Hodnocené přípravky
studie výrobku UC-II® (Hodně 1204004) byl odvozen od kuřecí hrudní kosti., Byl vyroben za současných podmínek správné výrobní praxe (cGMP)pomocí patentovaného procesu, který zachoval svou původní strukturu (Chick Cart Inc., Fort Smith, AR). Jak glukosamin hydrochlorid (GH), tak chondroitin sulfát (CS) byly zakoupeny prostřednictvím Wilke Resources (Lenexa, KS). Skupina Wellable group (Shishi City, Fujian) vyráběla GH pod cGMP a podle specifikací Spojených států Pharmacopeia 26. Sioux Pharm (Sioux Center, IA) vyráběl bovinní CS pod cGMP., UC-II a GC byly zapouzdřeny v neprůhledných kapslích velikosti “ 00 “ s dostatečným množstvím pomocných látek (mikrokrystalická celulóza a oxid křemičitý) tak, aby byly senzorické identické s placebem. Interhealth Nutraceuticals poskytl všechny studijní materiály. All American Pharmaceutical (Billings, MT) ověřila množství účinných látek ve studijních kapslích. Studijní materiály byly uchovávány v bezpečném kabinetu s přístupem omezeným na koordinátora místa, výdejního lékárníka a hlavního vyšetřovatele.,
návrh Studie
cílem této randomizované, dvojitě zaslepené, placebem kontrolované klinické studie bylo zhodnotit schopnost UC-II zlepšit kolena příznaky OA předmětů, měřeno celkovým WOMAC skóre, ve srovnání s placebem a GC. Proces byl proveden ve 13 centrech v jižní Indii. Vzhledem k omezení postupů odběru vzorků synoviální tekutiny na více klinických místech byla studie provedena na základě dvou samostatných studijních protokolů., Studijní protokoly byly schváleny institucionální etickou komisí každého centra (IEC) a uvedeny v Indickém registru klinických studií jako studijní protokoly 003663 a 003348. Zápis, randomizace, a následné návštěvy byly shodné pro oba protokoly, a bylo provedeno ve dnech 1 (základní), 7, 30, 60, 90, 120, 150 a 180 (Tabulka 1). Všichni vyšetřovatelé se zúčastnili stejných schůzek vyšetřovatelů, použili identické formuláře pro podávání zpráv a byli vyškoleni a sledováni stejnou skupinou spolupracovníků klinického výzkumu.,
měření Účinnosti byly hodnoceny při všech návštěvách a zahrnuty WOMAC, VAS, a LFI indexy. Při každé návštěvě byl proveden test rozsahu pohybu kolena (ROM). Deníky předmětů a studijní produkt byly poskytovány při všech návštěvách kromě dne 180 a byly shromažďovány při všech následných návštěvách., Pacienti byli instruováni, aby záznam denní spotřeba obor produktu, použití záchranné medikace, stejně jako souběžná medikace v předmětu mléčné výrobky pro celou dobu trvání studie. Krev a moč byly shromážděny při screeningu a 180. den. Těhotenské testování bylo provedeno při screeningových a následných návštěvách. Nežádoucí účinky (AEs) byly zaznamenány pomocí deníkových vstupů každého subjektu plus dotazníků o návštěvách na místě spravovaných přijímacím personálem při všech studijních návštěvách.,
klinické koncové body
primární koncový bod byl definován jako změna celkového skóre WOMAC od začátku do dne 180 pro skupinu UC-II oproti placebu a GC. Sekundární klinické koncové body pro oba protokoly byly podobné a jsou zahrnuty změna od výchozího stavu do dne 180 versus placebo a GC pro všechny koncové body včetně následující výsledky: (1) poplašného systému VOZIDEL; (2) WOMAC podstupnic; (3) LFI; a (4) koleno flexe. Další sledovanou vlastnost zahrnuta změna od výchozího stavu do dne 180 pro sérový biomarker chrupavky oligomerní matrix proteinu (COMP)., V protokolu 003348 zahrnovaly další sekundární koncové body změnu sérového biomarkeru, C-reaktivního proteinu (CRP) plus biomarkerů synoviální tekutiny interleukin (IL)-6 a matrix metaloproteinázy (MMP)-3 od začátku do dne 180.
