forsøgslægemidler
undersøgelsen produkt UC-II® (Masse 1204004) stammer fra kylling brystbenet., Det blev fremstillet under nuværende good manufacturing practice (cGMP) betingelser ved hjælp af en patenteret proces, der bevarede sin oprindelige struktur (Chick Cart Inc. Fort Smith, AR). Både glucosaminhydrochlorid (GH) og chondroitinsulfat (CS) blev købt gennem Resourcesilke Resources (Lene .a, KS). Wellellable group (Shishi City, Fujian) fremstillet GH under cGMP og i henhold til USA Pharmacopeia 26 SPECIFIKATIONER. Siou.Pharm (Siou. Center, IA) fremstillet bovine-afledte CS under cGMP., UC-II og GC blev indkapslet i uigennemsigtige “00” kapsler i størrelse med tilstrækkelige mængder hjælpestoffer (mikrokrystallinsk cellulose og siliciumdio .id), således at de var sensoriske identiske med placebo. InterHealth Nutraceuticals leverede alt studiemateriale. Alle amerikanske farmaceutiske (Billings, MT) verificerede mængden af aktive ingredienser i undersøgelseskapslerne. Studiematerialer blev opbevaret i et sikkert skab med adgang begrænset til coordinatorebstedskoordinatoren, dispenseringsfarmen og den vigtigste efterforsker.,
studiedesign
formålet med denne randomiserede, dobbeltblinde, placebokontrollerede kliniske undersøgelse var at evaluere UC-II ‘ s evne til at forbedre knæsymptomer hos OA-forsøgspersoner målt ved samlet WOMOMAC-score sammenlignet med placebo og GC. Forsøget blev udført på 13 centre i det sydlige Indien. På grund af en begrænsning i synovialvæskeudtagningsprocedurer på flere kliniske steder blev undersøgelsen udført under to separate undersøgelsesprotokoller., Undersøgelsesprotokoller blev godkendt af hvert centers institutionelle etiske udvalg (IEC) og opført på Indiens kliniske forsøgsregister som undersøgelsesprotokoller 003663 og 003348. Tilmelding, Randomisering og opfølgningsbesøg var identiske for begge protokoller og blev udført på dag 1 (baseline), 7, 30, 60, 90, 120, 150 og 180 (tabel 1). Alle efterforskere deltog i de samme undersøgelsesmøder, brugte identiske indtags-og datarapporteringsformularer og blev uddannet og overvåget af den samme gruppe af kliniske forskningspartnere.,
Effektivitet målinger blev vurderet ved alle besøg og i prisen WOMAC, VAS, og LFI indeks. Knæ fle .ion range of motion (ROM) test blev udført ved hvert besøg. Emnedagbøger og studieprodukt blev leveret ved alle besøg undtagen dag 180 og blev indsamlet ved alle opfølgningsbesøg., Forsøgspersoner blev instrueret til at registrere daglig forbrug af studieprodukt, brug af redningsmedicin samt samtidig medicin i emnet mejeri i hele undersøgelsens varighed. Blod og urin blev opsamlet ved screening og dag 180. Graviditetstest blev udført ved screening og opfølgende besøg. Bivirkninger (AEs) blev registreret ved hjælp af hvert fags dagbogsindgange plus spørgeskemaer til site visit administreret af indsugningspersonale ved alle studiebesøg.,
kliniske endepunkter
det primære endepunkt blev defineret som ændringen i den samlede WOMOMAC-score fra baseline til dag 180 for UC-II-gruppen versus placebo og GC. Sekundære kliniske endepunkter for begge protokoller var ens og opført ændringen fra baseline gennem dagen 180 versus placebo og GC for alle endpoints, herunder følgende point: (1) gennemsnitlig VAS; (2) betyder, WOMAC subscales; (3) LFI; og (4) knæ fleksion. Et andet endepunkt omfattede ændringen fra baseline til dag 180 for serumbiomarkørbrusk oligomer Matri protein protein (COMP)., I protokollen 003348, yderligere sekundære effektmål omfattede ændringer i serum biomarkør, C-reaktivt protein (CRP) plus synovialvæske biomarkører interleukin (IL)-6, og matrix metalloproteinase (MMP)-3 fra baseline til dag 180.
