résumé
Il existe peu d’informations sur l’association des anticorps anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 avec les caractéristiques du lupus erytémateux disséminé (LED). Dans ce travail, nous avons analysé les associations de réactivités anti-Ro avec des manifestations cliniques et immunologiques chez 141 patients atteints de LED. La photosensibilité et la xérophtalmie / xérostomie ont été associées positivement à la fois à l’anti-SSA / Ro60 ( et, resp.) et anti-Ro52 / TRIM21 (et, ADM.)., En revanche, une association négative a été détectée concernant les anticorps anti-phospholipides, les anti-SSA / Ro60 ayant un effet plus fort () que les anti-Ro52/TRIM21. L’Anti-SSA/Ro60 a montré une association positive spécifique avec l’hypocomplementémie (), principalement avec de faibles taux de C4 (), tandis que l’anti-Ro52/TRIM21 s’est avéré être positivement associé au phénomène de Raynaud () et à la cytopénie () et négativement associé à l’anti-dsDNA (). Les Lymphocytes sont impliqués dans la relation entre l’anti-Ro52/TRIM21 et la cytopénie puisque les patients positifs ont montré des niveaux cellulaires inférieurs à ceux des patients négatifs ()., En conclusion, anti-SSA / Ro60 et anti-Ro52 / TRIM21 ont montré des associations communes et spécifiques dans SLE. Ces données augmentent ainsi la preuve des différentes associations des deux spécificités anti-Ro même dans une maladie particulière.
1. Introduction
Les anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 sont parmi les auto-anticorps les plus couramment détectés dans le dépistage systématique des maladies auto-immunes systémiques., Bien que les deux réactivités d’anticorps aient été considérées comme faisant partie du système anti-Ro pendant longtemps, il est maintenant clairement établi que leurs antigènes sont différents, ne font pas partie d’un complexe macromoléculaire stable et sont situés dans différents compartiments cellulaires (examiné dans ). De plus, les anticorps anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 ont également été associés à un schéma différent de manifestations cliniques., Ainsi, la présence d’anti-SSA/Ro60 est liée à des processus auto-immunes, principalement le lupus érythémateux disséminé (LED) et le syndrome de Sjögren (SS), alors que l’anti-Ro52/TRIM21 montre un spectre plus large d’associations de maladies . Les principales entités auto-immunes cliniques associées à l’anti-Ro52/TRIM21 sont la SS, la sclérose systémique (SSc), les maladies auto-immunes du foie et, en particulier, la myosite où elle a été considérée comme un marqueur indépendant . En outre, l’anti-Ro52 / TRIM21 a été détecté dans des conditions non auto-immunes telles que des infections et des maladies néoplasiques ., En outre, différentes associations avec des manifestations cliniques spécifiques ont également été rapportées, en particulier pour les anti-Ro52/TRIM21. En effet, cette réactivité anti-Ro est fortement associée au bloc cardiaque congénital dans le lupus néonatal et à la maladie pulmonaire interstitielle . L’Anti-Ro52 / TRIM21 a également été associé à une maladie plus grave dans les SS, la myosite, la cirrhose biliaire primitive et l’hépatite auto-immune .
parmi les maladies auto-immunes systémiques, le LED présente un profil spécifique d’anticorps anti-Ro., Ainsi, bien que la réactivité simultanée soit le modèle d’anticorps le plus fréquent, cette maladie montre la prévalence la plus élevée d’anti-SSA/Ro60 isolés . Dans les LED, les anticorps dirigés contre le système Ro ont été historiquement associés à la photosensibilité, mais il existe peu d’informations sur l’association des deux réactivités anti-Ro avec d’autres manifestations cliniques ., Par conséquent, dans ce contexte, le but de ce travail était d’analyser si les anticorps anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 sont différentiellement associés aux critères de classification clinique et à d’autres manifestations fréquentes du LED.
