ro60 å ha en sterkere effekt () enn anti-Ro52/TRIM21. Anti-SSA/Ro60 viste en bestemt positiv sammenheng med hypocomplementemia (), hovedsakelig med lave C4 nivåer (), mens anti-Ro52/TRIM21 ble funnet å være positivt assosiert med raynauds fenomen () og cytopenia () og negativt assosiert med anti-dsDNA (). Lymfocytter er involvert i forholdet mellom anti-Ro52/TRIM21 og cytopenia siden positive pasienter viste lavere celle nivåer enn negative pasienter ()., I konklusjonen, anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 viste både felles og spesifikke assosiasjoner i SLE. Disse data og dermed øke bevis for de ulike assosiasjoner av to anti-Ro spesifisiteter selv i en bestemt sykdom.
1. Innledning
Anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 er blant de mest oppdaget autoantistoffer i rutinemessig screening for systemiske autoimmune sykdommer., Selv om både antistoff reactivities ble ansett å utgjøre en del av anti-Ro-systemet for lang tid, nå er det klart slått fast at deres antigener er forskjellige, ikke inngår som en del av en stabil macromolecular komplekse, og er lokalisert i ulike mobile avdelinger (anmeldt i ). Videre, anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 antistoffer har også vært forbundet med et annet mønster av kliniske manifestasjoner., Dermed, tilstedeværelse anti-SSA/Ro60 er knyttet til autoimmune prosesser, hovedsakelig systemisk lupus erythematosus (SLE) og sjøgrens syndrom (SS), mens anti-Ro52/TRIM21 viser et bredere spekter av sykdom foreninger . De viktigste kliniske autoimmune foretak som er forbundet med anti-Ro52/TRIM21 er SS, systemisk sklerose (SSc), lever autoimmune sykdommer, og, spesielt, myositt, der det har vært ansett som en uavhengig markør . Også, anti-Ro52/TRIM21 har blitt oppdaget i nonautoimmune forhold, slik som infeksjoner og neoplastiske sykdommer ., Videre, ulike foreninger med spesifikke kliniske manifestasjoner har også blitt rapportert, spesielt for anti-Ro52/TRIM21. Faktisk, denne anti-Ro reaktivitet er sterkt assosiert med medfødt hjerteblokk i neonatal lupus og med interstitiell lungesykdom . Anti-Ro52/TRIM21 har også vært knyttet til en mer alvorlig sykdom i SS, myositt, primær biliær cirrhose, og autoimmun hepatitt .
Blant systemiske autoimmune sykdommer, SLE viser en bestemt anti-Ro-antistoff mønster., Derfor, selv om samtidige reaktivitet er mer hyppige antistoff mønster, denne sykdommen viser den høyeste prevalensen av isolert anti-SSA/Ro60 . I SLE, antistoffer mot Ro systemet historisk har vært forbundet med fotosensitivitet, men det er lite informasjon som finnes om foreningen av både anti-Ro reactivities med andre kliniske manifestasjoner ., Derfor, med denne bakgrunnen i tankene, er målet med dette arbeidet var å analysere om anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 antistoffer er differentially forbundet med de kliniske kriteriene for klassifisering og andre hyppige manifestasjoner av SLE.
