Globules blancs-Types, Observations, dénombrements et analyses D'Urine

leucocytes

également appelés leucocytes, les globules blancs représentent 1% du volume sanguin total et jouent un rôle important de défense du corps contre les agents infectieux (virus, bactéries, etc.), les envahisseurs étrangers et les cellules infectées ou cancéreuses.,

les globules blancs sont divisés endeux groupes principaux qui comprennent les granulocytes (neutrophiles, éosinophiles, basophiles et mastocytes) et les leucocytes mononucléaires (lymphocytes, monocytes, macrophageset cellules dendritiques). Les différents types sont spécialisés pour répondre aux agents infectieux ou aux envahisseurs étrangers de manière spécifique, ce qui évite une propagation et une infection supplémentaires.,

la Microscopie

Étant donné que tous les blancs bloodcells sont plus de 5 micromètres de diamètre, elles sont assez grandes pour être seenusing typique d’un microscope optique (microscope optique).

la coloration avec la tache de Leishman permet de ne passeulement identifier facilement différents types de leucocytes, mais aussi les Compter. Cela en fait l’une des taches les plus idéales pour un nombre différentiel de cellules sanguines blanches.,

* la tache de Leishman est une tache Romanovsky quisiste de L’éosine et du bleu de méthylène dissous dans le méthanol.,lide usingbuffered de l’eau distillée pour diluer la tache et laisser reposer pendant environ 10 minutes

Laver la diapositive usingdistilled de l’eau ou de l’eau du robinet pendant environ 1 minute (jusqu’à ce que le frottis tourne rosé)

Placer la lame dans anupright position sur le séchage et laisser sécher (utiliser du papier de soie pour cleanoff l’arrière et les côtés de la lame)

Afficher la diapositive sous themicroscope de commencer avec une faible puissance

* Utiliser de l’huile à immersion pour un grossissement élevé.,

Granulocytes

lors de L’examen au microscope, le frottis montrera différents types de leucocytesainsi que les globules rouges. Les étudiants seront en mesure de différencier les globules blancs en fonction de leur forme et de leur noyau.

neutrophiles – vus au microscope, les neutrophiles apparaîtront de forme sphérique avec un noyau sombre et segmenté (2 à 5 lobes)., Un examen plus approfondi révélera également des granules fins (granules neutrophiles) et des fils minces reliant les lobes du noyau (fils de chromatine)

* les neutrophiles sont souvent les premiers répondants lors de l’infection. La mort de nombreux neutrophiles forme du pus.

éosinophiles – comparés aux neutrophiles qui peuvent avoir un noyau de 2 à 5 lobes, les éosinophiles n’ont qu’un noyau bi-lobé (deux lobes) qui est façonné comme un fer à cheval. Ils apparaîtront également de forme sphérique avec des granules fins appelés granules réfractifs acidophiles.,

basophiles – comparés aux autres granulocytes, les basophiles ont un gros noyau irrégulier qui réside à l’intérieur de la cellule de forme sphérique. Alors que le nucléus des autres granulocytes est bien défini et peut être clairement décrit, le noyau d’un basophile (bleuâtre au microscope) est grand et irrégulier à l’intérieur de la cellule et peut s’avérer difficile à décrire pour les étudiants.

* les basophiles sont responsables de la vasodilatation pendant l’inflammation.,

mastocytes – si présents, les mastocytes sont sphériques avec un noyau central alarge et plus de granules par rapport aux basophiles.

Neutrophiles, les éosinophiles,les basophiles et les mastocytes sont des granulocytes. La présence de granules dans cesles cellules les distinguent des agranulocytes qui manquent de granules.,

Agranulocytes

Lymphocytes – bien qu’ils soient plus petits que les autresleukocytes, les lymphocytes ont un gros noyau rond qui occupe une grande partie du volume cellulaire. En conséquence, les lymphocytes ont très peu de cytoplasme.,

* il existe deux types de lymphocytes: les cellules B(cellules qui produisent des anticorps pour détruire les envahisseurs étrangers) et les cellules T(responsables de la destruction des cellules infectées et cancéreuses)

les lymphocytes (leucocytes agranulaires) monocytes sontplus grande taille avec un noyau en forme de haricot ou de rein. Ces cellules ont égalementplasme supérieur par rapport aux lymphocytes.,

le nombre de globules Blancs

le Comptage des globules blancs est d’une grande clinicalsignificance parce qu’il contribue au diagnostic de diverses maladies. Thiscan soit être réalisé manuellement ou automatiquement.

comptage manuel des globules blancs

le comptage manuel des globules blancs a été montré pour présenter plusieurs inconvénients, notamment être sujet à des erreurs et être chronophage.,

pour cette méthode, les élèves peuvent compter les cellules sur un frottis sanguin (lame) ou en utilisant un hémocytomètre monté sur un microscope composé. Pour les frottis, les cellules blanches sont simplement comptées en scannant plusieurs régions du frottis. Ici, les étudiants peuvent compter le nombre de différents types de globules blancs surdifférentes régions et calculer les pourcentages totaux de chaque type deleucocyte.,

exemple:

si un étudiant compte un total de 4 monocytes de deux régions et un total de 8 globules blancs (tous les globules blancs comptés) alors il devient possible d’obtenir un pourcentage de monocytes disponible; (4/8)*100 = 50%

outre l’utilisation d’un frottis sanguin, un hémocytomètrepeut également être utilisé. Un hémocytomètre est une chambre de comptage spéciale avec des zones carrées qui facilitent le comptage des cellules.,

alors que la chambre est divisée en 9 zones carrées, seules 4 (aux quatre coins de la chambre) sont utilisées pour compter les globules blancs. Pour cette méthode, la grille isscanned pour les globules blancs qui sont identifiés et comptés pour calculer leurpourcentages effectifs.