studijní předměty
bylo vyšetřeno celkem 234 subjektů a 191 randomizovaných (obr. 1). Kritéria pro zařazení do studie byly věk 40-75 let staré mužské a ženské subjekty, body-mass index (BMI) 18-30 kg/m2, středně závažné až závažné OA o fyzikální vyšetření (crepitus, kostnaté rozšíření, otok kloubů, atd.,) v jedné nebo obou kolen, bolest kolena po dobu alespoň 3 měsíců před zahájením studie, LFI skóre mezi 6 a 10 a VAS skóre 40-70 mm 7 dnů po odstoupení od vyloučeno, léky, plus koleno rentgenovém snímku, který byl klasifikován jako Kellgren a Lawrence (K-L) rentgenový snímek skóre buď 2 nebo 3 . Všechny diagnózy OA byly potvrzeny každým vyšetřovatelem studie a zaznamenány ve formuláři případové zprávy subjektu (CRF). V případě bilaterálního postižení kolena bylo indexové koleno použité pro studii to, které představovalo nejzávažnější příznaky OA na začátku., Podrobná kritéria pro zařazení a vyloučení jsou shrnuta v tabulce 2.
Zápis a randomizace vývojový diagram
Etika, souhlas a oprávnění
pacienti byli přijati poté, co budou přezkoumány, pochopil studovat detaily, a pak podepsal IEC-schválila souhlas., Studie odpovídala Helsinské deklaraci (verze 1996).
Randomizace & oslepující
Bloková randomizace, skládající se z devíti jedinců na blok, byl popraven v 1:1:1 poměr pomocí náhodných čísel generovaných nezávislé statistika (SPSS verze 16.0). Znalost randomizačního kódu byla omezena na statistiku plus jeden QA monitor nesouvisející se studií., Každý vyšetřovatel byl dán neprůhledné, uzavřené obálky označující jediného pacienta, identifikační čísla, randomizace kódy, a suplementace režimu se otevře v případě nouze. Kód byl přerušen poté, co byla klinická databáze uzamčena.
režim dávkování
subjekty požily dvě modré pilulky ráno se snídaní a dvě bílé tobolky před spaním. Pro UC-II kohorty, dvě kapsle ráno bylo placebo, zatímco večerní kapsle obsahovala 20 mg každý z UC-II v celkové výši 40 mg, který je identický s dříve použitých klinických dávkách . Tato dávka byla podána 1.,2 mg nedenaturovaný kolagen typu II, jak je stanoveno pomocí nově vyvinuté a validované extrakce-ELISA protokolu (AIBiotech, Richmond, VA & Chondrex, Redmond, WA). Pro GC skupinu, ráno a večer dávek 750 mg GH plus 600 mg CS každý v celkové denní dávce 1500 mg GH plus, 1 200 mg CS. Skupina placeba požila stejný počet modrobílých tobolek obsahujících pouze pomocné látky. Studijní láhve byly označeny podle ICH-GCP a platných místních regulačních pokynů.,
předchozí a souběžné terapie
předchozí léky byly dokumentovány při screeningové návštěvě vyšetřovatelem studie. Při každé návštěvě, obor personální přezkoumána předmět deníky a ptal se každého účastníka na použití jakýchkoli doprovodných léky, včetně těch, na seznamu zakázaných látek. Zakázané léky zahrnovaly ibuprofen, aspirin, jiné NSAID nebo jiné léky proti bolesti (OTC nebo předpis) a všechny doplňky stravy (kromě vitamínů), které by mohly podporovat zdraví kloubů., Všechny souběžné léky používané během studie byly dokumentovány v lékařském záznamu subjektu studijním vyšetřovatelem a poté přepisovány do CRF studijním personálem.
záchranné léky
acetaminofen byl povolen v dávce 500 mg dvakrát denně. Účastníci byli instruováni, aby tento lék neužívali do 48 hodin od hodnotící návštěvy. Úrovně použití a načasování byly zadány při každé návštěvě do lékařského záznamu subjektu studijním vyšetřovatelem. Pracovníci studie přepsali tyto informace do CRF subjektu.,
Soulad a bezpečnost
pacienti byli instruováni, aby přinést své lahve do každé návštěvě. Zbývající kapsle byly započítány a zaznamenány do protokolu CRF a odpovědnosti subjektu. Jako sekundární opatření shody subjekty dokončily deník s uvedením denního dávkování studijních produktů. Posouzení bezpečnosti bylo provedeno při všech návštěvách vyšetřovatele a personálu místa (viz Tabulka 9).