2. Pasienter og Metoder
2.1. Pasienter, Sera Utvalget, og Analysert Funksjoner
Sera fra 141 SLE-pasienter (131 kvinner, mean alder ved diagnose 36.7 ± 14.5 år) som oppfylte American College of Rheumatology (ACR) kriterier ble valgt for denne studien ., Disse pasientene ble fulgt opp i indremedisin Autoimmun Sykdom Enhet, Hospital Universitario Central de Asturias, og deres kliniske og immunologiske funksjoner ble registrert i en database av SLE pasienter er etablert i vår region fra 2004, som er jevnlig oppdatert . Har registrert i denne databasen inkludert ACR-kriteriene for klassifisering og andre relaterte SLE manifestasjoner eller immunologiske parametre. I dette arbeidet, alle funksjoner unntatt cytopenia ble tilsammen registrert., Cytopenia ble vurdert på diagnose for å unngå påvirkning av behandling på haematological parametere. Bare de funksjonene som prevalensen var høyere enn 10% var statistisk analysert. Spesielt har inkludert i analysen var ACR-kriteriene for klassifisering, nonscarring alopecia, xerophthalmia/xerostomia, raynauds fenomen, og hypocomplementemia. Alle kriteriene for klassifisering ble definert som angitt i 1996 ACR-kriteriene med unntak av nevrologiske lidelser., I denne SLE manifestasjon, organic brain syndrome, synsforstyrrelser, og perifer og kraniale nerve sykdom, ble også vurdert ved siden av beslag og psykose. Hypocomplementemia ble definert som det å ha lav C3 og/eller C4 nivåer (<0,8 mg/dL og <0.15 mg/dL, resp.).
Sera tilsvarende til ulike pasientens revisjoner ble samlet inn og lagret ved -20°C. Den siste serum fra hver pasient ble valgt for studien (periode på samling fra februar 2007 til Mars 2011). Gjennomsnittsalderen på tidspunktet for analysen var år.
2.2., Fastsettelse av Autoantistoffer, Utfylle, og Haematological Parametere
Bestemmelse av anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 antistoffer i 141 valgt SLE pasienter ble utført av fluoro enzym immunoassay (Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH, Freiburg, Tyskland). Analysen ble utført på en automatisert ImmunoCAP 250 analyser. I alle pasienter, andre SLE ANA spesifisitet (anti-dsDNA, SS-B/La, U1RNP, og Sm) og anticardiolipin (CL) IgG-og IgM-antistoffer ble også samtidig bestemmes med samme metodikk., C3 og C4 nivåene ble målt ved nephelometry (Beckman Coulter Inc. I California, USA).
Nivåer av haematologic parametre, kvantifiseres ved hjelp av en Advia 2120 analyzer (Siemens Healthcare, Erlangen, Tyskland), som var tilgjengelig på den tiden av autoantistoffer bestemmelse i 128 pasienter (119 kvinner; gjennomsnittlig alder ved diagnose og ved analyse og år, resp.). Leukopeni, lymphopenia, og trombocytopeni ble vurdert i henhold til ACR-kriteriene (<4.00 × 103/µL, <1.50 × 103/µL, og <100.00 × 103/µL, resp.,) og blodmangel ble definert av en hemoglobin-konsentrasjon til <11.0 mg/dL hos kvinner og <12.0 mg/dL hos menn.
2.3. Statistiske Analyser
foreningen for tilstedeværelse av anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 med SLE manifestasjoner ble analysert ved binær logistisk regresjon, justert for kjønn og alder ved diagnose og på tidspunktet for analyse., Tidligere tilstedeværelse av både anti-Ro spesifisiteter og anti-dsDNA, SSB/La, RNP, Sm, og CL-antistoffer ble samtidig analysert med fremover stegvis logistisk regresjon prosedyre for å vise sin innflytelse på hver klinisk manifestasjon og immunologiske parametere. Når det er hensiktsmessig, andre autoantistoffer funnet å være statistisk innflytelsesrike var inkludert i det binære logistiske regresjonsanalyser av anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 foreninger. I denne analysen, både anti-Ro reactivities ble inkludert for første gang sammen som uavhengige variabler., For å unngå multicollinearity virkninger forårsaket av det nære forholdet mellom eksisterende begge særtrekk, et antistoff separat analyse ble utført når en ikke statistisk signifikant assosiasjon ble funnet. Odds ratio (ELLER) og 95% konfidensintervall (CI) ble beregnet. Nivåer av utfylle og haematological parametre ble sammenlignet med Student eller Mann-Whitney tester i henhold til data distribusjon. Resultatene ble vurdert som statistisk signifikante når verdien er <0.05. Statistiske analyser ble utført med SPSS 15.,0 statistisk programvare pakke (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
3. Resultater
3.1. Prevalens av Anti-SSA/Ro60 og Anti-Ro52/TRIM21 i SLE-Pasienter
tilstedeværelse av anti-SSA/Ro60 og/eller anti-Ro52/TRIM21 antistoffer som ble påvist i 62 av de 141 SLE pasienter analysert (44.0%). Samtidig reaktivitet var den viktigste observert antistoff mønster, 37 pasienter som er positive for både antistoffer (26.2%). Anti-SSA/Ro60 alene var til stede i 23 (16.3%), mens isolert anti-Ro52/TRIM21 reaktivitet ble bare funnet i to pasienter (1.4%)., Dermed antistoff mønster i denne pasienter » – serien var i overensstemmelse med den etablerte forholdet mellom anti-SSA/Ro60 og SLE og det var ikke assosiert med enten alder ved diagnose eller kjønn forekomst (Tabell 1).