* bien qu’il soit possible de compter directement les cellules blanches sous le microscope, les élèves peuvent également capturer les images à l’aide d’une caméra numérique et numériser les images pour compter le nombre de cellules blanches.,

Comptage automatique

avec le comptage manuel, des inexactitudes se produisent en raison d’erreurs de comptage (erreur humaine) et du fait que les globules blancs peuvent ne pas être uniformément répartis sur le frottis. Ces problèmes sont résolus à l’aide de flowcytometry.

pour cette technique, les globules rouges doivent être retirés du sang car ils sont des contaminants. Ceci est réalisé en utilisantsolutions de chlorure d’ammonium pour lyser les globules rouges., Pour purifier agranulocyteseulement (cellules mononucléaires du sang périphérique-PBMC), les étudiants peuvent utiliser la procédure densitygradient, qui peut impliquer L’utilisation de Ficoll-Paque plus ouhistopaque-1077. Cependant, ce n’est pas obligatoire.

* L’isolement et la purification du PBMC impliquent le mélange de l’une ou l’autre solution avec l’échantillon de sang, la séparation des cellules à l’aide d’acentrifuge et le lavage des cellules à l’aide de PBS.,

pour compter le nombre de globules blancs, une suspension cellulaire passe par des détecteurs électroniques pour quantifier différentes propriétés détectées, permettant ainsi de compter différents types de globules blancs.

ici, la suspension est faite pour créer un flux laminaire qui permet aux cellules individuelles de passer par un point d’interrogation.

les cellules sont interessées par un faisceau de lumière monochromatique au point d’interrogation qui permet d’émettre de la lumière dans différentes directions., La lumière émet ensuite des signaux qui sont collectés et analysés pour donner les lectures.

* bien qu’il s’agisse d’une technique plus fiable pour comptabiliser les cellules blanches, elle présente un inconvénient en ce qu’on ne peut pas déterminer la forme ou la morphologie des cellules. Pour cette raison, il est impossible de déterminer si les cellules sont endommagées ou pas.,

compte anormalement élevé ou faible (WBC)

chez un adulte humain en bonne santé, le nombre normal de globules blancs varie d’environ 4 500 à 11 000 cellules par micro litre de sang. Cependant, le nombre de différents types de globules blancs varie., micro litre de sang

basophiles – représente moins de 3 pour cent du total des leucocytes et peut atteindre environ 300 cellules par micro litre de sang

monocytes – représente moins de 10 pour cent du total des leucocytes et se situent entre 200 et 600 cellules par micro litre de sang

leucocytes Haut/Bas

le nombre/le nombre de ces les leucocytes peuvent changerà des nombres de plus en plus élevés ou faibles (anormalement)., Dans un cadre clinique, cetteest indicatif que quelque chose ne va pas et peut aider au diagnostic.

neutrophiles – des niveaux élevés de neutrophiles (neutrophilicleucocytose) indiquent qu’il existe une infection, une inflammation ou un donnétype de leucémie. Le nombre anormalement bas de neutrophiles (neutropénie) d’autre part est associé à des troubles de la moelle osseuse, à un traitement du cancer ainsi qu’à des troubles auto-immunes.,

monocytes – un nombre anormalement élevé de monocytes (monocytose) est associé à certains cancers, à des troubles auto-immunitaires ainsi qu’à des infections chroniques entre autres. D’autre part,des taux anormalement bas(monocytopénie) sont associés à des infections virales, à certains troubles congénitaux et à des troubles auto-immunes ainsi qu’à certains antibiotiques.,

Lymphocytes – des niveaux anormalement élevés de lymphocytes sont connus sous le nom de leucocytose lymphocytaire et sont associés à des infections virales et bactériennes ainsi qu’à des lymphomes et des cancers donnés. Le nombre anormalement bas ou la lymphocytopénie est lié à de telles infections virales comme le VIH, une mauvaise nutrition ainsi que des troubles auto-immunes entre autres.,

basophiles – des taux très élevés de basophiles dans le sang ont été identifiés chez les personnes atteintes d’hypothyroïdie parmi d’autres infections et cancers, tandis que des taux très faibles ont été associés à des cas de leucémie, d’infections, de thyrotoxicose et d’autres réactions hypersensibles dans l’organisme.,