forsøgspersoner
i alt 234 forsøgspersoner blev screenet og 191 randomiseret (fig. 1). Undersøgelse inklusionskriterier var 40-75 år gamle, mandlige og kvindelige forsøgspersoner, et body-mass index (BMI) på 18-30 kg/m2, moderat-til-svær OA ved fysisk undersøgelse (crepitus, knoklet udvidelser, hævelse, osv., i et eller begge knæ, knæ smerter i mindst 3 måneder forud for starten af undersøgelsen, en LFI score på mellem 6 og 10 og en VAS score på 40-70 mm, 7 dage efter tilbagetrækning fra udelukkes, medicin, plus et røntgenbillede af knæet, der var klassificeret som Kellgren og Lawrence (K-L) røntgenbillede score på enten 2 eller 3 . Alle OA-diagnoser blev bekræftet af hver undersøgelse site investigator og noteret i fagets case report form (CRF). I tilfælde af bilateral knæinddragelse var indeksbenet, der blev brugt til undersøgelsen, det, der præsenterede de mest alvorlige OA-symptomer ved baseline., Detaljerede kriterier for inklusion og udelukkelse er sammenfattet i tabel 2.
Tilmelding og randomisering flow chart
Etik, samtykke og tilladelser
Emner, der blev ansat, efter at de har gennemgået, forstået studere detaljer, og derefter underskrevet IEC-godkendt tilladelse., Undersøgelsen var i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen (version 1996).
Randomisering & blændende
Blok-randomisering, der består af ni personer, – per gade, blev udført i en 1:1:1 ratio ved hjælp af tilfældige tal genereret af en uafhængig statistiker (SPSS version 16.0). Kendskab til randomiseringskoden var begrænset til statistikeren plus en monitora-skærm, der ikke var relateret til undersøgelsen., Hver efterforsker fik uigennemsigtige, forseglede konvolutter, der angiver enkeltpatientens identitetsnumre, randomiseringskoder, og suppleringsregime, der skal åbnes i tilfælde af en nødsituation. Koden blev brudt, efter at den kliniske database var låst.
doseringsregime
personer indtaget to blå piller om morgenen med morgenmad og to hvide kapsler før sengetid. For UC-II-kohorten var de to morgenkapsler placebo, mens aftenkapslerne indeholdt 20 mg hver UC-II i alt 40 mg, hvilket er identisk med tidligere anvendte kliniske dosisniveauer . Denne dosis leveres 1.,2 mg kollagen af type II, ikke denatureret, bestemt ved en nyudviklet og valideret ekstraktion-ELISA-protokol (AIBiotech, Richmond, VA & Chondre., Redmond, .a). For GC-gruppen leverede morgen-og aftendoserne 750 mg GH plus 600 mg CS hver i alt en daglig dosis på 1.500 mg GH plus 1.200 mg CS. Placebogruppen indtog identiske antal blå og hvide kapsler indeholdende hjælpestoffer. Undersøgelsesflasker blev mærket i henhold til ICH-GCP og gældende lokale lovgivningsmæssige retningslinjer.,
tidligere og samtidig behandling
tidligere medicin blev dokumenteret ved screeningsbesøget af undersøgelsesundersøgeren. Ved hvert besøg gennemgik studiepersonale fagdagbøger og spurgte hver deltager om brugen af samtidig medicin, herunder dem på den forbudte liste. Forbudte medicin inkluderet ibuprofen, aspirin, andre NSAID ‘ er eller andre smertestillende midler (OTC eller recept) plus eventuelle kosttilskud (eksklusive vitaminer), der kunne understøtte fælles sundhed., Alle samtidige medikamenter, der blev brugt under undersøgelsen, blev dokumenteret i fagets medicinske fortegnelse af undersøgelsesundersøgeren og derefter transkriberet til deres CRF af studiepersonale.
redningsmedicin
Acetaminophen blev tilladt i en dosis på 500 mg to gange dagligt. Deltagerne blev bedt om ikke at tage denne medicin inden for 48 timer efter et evalueringsbesøg. Usage niveauer og timing blev indtastet ved hvert besøg i fagets Journal af undersøgelsen investigator. Studiepersonale transkriberede disse oplysninger til fagets CRF.,
overholdelse og sikkerhed
forsøgspersoner blev instrueret om at bringe deres flasker til hvert besøg. De resterende kapsler blev talt og registreret i emnets CRF og accountability log. Som et sekundært mål for overholdelse afsluttede forsøgspersoner en dagbog, der indikerede daglig dosering af undersøgelsesprodukterne. Sikkerhedsvurderinger blev udført ved alle besøg af stedets investigator og personale (se tabel 9).