3.2. Sammenslutninger av Anti-SSA/Ro60 og Anti-Ro52/TRIM21 med Kliniske Manifestasjoner i SLE
Når anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 var samtidig er inkludert som uavhengige variabler i regresjonsanalysen, bare betydelig tilknytning fant var cytopenia med anti-Ro52/TRIM21 (Tabell 2)., På grunn av dette funnet, har vi i tillegg analysert forholdet mellom disse autoantistoffer og ulike typer haematologic ACR-kriteriene, og en trend mot en sammenheng mellom anti-Ro52/TRIM21 og leukopeni/lymphopenia ble observert (Tabell 2). Trombocytopeni kan ikke bli analysert siden alle trombocytopenisk pasienter med anti-Ro-antistoffer var positive for både spesifisiteten (4 av 4) verken var haemolytic blodmangel analysert på grunn av det lave antall pasienter (bare fem) med denne blodsykdom.,
på samme måte som cytopenia, muntlig magesår og raynauds fenomen ble også funnet å være positiv, men ikke signifikant, forbundet med anti-Ro52/TRIM21 (Tabell 2). Når anti-Ro52/TRIM21 ble analysert separat, uten å inkludere anti-SSA/Ro60 som andre uavhengige variabelen, bare sammenhengen med raynauds fenomen ble statistisk signifikant (ELLER 2.46, CI 95% 1.11–5.43, ).
Ingen av de øvrige kliniske manifestasjoner viste en signifikant sammenheng med anti-SSA/Ro60 og/eller anti-Ro52/TRIM21 om både antistoffer ble samtidig eller separat analysert.,
3.3. Sammenslutninger av Anti-SSA/Ro60 og Anti-Ro52/TRIM21 med Immunologiske Parametre i SLE
Anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 viste også en annen forening med SLE – relaterte immunologiske parametre. Faktisk, når de to anti-Ro reactivities ble vurdert sammen som uavhengige variabler, en motsatt atferd ble observert om tilstedeværelse av anti-dsDNA-antistoffer og hypocomplementemia, anti-SSA/Ro60 være positivt forbundet og anti-Ro52/TRIM21 negativt assosiert (Tabell 3)., Likevel, det eneste foreninger funnet å være statistisk signifikante, ble det negative forholdet mellom anti-Ro52/TRIM21 og anti-dsDNA-antistoffer og positiv mellom anti-SSA/Ro60, og hypocomplementemia. Både lav C3 og C4-nivå ble funnet å være positivt assosiert med anti-SSA/Ro60 men bare i forbindelse med C4 var statistisk signifikant. Videre nivåer av denne utfylle brøkdel, men ikke for de av C3, var også betydelig lavere i anti-SSA/Ro60 positive pasienter enn i negative pasienter på tidspunktet for autoantistoffer bestemmelse (0.16 ± 0.,06 mg/dL versus mg/dL, og mg/dL versus mg/dL, for, resp., C4 og C3).
