Vizsgálati termékek
A tanulmány termék UC-II® (Sok 1204004) származik csirke szegycsont., A jelenlegi helyes gyártási gyakorlat (cGMP) keretében gyártották szabadalmaztatott eljárással, amely megőrizte natív szerkezetét (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Mind a glükózamin-hidrokloridot (GH), mind a kondroitin-szulfátot (CS) a Wilke Resources (Lenexa, KS) segítségével vásárolták meg. A Wellable csoport (Shishi City, Fujian) cGMP alatt gyártotta a GH-t, az Egyesült Államok Gyógyszerkönyvének 26 specifikációja szerint. A Sioux Pharm (Sioux Center, IA) szarvasmarha-eredetű CS-t gyártott a cGMP alatt., UC-II., illetve GC voltak zárt átlátszatlan, méret “00” kapszula elegendő mennyiségű segédanyagok (mikrokristályos cellulóz, szilícium-dioxid) olyan, hogy voltak szenzoros azonos a placebo-csoportban. Az InterHealth Nutraceuticals minden tananyagot biztosított. Minden amerikai gyógyszeripari (Billings, MT) ellenőrizte a hatóanyagok mennyiségét a vizsgálati kapszulákban. A tananyagokat egy biztonságos szekrényben tartották, ahol a helyszíni koordinátor, az adagoló gyógyszerész és a főnyomozó férhetett hozzá.,
vizsgálati terv
ennek a randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos klinikai vizsgálatnak az volt a célja, hogy értékelje az UC-II azon képességét, hogy javítsa a térd tüneteit az OA-alanyokban, a teljes WOMAC pontszám alapján mérve, a placebóhoz és a GC-hez képest. A tárgyalást 13 dél-indiai központban végezték. A szinoviális folyadék mintavételi eljárásainak több klinikai helyszínen történő korlátozása miatt a vizsgálatot két külön vizsgálati protokoll alapján végezték., A vizsgálati protokollokat az egyes központok intézményi Etikai Bizottsága (IEC) hagyta jóvá, és az indiai klinikai vizsgálati nyilvántartásban 003663 és 003348 vizsgálati protokollként szerepel. A beiratkozás, a randomizáció és az azt követő látogatások mindkét protokoll esetében azonosak voltak, és az 1. napon (kiindulási), 7, 30, 60, 90, 120, 150 és 180 (1. táblázat). Minden kutató ugyanazon a vizsgálóülésen vett részt, azonos beviteli és adatszolgáltatási űrlapokat használt, és ugyanazon klinikai kutatócsoport képezte és felügyelte őket.,
a hatásossági méréseket minden látogatáskor értékelték, és a WOMAC, VAS és LFI indexeket is tartalmazták. A térd hajlítási tartományát mozgás (ROM) teszt végeztük minden látogatás. A 180. nap kivételével valamennyi látogatáson alany-naplókat és vizsgálati terméket biztosítottak, és minden nyomon követési látogatás alkalmával összegyűjtötték őket., Az alanyokat arra utasították, hogy naponta rögzítsék a vizsgálati termék fogyasztását, a mentési gyógyszerek alkalmazását, valamint az egyidejűleg alkalmazott gyógyszereket a vizsgált tejtermékben a vizsgálat teljes időtartama alatt. A szűrésen és a 180. napon vért és vizeletet gyűjtöttek. A terhességi tesztet szűrővizsgálatokon és nyomon követési látogatásokon végezték. A nemkívánatos eseményeket (AES) az egyes alanyok naplóbejegyzései, valamint a beszívott személyzet által az összes tanulmányi látogatás során alkalmazott helyszíni látogatási kérdőívek segítségével rögzítették.,
klinikai végpontok
az elsődleges végpontot úgy határozták meg, hogy az UC-II csoport placebóval és GC-vel szembeni teljes WOMAC-pontszám a kiindulási értéktől a 180.napig változott. A másodlagos klinikai végpontok mindkét protokoll esetében hasonlóak voltak, és a 180.naptól a placebóhoz és a GC-hez képest a kiindulási értékhez képest a következő pontszámokat is beleértve: (1) Átlagos VAS; (2) Átlagos WOMAC subscales; (3) LFI; és (4) térd flexion. Egy másik végpont a szérum biomarker porc oligomer mátrix fehérje (COMP) kiindulási értékről a 180.napra történő változását foglalta magában., A 003348 protokollban további másodlagos végpontok közé tartozott a szérum biomarker, a C-reaktív protein (CRP) és a szinoviális folyadék biomarkerek interleukin (IL)-6, valamint a matrix metalloproteinase (MMP)-3 változása a kiindulási értéktől a 180.napig.