hodnocení studie
skóre WOMAC bylo stanoveno pomocí Womac VA3.,1 dotazník obsahující 24 položek seskupených do tří kategorií: bolest, ztuhlost a fyzická funkce (rozsah skóre 0-2400). Každé příslušné průměrné skóre SUBSCALE WOMAC bylo určeno vydělením skóre subscale počtem otázek (5, bolest; 2, tuhost; 17, fyzická funkce), které obsahovalo. Průměrné skóre VAS bylo určeno pomocí dotazníku VAS obsahujícího 7 otázek souvisejících s bolestí (rozsah skóre 0-700) a poté dělením celkového skóre o sedm., Skóre LFI bylo určeno pomocí dotazníku LFI, který hodnotil bolest, docházkovou vzdálenost a aktivity každodenního života (rozsah skóre 0-24). Flexe kolena byla měřena pomocí goniometrie s předmětem ležícím v náchylné poloze a nohou, která má být testována, umístěnou podél okraje stolu .
biomarkery synoviální tekutiny
synoviální tekutina (~0, 5 mL) byla aspirována z kolenního kloubu pomocí jehly vhodné velikosti (měřidlo 18-24, v závislosti na velikosti kloubu). Sklizená tekutina byla skladována zmrazená, dokud nebyla testována., Úrovně IL-6 a MMP-3 byly stanoveny pomocí odpovídajících souprav Duoset ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN).
sérové biomarkery
hladiny COMP (Kvantikine ELISA, R&D systémy) byly stanoveny v obou studijních protokolech. Hladiny CRP (Latex Cobas INTEGRA, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim) byly hodnoceny v protokolu 003348. Sérum bylo skladováno zmrazené, dokud nebylo analyzováno. Variační koeficienty interassay a intrassay Pro Comp a CRP byly <5%.,
Statistiky
Jsme ověřili pomocí 2-way analysis of variance (ANOVA), že výsledky z obou protokolů, mohou být kombinovány do jedné analýzy tím, že prokáže, tam byl žádná skupina studiem interakce a že velikost účinnosti pozorované za těchto dvou protokolů byl podobný.
k posouzení účinnosti a výsledků bezpečnosti, které byly a priori definovány, byla použita modifikovaná analýza intent-to-treat (mITT). To zahrnovalo všechny subjekty, které byly randomizovány, spotřebovaný studijní produkt, a měl alespoň jednu dokončenou návštěvu po základní linii., Analýza kovariance (ANCOVA), která zahrnovala doplnění jako fixní faktor a odpovídající výchozí hodnoty proměnné testovány jako kovariance, byl použit pro posouzení celkové statistické významnosti primární a sekundární parametry. Po ANCOVA, Tukey-Kramer multiple comparation test byl použit pro stanovení pairwise statistickou významnost a výpočet 95% intervaly spolehlivosti. Rovněž byla provedena smíšená modelová analýza opakovaných opatření (MMRM) primárního koncového bodu, aby se zohlednilo více hodnocení získaných během této studie., Kromě toho byla metoda lichoběžníků použita pro výpočet přírůstkové plochy pod křivkou (iAUC) pro všechny studijní skupiny. Pro odhad iAUC byly chybějící hodnoty přičteny pomocí algoritmu maximalizace očekávání v SAS. Použití záchranných léků mezi skupinami bylo porovnáno pomocí logistické regrese a následného párového srovnání pomocí testu Tukey-Kramer. Kromě toho byla provedena stratifikovaná analýza primárního koncového bodu podle výchozích hladin sérového kompu nad a pod střední hodnotou tohoto biomarkeru., Rozdíly byly považovány za významné, pokud výsledná hodnota p byla ≤0,05. Nezávislý statistik provedl analýzy a další výpočty pomocí SAS verze 9.3 (Cary, NC).