På den annen side, antiphospholipid antistoffer ble funnet å være negativt assosiert med anti-SSA/Ro60 (Tabell 3). Selv om både anti-Ro positiv grupper viste en tilsvarende reduksjon i andelen av pasienter med antiphospholipid antistoffer, ELLER som er innhentet i anti-Ro52/TRIM21 gruppen var nesten 1 (0.97), mens det tilsvarende gruppen av anti-SSA/Ro60 positive pasienter var 0.33., Dette funnet reflekterer trolig en sterkere involvering av coexisting anti-SSA/Ro60 reaktivitet i negative forhold med antiphospholipid antistoffer. Faktisk, en negativ statistisk signifikant assosiasjon ble bare funnet for anti-SSA/Ro60 i egen analyse av både spesifisiteten (ELLER 0.32, CI 95% 0.13–0.79, og ELLER 0.42, CI 95% 0.15–1.20, for anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 resp.). Blant de analyserte antiphospholipid antistoff, anti-CL IgG/IgM og lupus antikoagulant (LA) ble de funnet å være mest involvert i denne negative forhold (Tabell 3)., Konsistent med det som observeres ved å analysere hele antiphospholipid gruppe, bare anti-SSA/Ro60 ble funnet å være statistisk signifikant assosiert med anti-CL IgG/IgM når to anti-Ro-antistoffer ble analysert separat (ELLER 0.29, CI 95% 0.09–0.92, og ELLER 0.28, CI 95% 0.06–1.27, for anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 resp.). Foreningen med LA var ikke statistisk analysert på grunn av den svært lave antall positive pasienter med anti-SS-Ro60 (2 pasienter) eller Ro52/TRIM21 antistoffer (1 pasienten bare).,
Anti-Sm var den eneste som ble analysert immunologiske parameter fant ikke vil bli assosiert med anti-SSA/Ro60 eller anti-Ro52/TRIM21 (Tabell 3).
3.4. Differensial Association of Anti-SSA/Ro60 og Anti-Ro52/TRIM21 med Haematological Parametere
for å bekrefte at den tidligere observerte sammenhengen mellom anti-Ro52/TRIM21 og cytopenia, vi sammenlignet nivåer av haematological parametere på tidspunktet for analyse i 128 SLE pasienter på grunnlag av deres anti-Ro52/TRIM21 status (Tabell 4). Ut av disse pasientene, 110 (86.6%) ble behandlet med antimalarials, 48 (37.,8%) med kortikosteroider, og 30 (23.6%) med immundempende medikamenter (azatioprin, metotreksat, eller mykofenolatmofetil). Ingen var motta biologisk behandling. Mener leukocyte nivåer ble funnet å være signifikant lavere i gruppen av pasienter med anti-Ro52/TRIM21 antistoffer (). Denne effekten var hovedsakelig utøves på lymfocytter siden anti-Ro52/TRIM21 positive pasienter viste betydelig lavere lymfocytt nivåer enn negative pasienter ()., Videre er sammenhengen mellom anti-Ro52/TRIM21 og lymphopenia ble ytterligere bekreftet ved logistisk regresjon, justert for kjønn, alder, og behandling på tidspunktet for analyse (ELLER 2.72, 95% CI 1.08–6.88, ).
I motsetning til når de vurderer anti-SSA/Ro60, nivåer av haematological parametere viste en annen atferd (Tabell 5). Faktisk, ingen statistisk signifikante forskjeller ble funnet om noen leukocyte befolkningen, mens anti-SSA/Ro60 positive pasientene hadde betydelig lavere hemoglobin nivå enn negative pasienter ()., På tross av denne betydelige forskjellen, mener hemoglobin nivå i positive pasienter var innenfor normalområdet. På den annen side, platetall nivåer nesten var betydelig høyere i anti-SSA/Ro60 positive pasienter enn i negative pasienter (). Dette funnet kan være påvirket av den negative association funnet av oss mellom denne anti-Ro spesifisitet og anti-CL IgG/IgM-antistoffer som, i sin tur, er kjent for å redusere platetall nivåer. Faktisk, positive pasienter for anti-CL IgG/IgM viste en tendens til å ha lavere platetall nivåer enn negative pasienter (209.8 ± 69.3 × 103/µL versus 241.1 ± 69.,6 × 103/µL, , resp.).