éosinophiles – des éosinophiles anormalement élevés (hyperéosinophiles) ont été liés à un certain nombre de réactions telles que des réactions parasitaires, allergènes et asthmatiques. Étant donné que le nombre d’éosinophiles peut être normalement très faible (aussi bas que zéro), cela n’est pas considéré comme un problème.,

analyse D’Urine microscopique (leucocytes)

L’analyse d’urine à l’aide d’un microscope peut être utiliséepour déterminer la présence de globules blancs, ce qui aide au diagnostic dediverses maladies.,

Requirements

Urine sample
A centrifuge
Glass slide

Procedure

Shake a test-tubecontaining urine and centrifuge at low speeds (2-3,000 rpm) for about 5 minutes
Decant the supernatant, butretain a small amount in the test-tube (0.,F1dff »>secouez le tube à essai pour suspendre le sédiment dans le surnageant restant
placez une goutte de suspension sur une lame de verre et recouvrez d’un couvercle

examinez la diapositive sous themicroscope en commençant par faible puissance enfin en utilisant une puissance élevée

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observation

à faible grossissement, capable de voir un certain nombre d’objets, y compris des cristaux et des moulages., Cependant, à haute puissance, les étudiants peuvent voir un certain nombre de leucocytes.

dans l’urine, la présence d’un grand nombre de leucocytes est appelée pyurie, ce qui indique une infection des voies urinaires ou des reins. Dans la plupart des cas, les leucocytes présents dans l’urine sontgranulocytes qui peuvent être identifiés en raison de leur noyau lobé etgranules.

* en Raison de l’absence de coloration, de leucocytes dans urinemay apparaissent translucide le rendant difficile pour certains élèves de les identifier.,

le Mouvement et la Fonction

Neutrophiles – les Neutrophiles ne sont pas seulement la première ligne de défense,mais aussi le plus abondant des leucocytes. Une fois libérés, ils circulent pendant environ 10 heures dans le sang et peuvent rester actifs jusqu’à 6 jours.

ils peuvent identifier les organismes envahisseurs comme les bactéries par chimiotaxie et se déplacer rapidement vers eux en utilisant un type de mouvement appelé amoeboidmotion., Sous un microscope électronique, les neutrophiles semblent traquerl’organisme envahissant alors qu’ils rampent parmi les globules rouges. Une fois qu’ils arrivent à l’organisme envahissant, ils engloutissent et détruisent l’organisme étranger (bactéries)par un processus appelé phagocytose.

* il a également été démontré que les neutrophiles incorporent des protubérances d’actine et une adhérence de liaison d’intégrine dans leur mouvement.

éosinophiles – dans les tissus, la migration des éosinophiles est contrôlée par l’éotaxine-1 (un chimioattractant protéique)., Ici, sa migration implique des activités telles que le roulement, l’adhésion ainsi que l’astransmigration à travers l’endothélium. Ces processus permettent aux cellules de migrer vers des sites spécifiques où elles sont impliquées dans des réactions allergiques.

basophiles – les basophiles migrent vers les tissus barrières où ils libèrent des produits chimiques inflammatoires (histamine, etc.) qui, à leur tour, ont des effets tels quedilatation des vaisseaux sanguins et constriction des muscles lisses.Ces effetsrésultats dans des résultats tels que la diminution de la pression artérielle.,

les basophiles jouent également un rôle important dans l’inflammation allergique en libérant des produits chimiques pro-inflammatoires tels que les leucotriènes cystéinyl.

pour atteindre le tissu enflammé, les basophiles utilisent trois processus majeurs qui impliquent l’adhésion à l’endothélium vasculaire,la migration transendothéliale ainsi que la locomotion à travers des tissus vascularisés supplémentaires. Les cytokines activatrices jouent également un rôle important dans le mouvement aléatoire des cellules où elles se déplacent vers le site par chimiokinèse.,

Monocytes-dans des conditions normales, les monocytes utilisent l’adhérence pour se déplacer.Les Monocytes utilisent des molécules d’adhésion telles que l’intégrine α4β1 (VLA-4) et les ß2integrines pour adhérer à l’endothélium vasculaire et atteindre les sites cibles.

au niveau des jonctions endothéliales, les monocytes se faufilent entre les cellules auxiliaires à travers la diapédèse pour passer malgré leur grande taille par rapport aux autres leucocytes.Les Monocytes détruisent les organismes envahisseurs tels que les bactéries et autres germes en les testant comme macrophages.,

Et ainsi, ils sont capables de transformer des cellules dendritiques où ils traitent du matériel antigénique. Cela rendpossible pour les anticorps d’identifier les organismes nuisibles comme les détruire.

Lymphocytes – il existe deux types de lymphocytes; les Tlymphocytes et les lymphocytes B. Les lymphocytes T (cellules T) constituent la majorité delymphocytes (80%) et sont produits dans le thymus. Leur rôle principalimplique la destruction des cellules endommagées ou infectées. En outre, les cellules B jouent un rôle important dans la productionanticorps qui ciblent et détruisent l’antigène spécifique.,

bien que le mécanisme soit bien compris, des études ont montré que les chimiokines jouent un rôle important pour l’adhésion et la migration transendothéliale de certains lymphocytes.

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