vizsgálati alanyok
összesen 234 vizsgálati alanyt vizsgáltak és 191 randomizáltak (ábra. 1). A vizsgálatba való felvétel kritériumai 40-75 éves férfi és női alanyok voltak, a testtömeg-index (BMI) 18-30 kg/m2, mérsékelt-súlyos OA fizikai vizsgálattal (crepitus, csontos megnagyobbodás, ízületi duzzanat stb.).,) az egyik vagy mindkét térdem, térd fájdalom legalább 3 hónappal az előtt, hogy a vizsgálat megkezdése, egy vtn vagyok pontszám között, 6, 10, valamint egy VAS pontszám 40-70 mm 7 nap után elállás kizárt gyógyszerek, plusz egy térd röntgenfelvétel volt osztályozva, mint Kellgren, valamint Lawrence (K-L) alapján pontszám 2 vagy 3 . Az összes OA-diagnózist minden vizsgálati helyszínen vizsgáló megerősítette, és az alany esetjelentési űrlapjában (CRF) feljegyezték. A kétoldali térd érintettsége esetén a vizsgálathoz használt index térd volt az, amely a vizsgálat kezdetén a legsúlyosabb OA tüneteket mutatta., A részletes befogadási-kizárási kritériumokat a 2. táblázat foglalja össze.
ebben véletlenszerűség folyamatábrát
Etikai, hozzájárulása, illetve az engedélyek
Témák toboroztak után felül, megértette, hogy a tanulmány adatait, majd aláírta az IEC által jóváhagyott beleegyező nyilatkozatot., A tanulmány megfelel a Helsinki nyilatkozatnak (1996-os változat).
Randomization & blinding
Block randomization, amely kilenc egyének blokkonként, hajtották végre egy 1:1:1 arány véletlen számok által generált független statisztikus (SPSS verzió 16.0). A randomizációs kód ismerete a statisztikus plusz egy QA monitorra korlátozódott, amely nem kapcsolódik a vizsgálathoz., Minden vizsgálónak átlátszatlan, lezárt borítékot adtak, amely egyetlen beteg személyazonossági számát, randomizációs kódokat és kiegészítő kezelési rendet jelöl vészhelyzet esetén. A kód a klinikai adatbázis zárolása után megszakadt.
adagolási rend
a betegek reggelente két kék tablettát és lefekvés előtt két fehér kapszulát fogyasztottak. Az UC-II kohorsz esetében a két reggeli kapszula placebo volt, míg az esti kapszulák egyenként 20 mg UC-II-t tartalmaztak, összesen 40 mg-ot, ami megegyezik a korábban alkalmazott klinikai dózisszintekkel . Ez az adag szállított 1.,2 mg nem denaturált II. típusú kollagén újonnan kifejlesztett és validált extrakciós-ELISA protokoll szerint (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). A GC-csoport esetében a reggeli és az esti adagok 750 mg GH plusz 600 mg CS-t adtak, összesen napi 1500 mg GH plusz 1200 mg CS-t. A placebo-csoport azonos számú, csak segédanyagokat tartalmazó kék-fehér kapszulát vett be. A vizsgálati palackokat az ICH-GCP és a vonatkozó helyi szabályozási irányelvek szerint címkézték.,
előzetes és egyidejű terápiákat
a vizsgálatot végző vizsgáló a szűrővizsgálat során dokumentálta a korábbi gyógyszereket. Minden látogatás, tanulmány személyi felül tárgy naplók, kihallgatták minden résztvevő a használata bármilyen gyógyszer egyidejű beleértve a tiltott listán. A tiltott gyógyszerek közé tartozik az ibuprofen, az aszpirin, más NSAID-ok vagy bármely más fájdalomcsillapító (OTC vagy vényköteles), valamint minden olyan étrend-kiegészítő (kivéve a vitaminokat), amely támogathatja az ízületi egészséget., A vizsgálat során alkalmazott összes egyidejű gyógyszert a vizsgálati kutató dokumentálta az alany orvosi nyilvántartásában, majd a vizsgálati személyzet átírta a CRF-be.
mentő gyógyszerek
az acetaminofen napi kétszer 500 mg dózisban engedélyezett. A résztvevőket arra utasították, hogy ne vegyék be ezt a gyógyszert az értékelő látogatástól számított 48 órán belül. A vizsgálatvezető minden látogatás alkalmával bevitte a vizsgálati alany orvosi nyilvántartásába a Felhasználási szinteket és az időzítést. A tanulmányozó személyzet átírta ezt az információt a téma CRF-jébe.,
Compliance and safety
az alanyokat arra utasították, hogy minden egyes látogatásra vigyék magukkal a palackjaikat. A fennmaradó kapszulákat megszámolták és felvették az alany CRF-és elszámoltathatósági naplójába. A megfelelés másodlagos mércéjeként az alanyok naplót készítettek, amely a vizsgálati termékek napi adagolását jelzi. A biztonsági értékeléseket a helyszíni vizsgáló és a személyzet minden látogatásakor elvégezték (lásd a 9.táblázatot).
