Le Cellule bianche del Sangue Tipi di Osservazioni, Conti e Analisi delle Urine

Leucociti

Anche riferito come i leucociti, i globuli bianchi, cellsmake ‘ 1% del volume totale del sangue e svolgono un ruolo importante ofdefending il corpo contro gli agenti infettivi (virus, batteri, ecc), foreigninvaders e infetti o cellule cancerose.,

I globuli bianchi sono divisi indue gruppi principali che includono granulociti (neutrofili, eosinofili, basofili e mastociti) e leucociti mononucleati (linfociti, monociti, macrofagie cellule dendritiche). I tipi differenti sono specializedto rispondono agli agenti infettivi o agli invasori stranieri in modi specifici thuspreventing ulteriore diffusione ed infezione.,

Microscopia

Dato che tutti i bianchi bloodcells sono più di 5 micrometri di diametro, sono abbastanza grande per essere seenusing un tipico microscopio ottico (microscopio composto).

La colorazione con la macchia di Leishman rende possibilesolo facilmente identificare diversi tipi di leucociti, ma anche contarli. Questo lo rende una delle macchie più ideali per un conteggio differenziale di cellule bianche del sangue.,

* La macchia di Leishman è una macchia romanovsky checonsiste di Eosina e blu di metilene disciolti in metanolo.,lide usingbuffered acqua distillata per diluire la macchia e lasciare riposare per circa 10 minuti

Lavare usingdistilled acqua o acqua di rubinetto per circa 1 minuto (fino a che il preparato diventa rosato)

Posizionare il cursore in anupright posizione secco, rack e lasciare asciugare (utilizzare la carta velina per cleanoff il retro e i lati del vetrino)

Visualizzare la presentazione in themicroscope di partenza con bassa potenza

* Utilizzare olio di immersione ad alto ingrandimento.,

Granulociti

Quandovisto al microscopio, lo striscio mostrerà diversi tipi di leucocitie globuli rossi. Gli studenti saranno in grado di differenziare i globuli biancibasato sulla loro forma e nucleo.

Neutrofili: se visti al microscopio, i neutrofili appariranno di forma sferica con un nucleo macchiato scuro segmentato (da 2 a 5 lobi)., Uno sguardo più attento rivelerà anche granuli fini (neutrofili) e fili sottili che collegano i lobi del nucleo (fili di cromatina)

* I neutrofili sono spesso i primi rispondenti durante l’infezione. La morte di molti neutrofili forma pus.

Eosinofili – Rispetto ai neutrofili che possono avere da 2 a 5 nuclei lobi, gli eosinofili hanno solo un nucleo bilobato (due lobi) che si forma come una scarpa da cavallo. Appariranno anche di forma sferica con finegranules riferiti come granuli refrattivi acidofili.,

Basofili – Rispetto agli altri granulociti, i basofili hanno un grande nucleo andirregular che risiede all’interno della cellula di forma sferica. Mentre ilucleo degli altri granulociti è ben definito e può essere chiaramente descritto, il nucleo di un basofilo (bluastro al microscopio) è grande e irregolare all’interno della cellula e può risultare difficile da descrivere per gli studenti.

* I basofili sono responsabili della vasodilazionedurante l’infiammazione.,

Mastociti-Se presenti, i mastociti sono sferici con un nucleo centrale e più granuli rispetto ai basofili.

Neutrofili, eosinofili,basofili e mastociti sono granulociti. La presenza di granuli nelle cellule li distinguono dagli agranulociti che mancano di granuli.,

Agranulociti

Linfociti – Mentre sono più piccoli rispetto agli altrileucociti, i linfociti hanno un grande nucleo rotondo che occupa gran parte del volume cellulare. Di conseguenza, i linfociti hanno molto poco o nessun citoplasma.,

* Ci sono due tipi di linfociti: B-cellule(cellule che producono anticorpi per distruggere gli invasori stranieri) e cellule T(responsabile per la distruzione di infetti e le cellule cancerose)

Monociti – Rispetto ai linfociti (agranular leucociti) monociti arelarger dimensioni, con un nucleo di fagiolo o a forma di rene. Queste cellule hanno anchepiù citoplasma rispetto ai linfociti.,

numero di globuli Bianchi

Conteggio dei globuli bianchi è di grande clinicalsignificance perché contribuisce alla diagnosi di varie malattie. Thiscan essere raggiunto manualmente o automaticamente.