4. Diskusjon
I dette arbeidet, anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 har vist seg å vise et annet mønster av kliniske og immunologiske foreninger i SLE. I henhold til tidligere beskrevet forholdet mellom anti-SSA/Ro60 og SLE , denne anti-Ro spesifisitet ble funnet å være positivt assosiert med hypocomplementemia, en SLE – relaterte immunologisk funksjon., På den annen side, en negativ assosiasjon ble observert mellom anti-Ro52/TRIM21 og anti-dsDNA som er konsistent med høyere prevalens av dette antistoff i andre autoimmune tilstander som SS, myositt, SSc, og leversykdommer .
Både anti-Ro reactivities vises også annen atferd vedrørende haematologic misdannelser. Dermed, anti-Ro52/TRIM21 ble funnet å være signifikant forbundet med lymphopenia, uavhengig av den terapeutiske regimet, mens pasienter med anti-SSA/Ro60 antistoffer viste høyere platederivert tall og lavere hemoglobin nivå enn negative pasienter., Lymphopenia har før vært knyttet til tilstedeværelse av anti-Ro-antistoffer i SLE og SS . Våre funn støtter bestemte forhold av anti-Ro52/TRIM21 med lymphopenia i SLE beskrevet i tidligere arbeider . Blant de ulike lymfocytt undergrupper, bevis finnes for at CD4+ og NK-celler er involvert i lymphopenia forbundet med anti-Ro eller, mer spesifikt, med anti-Ro52/TRIM21 ., Den Ro52/TRIM21 antigen er en cytoplasma protein som kan være indusert og distribueres til kjernen eller celleoverflaten ved flere stress og proinflammatory stimuli, slik som type i og II IFNs, i forskjellige celletyper inkludert lymfocytter . Interessant, Ro52/TRIM21 uttrykk har vist seg å være oppregulert i perifert blod mononukleære celler av SLE og SS-pasienter ., Det er fristende å spekulere i at en proinflammatory miljø karakteristisk for systemiske autoimmune sykdommer vil kunne indusere uttrykk for Ro52/TRIM21 på lymfocytt overflaten slik at bindingen av spesifikke antistoffer som til slutt ville føre til celledød. I denne forbindelse har det vært beskrevet som autologous sera som inneholder anti-Ro øke celledød ved apoptosis i SLE-lymfocytt kulturer .
Anti-Ro-antistoffer har tidligere blitt funnet å være assosiert med lavere forekomst av trombocytopeni i SLE-pasienter ., En mulig rolle i anti-SSA/Ro60 reaktivitet i denne negative foreningen er støttet av trenden mot høyere nivåer av blodplater nivåer i anti-SSA/Ro60 positive pasienter enn i negative pasienter observert av oss. Likevel, våre data tyder på at denne beskyttende effekten ville være indirekte og omvendt avhengige av antiphospholipid antistoffstatus. Faktisk, har vi funnet at anti-SSA/Ro60 var negativt assosiert med antiphospholipid og anti-CL IgG/IgM-antistoffer som, i sin tur, har vært knyttet til lave platetall nivåer ., Våre data støtter også en høyere involvering av anti-SSA/Ro60 spesifisitet i de tidligere påpekt negative association of anti-Ro med anti-CL-antistoffer . Til slutt, den observerte negative effekten av anti-SSA/Ro60 på hemoglobin nivå er ikke tilstrekkelig nok til å bli vurdert som blodmangel. Dermed er alle disse funnene tyder på at anti-SSA/Ro60 har ingen patologiske effekt på noen haematological befolkningen i motsetning til det som er observert for anti-Ro52/TRIM21.,
omtrent som observert i forhold til lymphopenia, anti-Ro52/TRIM21 men ikke anti-SSA/Ro60 ble funnet å være positivt assosiert med raynauds fenomen. Dette forholdet var uavhengig av tilstedeværelse av anti-U1RNP, et antistoff som er kjent for å være relatert til raynauds fenomen selv i SLE . Antistoffer mot Ro-systemet har også blitt funnet å være assosiert med raynauds fenomen i SS ., Støtter den spesifikke rollen som anti-Ro52/TRIM21 i denne forbindelsen er det interessant å merke seg at dette antistoff har blitt oppdaget i ca 20% av pasienter med SSc, hvor raynauds fenomen er en kardinal-funksjonen . Videre, anti-Ro52/TRIM21 ble også rapportert å være den nest mest vanlige autoantistoffer i en SSc-kohorten .
