El laboratorio microbiológico de NIOMs está aprobado como laboratorio de clase 2 por el Ministerio de salud de Noruega y está aprobado para trabajar con GMM (microorganismos modificados genéticamente) contenidos. El laboratorio está equipado con instalaciones para pruebas antibacterianas y el crecimiento de biopelículas en superficies de materiales.
Biofilm
Biofilm se cultiva en biomaterial en pozos de microtitulación o en un reactor de biofilm. Los compuestos antibacterianos se pueden incorporar o recubrir en la superficie del biomaterial., Se utilizan diferentes técnicas para estudiar su efecto en la formación y crecimiento de biofilm. La cantidad de biopelícula se puede cuantificar después de la tinción de safranina, y también se puede visualizar mediante microscopía electrónica. La viabilidad de la biopelícula puede determinarse mediante tinción viva/muerta y microscopía de fluorescencia/confocal, ensayo de resazurina, ensayo XTT o mediante recuento de viabilidad después de separar la biopelícula seguido de placas de agar nutriente.
el método de la unidad formadora de colonias (UFC) se puede utilizar para la identificación de microorganismos y para probar el efecto de sustancias y técnicas antimicrobianas., Es un método sensible y ampliamente aceptado dentro de la microbiología. En este método, el número de células vivas (células capaces de reproducirse) presentes en una suspensión se cuenta en una superficie de agar nutriente.
Las células bacterianas se recogen y dispersan en una solución no tóxica, como solución salina tamponada con fosfato o agua fisiológica. La suspensión celular se diluye, normalmente en una serie con una dilución de 10 veces, para obtener placas con un número contable de bacterias., Una cierta cantidad de cada dilución se platea, en réplicas de 3 o 4, en placas de petri con agar nutritivo destinado a las bacterias en cuestión. Las placas de petri se incuban en ambientes adecuados y durante un tiempo apropiado antes de contar las colonias. Cada colonia que se puede contar se llama unidad formadora de colonias (UFC), y el número de UFC está relacionado con el número viable de bacterias en la muestra. El número de bacterias en la muestra original se calcula matemáticamente, teniendo en cuenta la cantidad plateada y su factor de dilución., Los resultados a menudo se presentan como UFC / ml (unidades formadoras de colonias por mililitro) para líquidos, y UFC / g (unidades formadoras de colonias por gramo) para sólidos.
técnica de enchapado en espiral
el método tradicional con dilución y enchapado consume mucho tiempo, y por lo tanto el número de variables en una prueba puede ser limitado. Por lo tanto, el laboratorio de Microbiología de NIOM está utilizando una técnica de enchapado en espiral donde un instrumento, el plater en espiral de avispa (Figura 1), deposita un volumen dado de muestra en una placa de agar giratoria.,
el volumen de la muestra depositada por unidad de área de la placa disminuye a través de la espiral dando lugar a un efecto de dilución, y permitiendo el recuento de colonias aisladas (Figura 2) en los respectivos sectores de volumen de deposición conocido.
para el recuento de bacterias, NIOM utiliza un contador de colonias automatizado, acólito, y los resultados se transfieren directamente a Excel para un análisis posterior.