Studievurderinger
WOMOMAC-score blev bestemt ved hjælp af WOMOMAC VA3.,1 spørgeskema indeholdende 24 elementer grupperet i tre kategorier: smerte, stivhed og fysisk funktion (score interval 0-2400). Hver respektive meanomac subscale gennemsnitlige score blev bestemt ved at dividere subscale score med antallet af spørgsmål (5, smerte; 2, stivhed; 17, fysisk funktion) den indeholdt. Den gennemsnitlige VAS-score blev bestemt ved hjælp af et VAS-spørgeskema indeholdende 7 smerterelaterede spørgsmål (score interval 0-700) og derefter dividere den samlede score med syv., LFI-score blev bestemt ved hjælp af et LFI-spørgeskema, der vurderede smerter, gåafstand og aktiviteter i dagligdagen (scoreområde 0-24). Knæbøjning blev målt ved hjælp af goniometri med individet liggende i den udsatte position og benet, der skal testes placeret langs kanten af bordet .
synovialvæskebiomarkører
synovialvæske (~0, 5 mL) blev aspireret fra knæleddet ved hjælp af en nål i passende størrelse (18-24 gauge, afhængigt af ledstørrelse). Høstet væske blev opbevaret frosset, indtil det blev testet., IL-6 og MMP-3 niveauer blev bestemt ved hjælp af de tilsvarende Duoset ELISA kits (R&D Systemer, Minneapolis, MN).
Serumbiomarkører
COMP-niveauer (Quantiuantikine ELISA, R& D-systemer) blev bestemt i begge undersøgelsesprotokoller. CRP-niveauer (late.COBAS INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) blev vurderet i protokol 003348. Serum blev opbevaret frosset, indtil det blev analyseret. Interassay-og intrassay variationskoefficienter for COMP og CRP var <5 %.,
statistik
Vi verificerede ved hjælp af 2-vejs variansanalyse (ANOVA), at resultaterne af de to protokoller kunne kombineres til en enkelt analyse ved at demonstrere, at der ikke var nogen gruppe ved studieinteraktion, og at størrelsen af effektiviteten observeret under de to protokoller var ens.
en modificeret intent-to-treat-analyse (mITT) blev anvendt til at vurdere de effekt-og sikkerhedsresultater, der blev defineret a priori. Dette omfattede alle forsøgspersoner, der blev randomiseret, forbrugt studieprodukt og havde mindst et afsluttet besøg efter baseline., En analyse af kovarians (ANCOVA), der omfattede tilskud som en fast faktor, og den tilsvarende baseline værdien af den variabel, der testes som covariate, blev brugt til at vurdere de samlede statistiske signifikans af primære og sekundære endepunkter. Efter ANCOVA blev Tukey-Kramer multiple comparison Test anvendt til bestemmelse af parvis statistisk signifikans og beregning af 95% konfidensintervaller. Der blev også udført en mi .ed model repeated measures (MMRM) analyse af det primære endepunkt for at tage højde for de mange vurderinger, der blev opnået i løbet af denne undersøgelse., Desuden blev metoden for Trape .oider anvendt til at beregne trinvis areal under kurven (iAUC) for alle studiegrupper. For iAUC-estimering blev manglende værdier beregnet ved hjælp af forventnings-maksimeringsalgoritmen i SAS. Brug af redningsmedicin mellem grupper blev sammenlignet ved hjælp af logistisk regression efterfulgt af parvise sammenligninger ved hjælp af Tukey-Kramer-testen. Derudover blev der udført en stratificeret analyse af det primære endepunkt i henhold til baseline serum COMP-niveauer over og under medianværdien for denne biomarkør., Forskelle blev betragtet som signifikante, hvis den resulterende p-værdi var 0.0 0,05. En uafhængig statistiker udførte analyserne og andre beregninger ved hjælp af SAS version 9.3 (Cary, NC).