2. Patients et Méthodes
2.1. Patients, sélection des sérums et caractéristiques analysées
des sérums de 141 patients atteints de LED (131 femmes, âge moyen au diagnostic 36,7 ± 14,5 ans) répondant aux critères de L’American College of Rheumatology (ACR) ont été sélectionnés pour cette étude ., Ces patients ont été suivis à l’Unité de Médecine Interne des maladies auto-immunes de L’Hôpital Universitario Central de Asturias, et leurs caractéristiques cliniques et immunologiques ont été enregistrées dans une base de données de patients atteints de LED établie dans notre région à partir de 2004 qui est périodiquement mise à jour . Les caractéristiques enregistrées dans cette base de données comprenaient les critères de classification ACR et d’autres manifestations SLE connexes ou paramètres immunologiques. Dans ce travail, toutes les caractéristiques sauf la cytopénie ont été enregistrées cumulativement., La cytopénie a été envisagée lors du diagnostic afin d’éviter l’influence du traitement sur les paramètres hématologiques. Seules les caractéristiques dont la prévalence était supérieure à 10% ont été analysées statistiquement. En particulier, les caractéristiques incluses dans l’analyse étaient les critères de classification ACR, l’alopécie non destructive, la xérophtalmie/xérostomie, le phénomène de Raynaud et l’hypocomplementémie. Tous les critères de classification ont été définis comme indiqué dans les critères ACR de 1996, à l’exception des troubles neurologiques., Dans cette manifestation de LED, le syndrome organique de cerveau, les perturbations visuelles, et la maladie périphérique et crânienne de nerf ont également été considérés en plus des saisies et de la psychose. L’hypocomplementémie a été définie comme ayant de faibles taux de C3 et/ou de C4 (<0,8 mg/dL et <0,15 mg/dL, resp.).
des sérums correspondant aux différentes révisions du patient ont été collectés et conservés à -20°C. Le dernier sérum de chaque patient a été sélectionné pour l’étude (période de collecte de février 2007 à mars 2011). L’âge moyen au moment de l’analyse était de ans.
2.2., Détermination des auto-anticorps, du complément et des paramètres hématologiques
La détermination des anticorps anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 chez les 141 patients SLE sélectionnés a été réalisée par immunoenzymatique fluoro (Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH, Fribourg, Allemagne). Le test a été effectué sur un analyseur automatisé ImmunoCAP 250. Chez tous les patients, d’autres spécificités du SLE ANA (anti-dsDNA, SS-B/La, U1RNP et Sm) et des anticorps IgG et IgM anticardiolipine (CL) ont également été déterminées simultanément avec la même méthodologie., Les concentrations de C3 et de C4 ont été mesurées par néphélométrie (Beckman Coulter Inc., Californie, etats-unis).
Les niveaux de paramètres hématologiques, quantifiés à l’aide d’un analyseur Advia 2120 (Siemens Healthcare, Erlangen, Allemagne), étaient disponibles au moment de la détermination des auto-anticorps chez 128 patients (119 femmes; âge moyen au diagnostic et à l’analyse et années, resp.). La leucopénie, la lymphopénie et la thrombocytopénie ont été considérées selon les critères ACR (<4,00 × 103/µL, <1,50 × 103/µL et <100,00 × 103/µL, ADM.,) et de l’anémie a été définie par un taux d’hémoglobine de <11,0 mg/dL chez la femme et <12,0 mg/dL chez les hommes.