Conteggio manuale dei globuli bianchi

È stato mostrato il conteggio manuale dei globuli bianchi per avere diversi svantaggi che includono l’essere inclini all’errore e il consumo di tempo.,

Per questo metodo, gli studenti possono contare le cellule su uno striscio di sangue (vetrino) o utilizzando un emocitometro montato su un microscopio composto. Per gli strisci, i whitecell vengono semplicemente contati scansionando diverse regioni dello striscio. Qui, gli studenti possono contare il numero di diversi tipi di globuli bianchi ondiverse regioni e calcolare le percentuali totali di ciascun tipo dileucocita.,

Esempio:

Se uno studente non conta un totale di 4 monociti da due regioni e atotal di 8 cellule bianche del sangue (tutti i globuli bianchi, le cellule contate) poi becomespossible per ottenere una percentuale di monociti disponibili; (4/8)*100 = 50%

a parte utilizzando uno striscio di sangue, un hemocytometercan anche essere usato. Un emocitometro è una camera di conteggio speciale con aree squadrate che rendono più facile contare le cellule.,

Mentre la camera è divisa in 9 aree quadrate, solo 4 (ai quattro angoli della camera) di queste sono utilizzate per il conteggio dei globuli bianchi. Per questo metodo, la griglia ècanned per i globuli bianchi che vengono identificati e contati per calcolare le loropercentuali rispettive.

* Sebbene sia possibile contare direttamente le celle bianche al microscopio, gli studenti possono anche catturare le immagini utilizzando una fotocamera digitale e scansionare le immagini per contare il numero di celle bianche.,

Conteggio automatico

Con il conteggio manuale, le imprecisioni si verificano a causa di errori di conteggio (errore umano) e a causa del fatto che i globuli bianchi potrebbero non essere distribuiti uniformemente sullo striscio. Questi problemi vengono risolti utilizzando flowcytometry.

Per questa tecnica, i globuli rossi devono essere rimossi dal sangue perché sono contaminanti. Ciò si ottiene usandosoluzioni di cloruro di ammonio per lisare i globuli rossi., Per purificare agranulocitesolo (cellule mononucleate del sangue periferico – PBMC) gli studenti possono utilizzare la procedura densitygradient, che può comportare l’uso di Ficoll-Paque PLUS Ohistopaque-1077. Tuttavia, questo non è obbligatorio.

* L’isolamento e la purificazione del PBMC comportanomescolare entrambe le soluzioni con il campione di sangue, separare le cellule usando acentrifuga e lavare le cellule usando PBS.,

Per contare il numero di globuli bianchi, una sospensione delle cellule scorre attraverso rivelatori elettronici per quantificare diverse proprietà rilevate consentendo così di contare diversi tipi di globuli bianchi.

Qui, la sospensione viene creata per creare un flusso laminare che consente alle singole celle di passare attraverso un punto di interrogazione.

Le celle sono interrotte da un fascio di luce monocromatica nel punto di interrogazione che consente di emettere luce in direzioni diverse., La luce emette quindi segnali che vengono raccolti e analizzati per dare le letture.

* Sebbene questa sia una tecnica più affidabile per il conteggio dei globuli bianchi, presenta uno svantaggio in quanto non è possibile determinare la forma o la morfologia delle cellule. Per questo motivo, è impossibile determinare se le cellule sono danneggiate o meno.,

Anormalmente Alta o Bassa Conta (WBC)

In un ambiente sano e umano adulto, il conteggio normale/numero di cellule bianche del sangue varia da circa 4.500 a 11.000 celle per micro litro di sangue. Tuttavia, il numero di diversi tipi di globuli bianchi varia., micro litro di sangue

Basofili – rende meno del 3 per cento del totale dei leucociti e la presenza di circa 300 celle per micro litro di sangue

Monociti – rende meno del 10 per cento del totale dei leucociti e l’intervallo tra i 200 e i 600 celle per micro litro di sangue

High/Low Leucociti

I numeri/numero di questi leucociti può changeto sempre di più (in modo anomalo) alta o bassa numeri., In un ambiente clinico, questoè indicativo che qualcosa non va e può aiutare con la diagnosi.

Neutrofili – Alti livelli di neutrofili (neutrofilicleucocitosi) indicano che c’è un’infezione, un’infiammazione o un datotipo di leucemia. Il conteggio anormalmente basso dei neutrofili (neutropenia) d’altra parte è associato a disturbi del midollo osseo, al trattamento del cancro e alle malattie autoimmuni.,

Monociti – Numeri anormalmente altidi monociti (monocitosi) è associato a determinati tumori, disturbi autoimmunitari e infezioni croniche tra gli altri. I conteggi anormalmente bassi(monocytopenia) d’altra parte sono associati a infezioni virali,alcune malattie congenite e malattie autoimmuni così come alcuni antibiotici.,

Linfociti – Livelli anormalmente elevati di linfociti è nota come leucocitosi linfocitica ed è associata adinfezioni virali e batteriche, nonché a linfomi e tumori dati. Abnormallylow conta o lymphocytopenia è collegato a tali infectionsas virali HIV, cattiva alimentazione come pure disordini autoimmuni tra gli altri.,

Basofili – Livelli molto elevati di basofili nel sangue sono stati identificati tra quelli con condizioni come l’ipotiroidismo tra altre infezioni e tumori, mentre un numero molto basso è stato associato a casi di leucemia, infezioni, tireotossicosie altre reazioni ipersensibili nell’organismo.,