vizsgálati értékelések
a WOMAC-pontszámokat a WOMAC VA3 segítségével határozták meg.,1 kérdőív, amely 24 tételt tartalmaz három kategóriába sorolva: fájdalom, merevség és fizikai funkció (0-2400 pontszámtartomány). Minden egyes WOMAC alskála átlagos pontszámát úgy határoztuk meg, hogy az alskála pontszámot elosztjuk a benne szereplő kérdések számával (5, fájdalom; 2, merevség; 17, fizikai funkció). Az átlagos VAS-pontszámot egy 7 fájdalommal kapcsolatos kérdést tartalmazó VAS-kérdőív segítségével határozták meg (0-700 pontszámtartomány), majd a teljes pontszámot hétre osztották., Az LFI-pontszámot egy LFI-kérdőív segítségével határozták meg, amely a fájdalmat, a gyalogtávolságot és a mindennapi élet tevékenységeit értékelte (0-24 pontszámtartomány). A térd hajlítását goniometria segítségével mértük, az alany hajlamos helyzetben fekszik, a vizsgálandó láb pedig az asztal szélén helyezkedik el .
szinoviális folyadék biomarkerek
a szinoviális folyadékot (~0,5 mL) a térdízületből egy megfelelő méretű tűvel (18-24 mérő, az ízület méretétől függően) szívták be. A betakarított folyadékot fagyasztva tárolták, amíg tesztelték., Az IL-6 és az MMP-3 szinteket a megfelelő Duoset ELISA készletekkel határoztuk meg (R&D Systems, Minneapolis, MN).
szérum biomarkerek
COMP szintek (Quantikine ELISA, R&D rendszerek) mindkét vizsgálati protokollban meghatározásra kerültek. A CRP-szinteket (Latex COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) a 003348 jegyzőkönyvben értékelték. A szérumot fagyasztva tárolták, amíg elemezték. Az INTERASSAY és intrassay variációs együtthatók a COMP és CRP esetében <5% voltak.,
statisztika
a variancia (ANOVA) 2-utas elemzésével ellenőriztük, hogy a két protokoll eredményei egyetlen analízissel kombinálhatók, bizonyítva, hogy nincs csoport a vizsgálat kölcsönhatása alapján, és hogy a két protokollban megfigyelt hatásosság nagysága hasonló volt.
módosított intent-to-treat (Mitt) analízist alkalmaztak az előzetesen meghatározott hatásossági és biztonságossági eredmények értékelésére. Ez magában foglalta az összes randomizált, fogyasztott vizsgálati terméket, és legalább egy befejezett vizsgálat utáni látogatást., Az elsődleges és másodlagos végpontok általános statisztikai jelentőségének értékeléséhez kovariancia-elemzést (ANCOVA) használtunk, amely tartalmazza a kiegészítést rögzített tényezőként és a kovariánsként vizsgált változó megfelelő kiindulási értékét. ANCOVA után a Tukey-Kramer többszörös összehasonlító tesztet alkalmazták a páronkénti statisztikai szignifikancia meghatározására és a 95% – os konfidencia intervallumok kiszámítására. Az elsődleges végpont vegyes modellű ismételt mérési (MMRM) elemzését is elvégezték, hogy figyelembe vegyék a vizsgálat során kapott többszörös értékeléseket., Ezenkívül a trapéz alakú módszert alkalmazták a görbe alatti inkrementális terület (iAUC) kiszámításához minden vizsgálati csoportban. Az iAUC becsléshez a hiányzó értékeket a sas elvárás-maximalizációs algoritmusa segítségével számították be. A csoportok közötti mentési gyógyszerhasználatot logisztikai regresszióval hasonlították össze, majd a Tukey-Kramer teszt segítségével páronkénti összehasonlításokat végeztek. Ezen túlmenően az elsődleges végpont rétegzett analízisét a kiindulási szérum COMP-szintnek megfelelően végezték el a biomarker középértékét meghaladó és alatti értéken., A különbségeket jelentősnek tekintették, ha a kapott p-érték ≤0,05 volt. Egy független statisztikus végezte el az elemzéseket és egyéb számításokat a SAS 9.3-as verziójával (Cary, NC).