2.3. Analyse statistique
l’association de la présence d’anti-SSA/Ro60 et d’anti-Ro52/TRIM21 avec les manifestations du LED a été analysée par régression logistique binaire ajustée en fonction du sexe et de l’âge au diagnostic et au moment de l’analyse., Auparavant, la présence à la fois des spécificités anti-Ro et des anticorps anti-dsDNA, SSB/La, RNP, Sm et CL a été analysée simultanément par une procédure de régression logistique par étapes avant afin de montrer son influence sur chaque manifestation clinique et paramètre immunologique. Le cas échéant, d’autres auto-anticorps jugés statistiquement influents ont été inclus dans l’analyse de régression logistique binaire des associations anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21. Dans cette analyse, les deux réactivités anti-Ro ont d’abord été incluses ensemble en tant que variables indépendantes., Afin d’éviter les effets de multicollinéarité causés par la relation étroite existant entre les deux spécificités, une analyse séparée des anticorps a été réalisée lorsqu’une association non statistiquement significative a été trouvée. Les rapports de cotes (RO) et leur intervalle de confiance (IC) à 95% ont été calculés. Les niveaux de complément et les paramètres hématologiques ont été comparés par les tests de Student ou de Mann-Whitney en fonction de la distribution des données. Les résultats ont été considérés comme statistiquement significatifs lorsque la valeur était < 0,05. L’analyse statistique a été effectuée à L’aide de SPSS 15.,0 progiciel statistique (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
3. Les résultats
3.1. Prévalence des anticorps Anti-SSA/Ro60 et Anti-Ro52/TRIM21 chez les patients atteints de LED
la présence d’anticorps anti-SSA/Ro60 et/ou anti-Ro52/TRIM21 a été détectée chez 62 des 141 patients atteints de LED analysés (44,0%). La réactivité simultanée était le principal schéma d’anticorps observé, 37 patients étant positifs pour les deux anticorps (26,2%). L’Anti-SSA/Ro60 seul était présent chez 23 patients (16,3%), tandis que la réactivité anti-Ro52/TRIM21 isolée n’a été trouvée que chez deux patients (1,4%)., Ainsi, le profil d’anticorps dans cette série de patients était en accord avec la relation établie entre les anti-SSA/Ro60 et le SLE et il n’était associé ni à l’âge au moment du diagnostic ni à la prévalence selon le sexe (Tableau 1).
3.2. Associations D’Anti-SSA / Ro60 et D’Anti-Ro52/TRIM21 avec des Manifestations cliniques dans le LED
lorsque les anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 ont été inclus simultanément comme variables indépendantes dans l’analyse de régression, la seule association significative trouvée était la cytopénie avec les anti-Ro52/TRIM21 (Tableau 2)., En raison de cette découverte, nous avons également analysé la relation entre ces autoanticorps et les différents types de critères ACR hématologiques, et une tendance à une association entre anti-Ro52/TRIM21 et leucopénie/lymphopénie a été observée (Tableau 2). La thrombocytopénie n’a pas pu être analysée car tous les patients thrombocytopéniques porteurs d’anticorps anti-Ro étaient positifs pour les deux spécificités (4 sur 4) et l’anémie hémolytique non plus n’a pas été analysée en raison du faible nombre de patients (seulement cinq) atteints de ce trouble sanguin.,
de même que la cytopénie, les ulcères buccaux et le phénomène de Raynaud ont également été associés positivement, mais pas de manière significative, à l’anti-Ro52 / TRIM21 (Tableau 2). Lorsque l’anti-Ro52 / TRIM21 a été analysé séparément sans inclure l’anti-SSA / Ro60 comme autre variable indépendante, seule l’association avec le phénomène de Raynaud est devenue statistiquement significative (OR 2.46, IC 95% 1.11–5.43, ).
aucune des manifestations cliniques restantes n’a montré d’association significative avec les anti-SSA/Ro60 et/ou les anti-Ro52 / TRIM21, que les deux anticorps aient été analysés simultanément ou séparément.,
3.3. Les Associations D’Anti-SSA / Ro60 et D’Anti-Ro52/TRIM21 avec des paramètres immunologiques dans le LED
Les Anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 ont également montré une association différente avec les paramètres immunologiques liés au LED. En effet, lorsque les deux réactivités anti-Ro ont été considérées ensemble comme des variables indépendantes, un comportement opposé a été observé concernant la présence d’anticorps anti-dsDNA et d’hypocomplementémie, les anti-SSA/Ro60 étant associés positivement et les anti-Ro52/TRIM21 associés négativement (Tableau 3)., Néanmoins, les seules associations statistiquement significatives ont été la relation négative entre les anticorps anti-Ro52/TRIM21 et les anticorps anti-dsDNA et la relation positive entre les anticorps anti-SSA/Ro60 et l’hypocomplementémie. On a constaté que de faibles concentrations de C3 et de C4 étaient associées positivement à l’anti-SSA/Ro60, mais seule l’association avec le C4 était statistiquement significative. En outre, les niveaux de cette fraction du complément, mais pas ceux de C3, étaient également significativement plus faibles chez les patients positifs anti-SSA/Ro60 que chez les patients négatifs au moment de la détermination de l’auto-anticorps (0,16 ± 0.,06 mg / dL par rapport à mg / dL, et mg/dL par rapport à mg/dL, pour, ADM., C4 et C3).