Eosinofili – Anormalmente Alti eosinofili (ipereosinofili) sono stati collegati a una serie di reazioni come reazioni parassitarie, allergeniche e asmatiche. Dato che il numero dieosinofili può essere normalmente molto basso (fino a zero) questo non è considerato un problema.,

Analisi microscopica delle urine (Leucociti)

È possibile utilizzare l’analisi delle urine con un microscopioper determinare la presenza di globuli bianchi, che aiuta nella diagnosi divarie malattie.,

Requirements

Urine sample
A centrifuge
Glass slide

Procedure

Shake a test-tubecontaining urine and centrifuge at low speeds (2-3,000 rpm) for about 5 minutes
Decant the supernatant, butretain a small amount in the test-tube (0.,f1dff”>Agitare la provetta tosuspend il sedimento nel restante surnatante
mettere una goccia di thesuspension su di un vetrino e coprire con un coprioggetto

Esaminare il vetrino sotto themicroscope di partenza con bassa potenza, infine, che utilizza ad alta potenza

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Osservazione

A basso ingrandimento, gli studenti possono essere in grado di vedere un certo numero di oggetti, tra cui cristalli e getta., Tuttavia, ad alta potenza, gli studenti possono vedere un numero di leucociti.

Nelle urine, la presenza di un numero elevato di leucociti è riferita alla piuria, che è indicativa di un’infezione nel tratto urinario o nel rene. Nella maggior parte dei casi, i leucociti presenti nelle urine sonogranulociti che possono essere identificati a causa del loro nucleo lobato egranuli.

* A causa della mancanza di colorazione, i leucociti nelle urine possono apparire traslucidi rendendo difficile per alcuni studenti identificarli.,

Movimento e funzione

Neutrofili – I neutrofili non sono solo la prima linea di difesa,ma sono anche i leucociti più abbondanti. Una volta rilasciati, circolano percirca 10 ore di sangue e possono rimanere attivi fino a 6 giorni.

Essi canidentify invadendo organismi come batteri attraverso chemiotassi e moverelativamente veloce verso di loro utilizzando un tipo di movimento riferito a come ameboidmotion., Sotto un microscopio elettronico, i neutrofili sembrano inseguirel’organismo invasore mentre strisciano tra i globuli rossi. Una volta arrivati all’organismo invasore, inghiottono e distruggono l’organismo estraneo (batteri)attraverso un processo denominato fagocitosi.

* I neutrofili hanno anche dimostrato di incorporare protuberanze di actina e integrina che collega l’adesione nel loro movimento.

Eosinofili – Nel tessuto, la migrazione degli eosinofili ècontrollata dall’eotaxina-1 (una proteina chemioattrattante)., Qui, la sua migrazione comporta attività come il rotolamento, aderendo anche cometrasmigrazione attraverso l’endotelio. Questi processi consentono alle cellule di migrare verso siti specifici in cui sono coinvolte in reazioni allergiche.

Basofili-I basofili migrano verso i tessuti barriera dove rilasciano sostanze chimiche infiammatorie (istamina ecc.) che a loro volta hanno effetti comedilatazione dei vasi sanguigni e costrizione della muscolatura liscia.Questi effectsresults in tali risultati come pressione sanguigna diminuita.,

I basofili svolgono anche un ruolo importante un ruolo importante nell’infiammazione allergica rilasciando sostanze proinfiammatorie come i cisteinil leucotrieni.

Per raggiungere il tessuto infiammato, i basofili utilizzano tre processi principali che coinvolgono l’adesione all’endotelio vascolare,la migrazione transendoteliale e la locomozione attraverso tessuti extra vascolaritessuti. Le citochine dell’attivatore inoltre giocano un ruolo importante nel movimento casuale delle celle in cui si muovono a thesite con chemokinesis.,

Monociti-In condizioni normali, i monociti usano l’adesione per muoversi.I monociti fanno uso di tali molecole di adesione come l’integrina α4β1 (VLA-4) e le ß2integrine per aderire all’endotelio vascolare e raggiungere i siti target.

Alle giunzioni endoteliali, i monociti si comprimono tra le cellule ausiliarie attraversodiapedesi per passare nonostante le loro grandi dimensioni rispetto ad altri leucociti.Monociti distruggono organismi invasori come batteri e altri germi byingesting loro come macrofagi.,

E così, sono in grado di trasformare le cellule dendritiche in cui elaborano il materiale antigenico. Ciò rende itpossible affinchè gli anticorpi identifichino gli organismi nocivi come li distruggono.

Linfociti-Ci sono due tipi di linfociti; Tlymphocytes e linfociti B. I linfociti T (cellule T) costituiscono la maggior partelinfociti (80%) e sono prodotti nel timo. Il loro ruolo principalecomporta la distruzione di cellule danneggiate o infette. Inoltre, le cellule B svolgono un ruolo importante nella produzioneanticorpi che mirano e distruggono l’antigene specifico.,

Mentre il meccanismo è ancora pienamente compreso, gli studi hanno dimostrato che le chemochine svolgono un ruolo importante per l’adesione e la migrazione transendoteliale di alcuni linfociti.

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