Fotosensitivitet og xerophthalmia/xerostomia var de har bare funnet å være positivt assosiert med både anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21., Disse foreningene var bare statistisk signifikant både når autoantistoffer ble analysert separat sannsynligvis på grunn av det nære forholdet mellom eksisterende dem. Selv om antistoffer mot Ro systemet historisk har vært ansett for å være assosiert med fotosensitivitet, dette forholdet er fortsatt kontroversielt . I tillegg, er lite kjent om foreningen med to forskjellige reactivities ., Likevel, forbedret uttrykk for SSA/Ro60 og Ro52/TRIM21 har blitt observert i cytoplasma eller celleoverflaten av keratinocytes etter UV-bestråling og dermed støtte forholdet mellom fotosensitivitet og reaktivitet mot både antigener .
På den annen side, sammenhengen mellom xerophthalmia/xerostomia og anti-Ro er klart etablert i SLE-pasienter . I likhet med våre funn, en forening med enten anti-SSA/Ro60 eller anti-Ro52/TRIM21 har også blitt rapportert ., Disse to Ro-antigener har blitt rapportert å være uttrykt i cellen overflaten av menneskelig duktalt epitelceller under apoptosis dermed antyder en rolle i denne cellen død mekanisme i induksjon av anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 svar . Videre, spesielle anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 B-celler med et skille mønster kompatibel med plasma celler som har blitt oppdaget i spyttkjertlene av SS-pasienter .
5. Konklusjoner
Anti-SSA/Ro60 og anti-Ro52/TRIM21 viste et annet mønster av kliniske og immunologiske foreninger i SLE., Ved siden av vanlige positive assosiasjoner med fotosensitivitet og xerophthalmia/xerostomia, de to anti-Ro reactivities viste både positive og negative bestemte assosiasjoner. Anti-SSA/Ro60 ble funnet å være positivt assosiert med hypocomplementemia men negativt med antiphospholipid antistoffer, mens anti-Ro52/TRIM21 viste en positiv sammenheng med lymphopenia og raynauds fenomen og et negativt forhold med anti-dsDNA-antistoffer., Dermed våre data øker bevis på ulike sammenslutninger av både anti-Ro særtrekk med spesifikke kliniske manifestasjoner selv i en enkelt sykdom.
interessekonflikter
forfatterne rapporterer ingen interessekonflikter.
Erkjennelsene
studien fikk ingen økonomisk støtte fra en hvilken som helst organisasjon., Forfatterne takker Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH for sjenerøst gir autoantistoffer sett for foreliggende studie, Ana Ynés Martínez Paredes for henne teknisk assistanse, og Pablo Martinez Camblor fra den Biomedisinske Undersøkelser Office (OIB-FICYT) Fyrstedømmet Asturias for den statistiske analysen. De er også spesielt takknemlig for Dr. Carmen Gutiérrez og til Asociación Lúpicos de Asturias for deres oppmuntring og støtte. Iván Cabezas-Rodríguez er støttet av Río Hortega Program, Instituto de Salud Carlos III, Spania.