d’autre part, les anticorps antiphospholipides se sont révélés négativement associés aux anti-SSA/Ro60 (Tableau 3). Bien que les deux groupes anti-Ro positifs aient montré une diminution similaire du pourcentage de patients présentant des anticorps antiphospholipides, le RO obtenu dans le groupe anti-Ro52/TRIM21 était de près de 1 (0,97), tandis que celui correspondant au groupe des patients anti-SSA/Ro60 positifs était de 0,33., Cette découverte reflète probablement une implication plus forte de la réactivité anti-SSA/Ro60 coexistante dans la relation négative avec les anticorps antiphospholipides. En fait, une association statistiquement significative négative n’a été trouvée que pour les anti-SSA / Ro60 dans l’analyse séparée des deux spécificités (OR 0,32, IC 95–0,13-0,79, et OR 0,42, IC 95% 0,15–1,20, pour les anti-SSA/Ro60 et les anti-Ro52/TRIM21 resp.). Parmi les anticorps antiphospholipides analysés, les IgG/IgM anti-CL et l’anticoagulant lupique (LA) étaient ceux qui étaient les plus impliqués dans cette relation négative (Tableau 3)., Conformément à ce qui a été observé lors de l’analyse de l’ensemble du groupe antiphospholipide, seuls les anticorps anti-SSA/Ro60 se sont révélés statistiquement significatifs associés aux anticorps anti-CL IgG/IgM lorsque les deux anticorps anti-Ro ont été analysés séparément (OR 0,29, IC 95% 0,09–0,92, et or 0,28, IC 95% 0,06–1,27, pour les anticorps anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 resp.). L’association avec LA N’a pas été analysée statistiquement en raison du très faible nombre de patients positifs avec des anticorps anti-SS-Ro60 (2 patients) ou Ro52/TRIM21 (1 patient seulement).,
L’Anti-Sm était le seul paramètre immunologique analysé qui n’était associé ni à l’anti-SSA/Ro60 ni à l’anti-Ro52 / TRIM21 (Tableau 3).
3.4. Association différentielle D’Anti-SSA / Ro60 et D’Anti-Ro52/TRIM21 avec des paramètres hématologiques
afin de confirmer l’association précédemment observée entre anti-Ro52/TRIM21 et cytopénie, nous avons comparé les niveaux de paramètres hématologiques au moment de l’analyse chez 128 patients atteints de LED sur la base de leur statut anti-Ro52 / TRIM21 (Tableau 4). Sur ces patients, 110 (86,6%) ont été traités avec des antipaludéens, 48 (37.,8%) avec des corticostéroïdes et 30 (23,6%) avec des médicaments immunosuppresseurs (azathioprine, méthotrexate ou mycophénolate mofétil). Aucun ne recevait de thérapie biologique. Les taux moyens de leucocytes se sont révélés significativement plus faibles dans le groupe de patients présentant des anticorps anti-Ro52/TRIM21 (). Cet effet a été principalement exercé sur les lymphocytes puisque les patients anti-Ro52 / TRIM21 positifs ont montré des taux de lymphocytes significativement plus faibles que les patients négatifs ()., De plus, l’association entre les anti-Ro52/TRIM21 et la lymphopénie a été confirmée par régression logistique ajustée en fonction du sexe, de l’âge et du traitement au moment de l’analyse (OR 2,72, IC à 95% 1,08–6,88, ).
en revanche, en considérant les anti-SSA/Ro60, les niveaux de paramètres hématologiques ont montré un comportement différent (Tableau 5). En fait, aucune différence statistiquement significative n’a été trouvée concernant une population leucocytaire, alors que les patients positifs anti-SSA/Ro60 présentaient un taux d’hémoglobine significativement plus faible que les patients négatifs ()., Malgré cette différence significative, le taux d ‘ hémoglobine moyen chez les patients positifs était dans la plage normale. D’autre part, les taux de plaquettes étaient presque significativement plus élevés chez les patients anti-SSA/Ro60 positifs que chez les patients négatifs (). Cette découverte pourrait être influencée par l’association négative que nous avons trouvée entre cette spécificité anti-Ro et les anticorps anti-CL IgG/IgM qui, à leur tour, sont connus pour diminuer les niveaux de plaquettes. En effet, les patients positifs pour les IgG/IgM anti-CL ont montré une tendance à avoir des taux de plaquettes inférieurs à ceux des patients négatifs (209,8 ± 69,3 × 103/µL contre 241,1 ± 69.,6 × 103 / µL,, ADM.).
4. Discussion
dans ce travail, il a été démontré qu’anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 présentent un schéma différent d’associations cliniques et immunologiques dans le LED. Selon la relation décrite précédemment entre l’anti-SSA / Ro60 et le SLE , cette spécificité anti-Ro s’est avérée positivement associée à l’hypocomplementémie, une caractéristique immunologique liée au SLE., D’autre part, une association négative a été observée entre l’anti-Ro52/TRIM21 et l’anti-dsDNA, ce qui est compatible avec la prévalence plus élevée de cet anticorps dans d’autres affections auto-immunes telles que la SS, la myosite, la SSc et les maladies du foie .
Les deux réactivités anti-Ro ont également montré un comportement différent en ce qui concerne les anomalies hématologiques. Ainsi, les anti-Ro52 / TRIM21 se sont révélés significativement associés à la lymphopénie, indépendamment du Régime thérapeutique, tandis que les patients avec des anticorps anti-SSA/Ro60 présentaient un nombre de plaquettes plus élevé et un taux d’hémoglobine plus faible que les patients négatifs., La lymphopénie a déjà été liée à la présence d’anticorps anti-Ro dans le LED et le SS. Nos résultats confirment la relation spécifique de l’anti-Ro52 / TRIM21 avec la lymphopénie dans le LED décrite dans des travaux précédents . Parmi les différents sous-ensembles lymphocytaires, il existe des preuves que les cellules CD4+ et NK sont impliquées dans la lymphopénie associée aux anti-Ro ou, plus précisément, aux anti-Ro52/TRIM21 ., L’antigène Ro52/TRIM21 est une protéine cytoplasmique qui peut être induite et redistribuée au noyau ou à la surface cellulaire par plusieurs stimuli de stress et proinflammatoires, tels que les IFNs de type I et II, dans différents types de cellules, y compris les lymphocytes . Fait intéressant, il a été démontré que L’expression de Ro52/TRIM21 était régulée à la hausse dans les cellules mononucléées du sang périphérique des patients atteints de LED et de SS., Il est tentant de spéculer qu’un environnement pro-inflammatoire caractéristique des maladies auto-immunes systémiques pourrait induire l’expression de Ro52/TRIM21 à la surface lymphocytaire permettant ainsi la liaison d’anticorps spécifiques qui provoqueraient finalement la mort cellulaire. À cet égard, il a été décrit que des sérums autologues contenant des anti-Ro augmentent la mort cellulaire par apoptose dans des cultures de lymphocytes SLE .
des anticorps anti-Ro ont été précédemment associés à une prévalence plus faible de thrombocytopénie chez les patients atteints de LED ., Un rôle possible de la réactivité anti-SSA/Ro60 dans cette association négative est corroboré par la tendance à des niveaux de plaquettes plus élevés chez les patients positifs anti-SSA/Ro60 que chez les patients négatifs observés par nous. Néanmoins, nos données suggèrent que cet effet protecteur serait indirect et inversement dépendant du statut des anticorps antiphospholipides. En fait, nous avons constaté que l’anti-SSA / Ro60 était négativement associé aux anticorps antiphospholipides et anti-CL IgG/IgM qui, à leur tour, ont été liés à de faibles taux de plaquettes ., Nos données soutiennent également une implication plus élevée de la spécificité anti-SSA/Ro60 dans l’association négative précédemment signalée d’anti-Ro avec des anticorps anti-CL . Enfin, l’effet négatif observé des anti-SSA / Ro60 sur le taux d’hémoglobine n’est pas suffisant pour être considéré comme une anémie. Ainsi, tous ces résultats suggèrent que l’anti-SSA/Ro60 n’a aucun effet pathologique sur aucune population hématologique contrairement à celui observé pour l’anti-Ro52/TRIM21.,
semblable à celle observée en relation avec la lymphopénie, les anti-Ro52/TRIM21 mais pas les anti-SSA / Ro60 se sont révélés positivement associés au phénomène de Raynaud. Cette relation était indépendante de la présence d’anti-U1RNP, un anticorps connu pour être lié au phénomène de Raynaud même dans le LED. Des anticorps contre le système Ro ont également été trouvés pour être associés au phénomène de Raynaud dans SS., Soutenant le rôle spécifique de l’anti-Ro52 / TRIM21 dans cette association, il est intéressant de noter que cet anticorps a été détecté chez environ 20% des patients atteints de SSc, où le phénomène de Raynaud est une caractéristique cardinale . En outre, l’anti-Ro52 / TRIM21 a également été signalé comme le deuxième auto-anticorps le plus fréquent dans une cohorte de SSc .
la photosensibilité et la xérophtalmie/xérostomie étaient les seules caractéristiques associées positivement à la fois à l’anti-SSA/Ro60 et à l’anti-Ro52 / TRIM21., Ces associations n’étaient statistiquement significatives que lorsque les deux autoanticorps étaient analysés séparément, probablement en raison de la relation étroite existant entre eux. Bien que les anticorps dirigés contre le système Ro aient été historiquement considérés comme associés à la photosensibilité, cette relation reste controversée . En outre, on sait peu de choses sur l’association avec les deux réactivités différentes ., Néanmoins, une expression accrue de SSA/Ro60 et Ro52/TRIM21 a été observée dans le cytoplasme ou la surface cellulaire des kératinocytes après irradiation UV, ce qui soutient la relation entre la photosensibilité et la réactivité contre les deux antigènes .
en revanche, l’association entre xérophtalmie/xérostomie et anti-Ro est clairement établie chez les patients atteints de LED . Tout comme nos résultats, une association avec un anti-SSA/Ro60 ou un anti-Ro52/TRIM21 a également été rapportée ., Ces deux antigènes Ro se sont exprimés dans la surface cellulaire des cellules épithéliales canalaires humaines au cours de l’apoptose, suggérant ainsi un rôle de ce mécanisme de mort cellulaire dans l’induction de réponses anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 . De plus, des cellules B spécifiques anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52/TRIM21 présentant un profil différenciant compatible avec les plasmocytes ont été détectées dans les glandes salivaires de patients SS.
5. Conclusions
Anti-SSA/Ro60 et anti-Ro52 / TRIM21 ont montré un schéma différent d’associations cliniques et immunologiques dans le LED., Outre les associations positives communes avec la photosensibilité et la xérophtalmie/xérostomie, les deux réactivités anti-Ro ont montré des associations spécifiques positives et négatives. Les Anti-SSA / Ro60 se sont révélés positivement associés à l’hypocomplementémie mais négativement aux anticorps antiphospholipides, tandis que les anti-Ro52/TRIM21 ont montré une association positive avec la lymphopénie et le phénomène de Raynaud et une relation négative avec les anticorps anti-dsDNA., Ainsi, nos données augmentent les preuves sur les différentes associations des deux spécificités anti-Ro avec des manifestations cliniques spécifiques, même dans une seule maladie.
les Conflits d’Intérêts
Les auteurs rapportent pas de conflit d’intérêts.
Remerciements
l’étude n’a reçu aucun soutien financier d’aucune organisation., Les auteurs remercient Thermo Fisher Scientific-Phadia GmbH pour avoir généreusement fourni des kits d’auto-anticorps pour la présente étude, Ana Ynés Martínez Paredes pour son assistance technique et Pablo Martínez Camblor du Bureau D’Investigation biomédicale (OIB-FICYT) de la Principauté des Asturies pour l’analyse statistique. Ils sont également particulièrement reconnaissants au Dr Carmen Gutiérrez et à L’Asociación Lúpicos de Asturias pour leurs encouragements et leur soutien. Iván Cabezas-Rodríguez est soutenu par le Programme Río Hortega, Instituto de Salud Carlos III, Espagne.